(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210435193.8 (22)申请日 2022.04.24 (66)本国优先权数据 20221020275 3.5 2022.03.02 CN (71)申请人 中国水产科 学研究院黄海水产研究 所 地址 266000 山东省青岛市 市南区南京路 106号 (72)发明人 隋娟　栾生　孔杰　代平　孟宪红　 罗坤　曹家旺　谭建　陈宝龙　 (74)专利代理 机构 青岛合创知识产权代理事务 所(普通合伙) 37264 专利代理师 王晓晓 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01)C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种用于鉴定对虾繁殖力的分子标记7W1及 其应用 (57)摘要 本发明提供了一种用于鉴定对虾繁殖力的 分子标记7W1及其应用。 所述 分子标记7W1的核苷 酸序列如SEQ  ID No.1所示， 其中第301位碱基G 在凡纳滨对虾 群体中的等位基因频率≥53.33% 。 本发明还提供了所述的分子标记7W1的引物， 包 括核苷酸序列如SEQ  ID No.2和SEQ  ID No.3所 示的扩增引物以及核苷酸序列如SEQ  ID No.4所 示的延伸引物。 凡纳滨对虾高繁殖力分子标记 7W1可以不受生长阶段的限制， 能够用于凡纳滨 对虾早期选育， 快速选育出繁殖性状优良的亲本 群体， 促进凡纳滨对虾高繁殖力新品种的选育进 程。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图1页 CN 114752684 A 2022.07.15 CN 114752684 A 1.一种用于鉴定对虾繁殖力的分子标记7W1及其应用， 其特征在于， 所述分子标记7W1 的核苷酸序列如SEQ  ID No.1所示。 2.根据权利要求1所述的分子标记7W1， 其特征在于， 所述分子标记7W1的第301位碱基G 为候选7W1_SNP位 点。 3.根据权利要求2所述的分子标记7W1， 其特征在于， 所述碱基G在凡纳滨对虾高繁殖力 群体中的等 位基因频率>5 3%。 4.权利要求1所述的分子标记7W1的引物， 其特征在于， 所述引物包括核苷酸序列如SEQ   ID No.2和SEQ ID No.3所示的扩增引物以及核苷酸序列如SEQ  ID No.4所示的延伸引物。 5.权利要求1所述的分子标记7W1或者权利要求4所述的分子标记7W1的引物在用于筛 选具有高繁殖力的凡纳滨 对虾群体中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 筛选具有高繁殖力的凡纳滨对虾群体的具 体步骤为： 提取凡纳滨对虾群体内测试样品的DNA， 并将其作为模板， 利用扩增引物和延伸 引物进行飞行质谱分型， 若分型结果中分子标记的第301位碱基G 的等位基因频率>53%， 则 选择该凡纳滨 对虾群体作为培 育凡纳滨 对虾高繁殖力的亲本 。 7.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 所述凡纳滨对虾群体 内测试样品的数量在 30尾以上。 8.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 在飞行质谱分型中， PCR扩增的条件为预变 性94℃ 3min； 变性94℃  30s， 退火56℃  25s， 延伸72℃  30s， 共重复40个循环； 最后延伸72 ℃ 4min； 4℃保存。 9.根据权利要求6所述的应用， 其特征在于， 在飞行质谱分型中， 延伸反应的条件为预 变性94°C 30 s； 变性94 °C 5s， 退火52 °C 5s， 延伸80 °C 5s， 共重复40个循环； 最后延伸72 °C  3min； 4°C保存。 10.权利要求1所述的分子标记7W1在凡纳滨对虾遗传多样性分析、 种质鉴定和遗传图 谱构建中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114752684 A 2一种用于鉴定对虾繁殖力的分子标记7W1及其应用 技术领域 [0001]本发明属于水产动 物分子标记辅助育种领域， 具体涉及 一种用于鉴定对虾繁殖力 的分子标记7W1及其应用。 背景技术 [0002]凡纳滨对虾(Penaeus  vannamei)又称南美白对虾、 太平洋白虾， 隶属于节肢动物 门(Arthropoda)、 甲壳纲(Crustaeea)、 十足目(Deeapoda)、 对虾科(Penaeidae)、 对虾属 (Penaeus)， 是我国和世界养殖产量最高的对虾种类， 也是单一产值最高的水产养殖种类之 一。 2020年我国养殖产量超过180万吨， 产值超过700亿元， 约占世界总产量的40％。 我国每 年种虾需求量超过100万对， 苗种需求量超过1.5万亿尾。 凡纳滨对虾具有产卵量高， 可多次 产卵的特性。 然而在苗种生产中， 雌虾的繁殖能力存在巨大个体差异。 在一个生产周期 中， 部分雌虾从未产卵， 而有的雌虾能够 多次产卵。 培育高繁殖力(产卵和产卵量)新品种， 对于 提高育苗效率， 节省生产成本具有重要意义。 繁殖性状属中低遗传力性状， 传统的育种方法 进展缓慢， 借助分子标记辅助育种技 术可有效加快选 育进程。 [0003]作为第三代分子标记， 单核苷酸多态性标记(SNP)具有丰富度高、 密度大、 稳定性 强、 共显性等特点， 成为目前虾、 蟹等经济甲壳动物中应用最广泛的分子标记 技术。 目前， 有 关凡纳滨对虾繁殖相关SNP标记的开发较少， 并且产业中缺 乏可应用于分子标记辅助育种 的标记。 因此， 开发高繁殖力的分子标记对凡纳滨 对虾的新品种培 育具有重要意 义。 发明内容 [0004]本发明提供了一种用于鉴定对虾繁殖力的分子标记7W1及其应用。 分子标记7W1能 够用于凡纳滨 对虾高繁殖力群 体的筛选中， 其鉴定效率及准确率高。 [0005]为实现上述发明目的， 本发明采用以下技 术方案予以实现： [0006]本发明提供了一种用于鉴定对虾繁殖力的分子标记7W1， 所述分子标记7W1的核苷 酸序列如SEQ  ID No.1所示。 [0007]进一步的， 所述分子标记7W1的第3 01位碱基G为 候选7W1_SNP位 点。 [0008]进一步的， 所述碱基G在凡纳滨 对虾高繁殖力群 体中的等 位基因频率>5 3％。 [0009]优选的， 所述碱基T在凡纳滨 对虾高繁殖力群 体中的等 位基因频率≥5 3.33％。 [0010]本发明还提供了分子标记 7W1的引物， 所述引物包括核苷酸序列如SEQ  ID No.2和 SEQ ID No.3所示的扩增引物以及核苷酸序列如SEQ  ID No.4所示的延伸引物。 [0011]本发明还提供了所述的分子标记7W1或者所述的分子标记7W1的引物在用于筛选 具有高繁殖力的凡纳滨 对虾群体中的应用。 [0012]进一步的， 筛选具有高繁殖力的凡纳滨对虾群体 的具体步骤为： 提取凡纳滨对虾 群体内(家系、 品系或地理群体)测试样品的DNA， 并将其作为模板， 利用所述引物进行飞行 质谱分型， 若分型结果中分子标记的第301位碱基G的等位基因频率≥53.33％， 则选择该凡 纳滨对虾群体作为培 育凡纳滨 对虾高繁殖力的亲本 。说　明　书 1/6 页 3 CN 114752684 A 3