(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210018503.6 (22)申请日 2022.01.07 (71)申请人 南方医科 大学南方医院 地址 510515 广东省广州市白云区广州大 道北1838号 (72)发明人 赵丽瑛　马强　 (74)专利代理 机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 代理人 段卉 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种评估阿帕替尼治疗 敏感性和/或耐药性 的试剂盒 (57)摘要 本发明公开了一种评估阿帕替尼治疗敏感 性和/或耐药性的试剂盒， 本发明提供了一种可 以帮助临床医生根据结直肠癌患者肿瘤组织中 PEX3基因mRNA的检测情况， 确定 结直肠癌患者是 否适用氟尿嘧啶类药物治疗的试剂盒， 为制定个 性化治疗方案提供依据， 本试剂盒操作简便， 检 测时间短， 可实现高通量检测， 且价格低廉， 主要 应用于PE X3基因的检测， 可以指导临床医生用于 结直肠癌 患者的阿帕替尼用药。 权利要求书1页 说明书9页 序列表2页 附图4页 CN 114395627 A 2022.04.26 CN 114395627 A 1.检测Peroxisomal  Biogenesis  Factor 3基因mRNA的产品在制备评估阿帕替尼治疗 敏感性和/或 耐药性的试剂盒中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述试剂盒还包括检测内参基因GAPDH的 mRNA产品。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所示评估阿帕替尼治疗敏感性和/或耐药 性为评估阿帕替尼治疗结直肠癌的敏感性和/或 耐药性。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述检测Peroxisomal  Biogenesis   Factor3基因的产品为Peroxisomal  Biogenesis Factor 3基因mRNA的检测试剂盒。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述Peroxisomal  Biogenesis  Factor 3 基因mRNA的检测试剂盒含有核苷酸序列如SEQ  ID NO.1～2的引物和 核苷酸序列如SEQ  ID  NO.3的探针。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 所述Peroxisomal  Biogenesis  Factor 3 基因mRNA 的检测试剂盒还含有核苷酸序列如SEQ  ID NO.4～5的引物和核苷酸序列如SEQ   ID NO.6的探针。 7.根据权利要求5或6所述的应用， 其特征在于， 所述探针 的5’端标记FAM、 VIC、 HEX、 或 CY5荧光基团中的任何一种； 8.根据权利要求5或6所述的应用， 其特征在于， 所述探针的3 ’标记有淬灭基团BHQ1、 BHQ2的任何一种。 9.根据权利要求5或6所述的应用， 其特征在于， 所述Peroxisomal  Biogenesis   Factor3基因mRNA的检测试剂盒还 含有阴性质控品和/或阳性质控品。 10.根据权利要求5或6所述的应用， 其特征在于， 所述Peroxisomal  Biogenesis   Factor3基因mRNA的检测试剂盒还含有PCR  buffer、 逆转录酶、 RNA酶抑制剂、 热启动Taq酶、 和/或dNTPs。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114395627 A 2一种评估阿帕替尼治疗敏感性和/或 耐药性的试剂盒 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 具体地， 涉及一种评估阿帕替尼治疗敏感性和/或 耐药性的试剂盒。 背景技术 [0002]结直肠癌(colorectal  cancer,CRC)是全球发病率排名第三的常见的消化道恶性 肿瘤之一， 其 发病率与病死率均保持逐年上升的趋势。 针对中 国癌症的最新研究数据显示， 每年约37.6万人被诊断为CRC， 其发病率在所有的恶性肿瘤中排名第5位； 每年约19.1万人 死于CRC， 其病死率在所有的恶性肿瘤中排名也是第5位。 [0003]目前， 针对结直肠癌治疗的化学药物种类繁多， 有研究发现， 阿帕替尼对晚期癌有 较好临床疗效。 阿帕替尼可高度选择性竞争细胞内血管内皮生长因子受体2的ATP结合位 点， 阻断下游信号转导， 抑制肿瘤组织新生血管生成。 阿帕替尼抑制肿瘤新生血管， 被批准 用于晚期胃癌或胃食管结合部腺癌三线及以上的治疗， 该药物在其他多种肿瘤中也显示出 较好的抗肿瘤活性， 其在结直肠癌中的应用尚处于初步探索阶段。 发明内容 [0004]本研究团队在前期研究中发现， 结肠癌及正常结肠组织中PEX3的mRNA表达情况不 同， Peroxisomal  Biogenesis  Factor 3(PEX3)的mRNA低表达可 能在结肠癌的发生发展中 起重要作用。 P EX3基因的表达量与阿帕替尼药物敏感性和/或耐药性有很高的关联性， PEX3 基因表达量高， 则结直肠癌患者对阿帕替尼药物敏感性低， PEX3基因表达量低， 则对阿帕替 尼药物敏感性高。 因此， PEX3基因有望成为结直肠癌诊断和治疗的新靶点。 [0005]本发明采用的是ΔCt法， 即通过样本的PEX3基因和内参基因mRNA的Ct比较， 来对 PEX3基因表达量进行检测 。 Ct值的大小与检测物质的浓度成相关性， Ct值越小其检测物的 浓度越高， Ct值越大则该检测物的浓度越小， 所以Ct值的大小在上也可以体现出被检测样 本的表达多少情况。 一般情况下内参基因的表达量在各组织和细胞中是相对稳定的， 常用 作基因检测的参照物， 可以矫正上样误差及操作误差， 提升结果的准确性。 本发明的内参基 因的表达量是恒定的， 而PEX3基因表达量则存在个体差异， 通过比较二者的表达量的差值 即可反应出样本中PEX3基因表达量的高低。 [0006]本发明的目的是为了克服现有技术的上述不足， 提供一种评估阿帕替尼治疗敏感 性和/或耐药性的试剂盒， 开发用于PEX3基因检测的试剂盒有重要的临床意 义。 [0007]本发明的发明目的是提供检测Peroxisomal  Biogenesis  Factor 3基因的产品在 制备评估阿帕替尼治疗敏感性和/或 耐药性的试剂盒中的应用。 [0008]为了实现上述目的， 本发明是通过以下 方案予以实现的： [0009]检测Peroxisomal  Biogenesis  Factor 3基因的产品在制备评估阿帕替尼治疗敏 感性和/或 耐药性的试剂盒中的应用。 [0010]优选地， 所述试剂盒还 包括检测内参基因GAP DH的mRNA产品。说　明　书 1/9 页 3 CN 114395627 A 3