(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210457558.7 (22)申请日 2022.04.27 (71)申请人 亚能生物技 术 （深圳） 有限公司 地址 518000 广东省深圳市光明区马田街 道薯田埔社区特发光网大厦401 (72)发明人 聂青　周舒君　陈星羽　陈晨　 代文俊　潘家强　刘南松　谢秋姣　 陈涓先　 (74)专利代理 机构 深圳鼎合诚知识产权代理有 限公司 4 4281 专利代理师 周建军　彭家恩 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种用于检测宫颈细胞基因甲基化的试剂 盒 (57)摘要 一种用于检测宫颈细胞基因甲基化的试剂 盒， 所述试剂盒含有核酸引物组合， 所述核酸引 物组合含有第一引物集至第六引物集中的至少 一种引物集。 本发明筛选 出PCR扩增效率高、 特异 性强且稳定性好的引物探针对， 显著提高宫颈癌 前病变检测的灵敏度和特异性。 权利要求书4页 说明书17页 序列表9页 附图1页 CN 114672568 A 2022.06.28 CN 114672568 A 1.一种用于检测宫颈细胞基因甲基化的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒含有核酸引 物组合， 所述核酸引物组合含有第一引物集至第六引物集中的至少一种引物集； 所述第一引物集含有如下引物对中的至少一种： 第一引物对： 如SEQ  ID No： 1所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 2所示的下游引物； 第二引物对： 如SEQ  ID No： 4所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 5所示的下游引物； 第三引物对： 如SEQ  ID No： 7所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 8所示的下游引物。 所述第二引物集含有如下引物对中的至少一种： 第四引物对： 如SEQ  ID No： 10所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 11所示的下游引物； 第五引物对： 如SEQ  ID No： 13所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 14所示的下游引物； 第六引物对： 如SEQ  ID No： 16所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 17所示的下游引物； 所述第三引物集含有如下引物对中的至少一种： 第七引物对： 如SEQ  ID No： 19所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 20所示的下游引物； 第八引物对： 如SEQ  ID No： 22所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 23所示的下游引物； 第九引物对： 如SEQ  ID No： 25所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 26所示的下游引物； 所述第四引物集含有如下引物对中的至少一种： 第十引物对： 如SEQ  ID No： 28所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 29所示的下游引物； 第十一引物对： 如SEQ  ID No： 31所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 32所示的下游引物； 第十二引物对： 如SEQ  ID No： 34所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 35所示的下游引物； 所述第五引物集含有如下引物对中的至少一种： 第十三引物对： 如SEQ  ID No： 37所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 38所示的下游引物； 第十四引物对： 如SEQ  ID No： 40所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 41所示的下游引物； 第十五引物对： 如SEQ  ID No： 43所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 44所示的下游引物； 所述第六引物集含有如下引物对中的至少一种： 第十六引物对： 如SEQ  ID No： 46所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 47所示的下游引物； 第十七引物对： 如SEQ  ID No： 49所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 50所示的下游引物； 第十八引物对： 如SEQ  ID No： 52所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 53所示的下游引物。 2.如权利要求1所述的试剂 盒， 其特征在于， 所述核酸引物组合含有第 一引物集至第六 引物集中的至少两种引物集； 优选地， 所述核酸引物组合含有所述第一引物集至第六引物集中的至少三种引物集； 优选地， 所述核酸引物组合含有所述第三引物集、 第四引物集、 第六引物集； 优选地， 所述核酸引物组合用于多重PCR检测。 3.如权利要求1所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒还含有探针组合， 所述探针组 合含有至少一种以下探针集： 第一探针集： 含有SEQ  ID No： 3、 SEQ  ID No： 6、 SEQ  ID No： 9所示序列或其互补序列中 的至少一种； 第二探针集： 含有SEQ  ID No： 12、 SEQ  ID No： 15、 SEQ  ID No： 18所示序列或其互补序列 中的至少一种； 第三探针集： 含有SEQ  ID No： 21、 SEQ  ID No： 24、 SEQ  ID No： 27所示序列或其互补序列 中的至少一种；权　利　要　求　书 1/4 页 2 CN 114672568 A 2第四探针集： 含有SEQ  ID No： 30、 SEQ  ID No： 33、 SEQ  ID No： 36所示序列或其互补序列 中的至少一种； 第五探针集： 含有SEQ  ID No： 39、 SEQ  ID No： 42、 SEQ  ID No： 45所示序列或其互补序列 中的至少一种； 第六探针集： 含有SEQ  ID No： 48、 SEQ  ID No： 51、 SEQ  ID No： 54所示序列或其互补序列 中的至少一种； 优选地， 所述探针组合含有第一探针集至第六探针集中的至少两种探针集； 优选地， 所述探针组合含有第一探针集至第六探针集中的至少三种探针集； 优选地， 所述探针组合含有第三探针集、 第四探针集及第六探针集。 4.如权利要求1所述的试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒含有如下第 一引物探针组合至 第六引物探针组合中的至少一种： 第一引物探针组合含有如下引物探针集中的至少一种： 第一引物探针集： 如SEQ  ID No： 1所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 2所示的下游引物； 如 SEQ ID No： 3所示的探针； 第二引物探针集： 如SEQ  ID No： 4所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 5所示的下游引物； 如 SEQ ID No： 6所示的探针； 第三引物探针集： 如SEQ  ID No： 7所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 8所示的下游引物； 如 SEQ ID No： 9所示的探针； 第二引物探针组合含有如下引物探针集中的至少一种： 第四引物探针集： 如SEQ  ID No： 10所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 11所示的下游引物； 如SEQ ID No： 12所示的探针； 第五引物探针集： 如SEQ  ID No： 13所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 14所示的下游引物； 如SEQ ID No： 15所示的探针； 第六引物探针集： 如SEQ  ID No： 16所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 17所示的下游引物； 如SEQ ID No： 18所示的探针； 第三引物探针组合含有如下引物探针集中的至少一种： 第七引物探针集： 如SEQ  ID No： 19所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 20所示的下游引物； 如SEQ ID No： 21所示的探针； 第八引物探针集： 如SEQ  ID No： 22所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 23所示的下游引物； 如SEQ ID No： 24所示的探针； 第九引物探针集： 如SEQ  ID No： 25所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 26所示的下游引物； 如SEQ ID No： 27所示的探针； 第四引物探针组合含有如下引物探针集中的至少一种： 第十引物探针集： 如SEQ  ID No： 28所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 29所示的下游引物； 如SEQ ID No： 30所示的探针； 第十一引物探针集： 如SEQ  ID No： 31所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 32所示的下游引 物； 如SEQ ID No： 33所示的探针； 第十二引物探针集： 如SEQ  ID No： 34所示的上游引物； 如SEQ  ID No： 35所示的下游引 物； 如SEQ ID No： 36所示的探针；权　利　要　求　书 2/4 页 3 CN 114672568 A 3