(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210453214.9 (22)申请日 2022.04.27 (71)申请人 珠海宝锐生物科技有限公司 地址 519000 广东省珠海市香洲区南屏科 技工业园屏北一路3 33号1栋2楼 (72)发明人 林楚江　李倩茜　时彦祎　王进　 (74)专利代理 机构 深圳市凯博企服专利代理事 务所(特殊普通 合伙) 44482 专利代理师 李绍飞 (51)Int.Cl. C12Q 1/6806(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12Q 1/70(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/93(2006.01) (54)发明名称 一种带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速 DNA提取试剂盒及其 提取方法 (57)摘要 本发明公开了一种带磁珠进 行荧光定量PCR 检测的快速DNA提取试剂盒及其提取方法， 属于 生物工程技术领域。 所述的快速DNA提取试剂盒 包括快速DNA提取试剂盒； 所述的快速DNA提取试 剂盒包括裂解结合液LB、 洗涤液W1、 洗涤液W2、 核 酸洗脱反应液EB、 磁珠MB以及蛋白酶K。 所述的提 取方法， 包括手动核酸提取方法或搭配自动化仪 器实现高通量自动化DNA提取方法。 可带磁珠扩 增的快速DNA提取试剂， 能够满足全血、 血浆、 拭 子等多种样本类型的DNA提取， 提取后产物能直 接应用于荧光定量PCR扩增检测反应， 不需要进 行磁珠与核酸的分离， 且不影响下游检测， 能够 更简便、 更灵敏、 更 快速实现核酸的提取或纯化。 权利要求书3页 说明书14页 附图4页 CN 114657231 A 2022.06.24 CN 114657231 A 1.一种带磁珠进行荧 光定量PCR检测的快速DNA提取 试剂盒， 其特 征在于： 包括快速DNA提取 试剂盒； 所述的快速DNA提取试剂盒包括裂解结合液LB、 洗涤液W1、 洗涤液W2、 核酸洗脱反应液 EB、 磁珠MB以及蛋白酶K。 2.根据权利要求1所述的带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速DNA提取试剂盒， 其特征 在于： 所述的裂解结合液LB， 溶剂为去离 子水， 其组成体系包括如下 试剂： 3.根据权利要求1所述的带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速DNA提取试剂盒， 其特征 在于： 所述的洗涤液W1， 溶剂为去离 子水， 其组成体系包括如下 试剂： 4.根据权利要求1所述的带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速DNA提取试剂盒， 其特征 在于： 所述的洗涤液W2， 溶剂为去离 子水， 其组成体系包括如下 试剂：权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114657231 A 25.根据权利要求1所述的带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速DNA提取试剂盒， 其特征 在于： 所述的核酸洗脱反应液EB， 溶剂为0.1％质量百分比DEPC灭菌水， 其组成体系包括如 下 试剂： 6.根据权利要求1所述的带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速DNA提取试剂盒， 其特征 在于： 所述的磁珠MB为硅羟基 磁珠或硅羧基 磁珠中的一种； 所述的磁珠MB的平均粒径为10 0nm‑800nm； 所述的磁珠MB的磁珠 悬液浓度为3 0mg/mL‑100mg/mL。 7.根据权利要求1所述的带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速DNA提取试剂盒， 其特征 在于： 所述的蛋白酶K的浓度为20mg/mL ‑50mg/mL。 8.一种带磁珠进行荧 光定量PCR检测的快速DNA提取 试剂盒的提取 方法， 其特 征在于： 所述的提取方法， 包括手动核酸提取方法或搭配自动化仪器实现高通量自动化DNA提 取方法。 9.根据权利要求8所述的带磁珠进行荧光定量PCR检测的快速DNA提取试剂盒的提取方 法， 其特征在于： 其中手动核酸 提取方法， 包括以下步骤： (1)准备1.5mL的无核酸酶离心管， 按 1.5 μl/T加入磁珠MB； 其中， 磁珠MB 为硅羧基磁珠， 其浓度为5 0mg/mL； (2)在上述步骤(1)中无核酸酶离心管， 先后加入10 μl蛋白酶K和200 μl样本； 其中， 蛋白权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114657231 A 3