(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210416537.0 (22)申请日 2022.04.20 (71)申请人 青岛市中心血站 地址 266071 山东省青岛市 市南区隆德路9 号 (72)发明人 朱于莉　李蓓　孙晓通　冯智慧　 (74)专利代理 机构 北京识然知识产权代理事务 所(普通合伙) 11975 专利代理师 曾庆国 (51)Int.Cl. C12Q 1/6881(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与ABO血型系统中B变异型相关的SNP位 点及其应用 (57)摘要 本发明的目的是提供一种用于检测ABO血型 系统B型变异型的SNP位点， 新的B型变异型基因 编码区域由起始密码子起第12 5位插入T碱基。 本 发明提供了一种新的B型变异型基因， 从而完善 了ABO基因库， 提供了一种快速基因诊断、 基因筛 查及遗传咨询的途径， 应用效果表明本发明所提 供的基因的SNP位点及检测引物可以有效的应用 于献血员和临床患者外周血进行新的B型变异型 基因突变位 点的快速 检测。 权利要求书1页 说明书4页 序列表2页 附图1页 CN 114561458 A 2022.05.31 CN 114561458 A 1.一种与ABO血型系统中B变异型相关的SNP位点， 其特征在于， 所述的SNP位点是核苷 酸序列为SEQ  ID NO:1的ABO血 型B等位基因编码区ATG起始第125位插 入T碱基。 2.检测权利要求1所述的SNP位点的制剂的一种用途， 其特征在于， 所述的用途是在制 备用于检测红细胞ABO血 型的制品中的应用。 3.如权利要求2所述的用途， 其特 征在于， 所述的制剂为PCR扩增 测序引物。 4.如权利 要求2所述的用途， 其特征在于， 所述的检测红细胞ABO血型的制品为PCR扩增 测序试剂盒。 5.一种用于检测ABO血型系统中B变异型的PCR扩增测序试剂盒， 其特征在于， 所述的试 剂盒中包 含有用于检测权利权利要求1所述的SNP位 点的PCR扩增 测序引物。 6.如权利要求书所述的试剂盒， 其特征在于， 所述的扩增测序引物， 其序列为SEQ  ID  NO:2和SEQ  ID NO:3。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114561458 A 2一种与ABO血型系统中B变异型相关的SNP位点 及其应用 技术领域 [0001]本发明属于基因诊断制品技术领域， 具体涉及一种与ABO血型系统中B 变异型相关 的SNP位点及其应用。 [0002]发明背景 [0003]ABO血型系统是人类认识的第一个血型系统， 也是目前为止最为重要的血型系统， 该血型系统在临床输血和新生儿溶血病中占有重要的地位。 根据红细胞表面特异性抗原 (凝集原)A或/和特异性抗原B的分布， 人们把红细胞分为A、 B、 AB和O四型， 这就组成了ABO血 型系统。 进一步， 随着分子生物学的发展， F.Ber nstein证明ABO血型分别由三个复等位基因 控制。 ABO抗原的前体是H抗原， 由FUT1基因编码； 而A基因编码一种 叫N‑乙酰氨基半乳糖基 转移酶的蛋白质(A酶)， 能把H抗原转化成A抗原； B基因编码一种叫半乳糖基转移酶的蛋白 质(B酶)， 能把H抗原转化 成B抗原； O基因不能编码有活性的酶， 故只有H抗原。 若A基因或B基 因发生突变， 就会影响所编码转移酶的活性， 导致将H抗原转变为A抗原或B抗原的能力降 低， 从而在血清学实验中表现为弱A或弱B表型。 [0004]目前对ABO血型的鉴定基本上是采用血清学实验方法， 研究人员通过调整试剂 抗‑ A和抗‑B的效价， 使得临床检验科室可以在日常血型血清学鉴定中发现弱A和 /或弱B表型。 但血型血清学检测方法会受到疾病、 药物或者个体的不规则抗体的干扰， 比如肿瘤、 白血病 等某些疾病会影响血型抗原从而导致正定型不准确， 而血清中杂蛋白、 自身抗体或不规则 抗体的存在则会干扰反定型， 这些都会导 致定型困难甚至错 误。 [0005]近年来， ABO基因分型技术日趋 发展成熟， 而基因检测可以克服血清学检测中的干 扰因素， 为临床解决了一些疑难 血型鉴定问题， 目前已是一种比较独立简 便的分型方法， 并 且得到了广泛应用。 而随着基因分型技术的普及， 越来越多的SNP位点被发掘并被认可， 这 不仅降低了临床发生ABO定型错误的风险， 而且扩大了人们对ABO亚型的认可度， 同时又进 一步促进了 分型技术的发展， 因此， SNP位点的充分发掘和完善对临床血型鉴定和安全输血 提供了保障， 并且 对基因分型技 术的广泛应用奠定 了基础。 发明内容 [0006]本发明的目的是提供与ABO血型系统中B变异型相关的SNP位点及其应用， 可以完 善ABO基因库的数据， 从而弥补现有技 术的不足。 [0007]申请人对一个呈常染色体9q34.1 ‑q34.2遗传的变异型血型基因家系成员进行测 序， 找到了该家系成员B型变异型基因存在遗传上的突变， 造成了B抗原数量和质量的改变。 [0008]本发明首先提供一种与ABO血型系统中B变异型相关的SNP位点， 为ABO血型B等位 基因(NCBI  Reference  Sequence:MZ466383.1)编码区ATG起始第125位插入T碱基， 即核苷 酸序列为SEQ  ID NO:1所述片段的第125 。 [0009]ATGGCCGAGGTGTTGCGGACGCTGGCCGGAAAACCAAAATGCCACGCACTTCGACCTATGATCCTTTT CCTAATAATGCTTGTCTTGGTCTTGTTTGGTTACGGGGTCCTAAGCCCCA GAAGTCTTAATGCCA GGAAGCCTGGA ACGGGGGTTCTGCATGGCTGTTA GGGAACCTGACCATCTGCA GCGCGTCTCGTTGCCAA GGATGGTCTACCCCCA G说　明　书 1/4 页 3 CN 114561458 A 3