(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210396431.9 (22)申请日 2022.04.15 (71)申请人 青岛农业大 学 地址 266000 山东省青岛市城阳区长城路 700号 (72)发明人 陈铁军　王莹　王立平　朱昱兴　 秦敏　战旭宁　 (74)专利代理 机构 青岛合创知识产权代理事务 所(普通合伙) 37264 专利代理师 王晓晓 (51)Int.Cl. C12N 15/56(2006.01) C12N 9/24(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 15/70(2006.01)C12N 1/21(2006.01) C12P 19/02(2006.01) C12P 19/14(2006.01) C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称 一种岩藻多糖酶基因Fcn1及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种岩藻多糖酶基因 Fcn1及 其应用。 所述 Fcn1基因的核苷酸序列如SEQ  ID  N o . 1 所 示 ， 其 来 源 于 菌 株 Flavobacteriaceaebacterium  RC2‑3。 所述岩藻 多糖酶基因 Fcn1编码的岩藻多糖酶的氨基酸序 列如SEQ ID No.2所示， 其具有降解岩藻聚糖硫 酸酯的能力。 本发明还提供了用于检测所述岩藻 多糖酶基因 Fcn1的引物的序列。 所述 Fcn1基因不 仅丰富了岩藻多糖酶基因家族， 为进一步阐明岩 藻多糖酶催 化作用机制奠定了基础， 有助于推动 岩藻多糖资源的开发利用， 具有重要的理论价值 和生产指导 意义。 权利要求书1页 说明书9页 序列表3页 附图4页 CN 114854778 A 2022.08.05 CN 114854778 A 1.一种岩 藻多糖酶基因Fcn1， 其特征在于， 所述Fcn1基因的核苷酸序列如SEQ  ID No.1 所示。 2.根据权利要求1所述的岩藻多糖酶基因Fcn1， 其特征在于， 所述Fcn1基因来源于 Flavobacteriaceae  bacterium  RC2‑3菌株。 3.用于检测权利要求1所述的岩藻多糖酶基因Fcn1的引物， 其特征在于， 所述引物的序 列为： Fcn1‑F： 5’ ‑GGTACCATGAATAAACTAATTTCAATATTTCTAGGAGGG‑3’； Fcn1‑R： 5’ ‑GGATCCTTAATCTAACCAAGTAATTTTAGCTTC‑3’。 4.权利要求1所述的岩藻多糖酶基因Fcn1编码的岩藻多糖酶， 其特征在于， 所述岩藻多 糖酶的氨基酸序列如SEQ  ID No.2所示。 5.含有权利要求1所述的岩藻多糖酶基因Fcn1的重组载体。 6.根据权利要求5所述的重组载体， 其特 征在于， 所述载体为pLB载体。 7.含有权利要求1所述的岩藻多糖酶基因Fcn1的重组菌株。 8.根据权利要求7 所述的工程菌株， 其特 征在于， 所述重组菌株为大肠杆菌 。 9.权利要求1所述的岩藻多糖酶基因Fcn1或者权利要求3所述的岩藻多糖酶在用于制 备降解岩藻聚糖硫酸酯的制剂中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述岩藻多糖酶基因Fcn1编码的岩藻多 糖酶通过降解岩藻聚糖硫酸酯中的α 1 ‑3糖苷键来达 到降解岩藻聚糖硫酸酯的作用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114854778 A 2一种岩藻 多糖酶基因 Fcn1及其应用 技术领域 [0001]本发明属于基因领域， 具体涉及一种岩藻多糖酶基因Fcn1及其应用。 背景技术 [0002]岩藻多糖是海洋环境中特有的一类多糖， 是一类 由单糖组成， 化学结构都十分复 杂的海洋硫酸多糖(10000 ‑100000Da)， 主要来源于褐藻和一些海洋无脊椎动物， 具有抗凝 血、 抗肿瘤、 抗血栓、 抗病毒、 抗氧化等多种生物学功能。 然而， 岩藻多糖分子结构的复杂性 和多样性导致生物功能与其分子结构之间的关系不明确， 严重制约了岩藻多糖在临床医 药、 保健和食品等领域的应用。 与高分子量的岩藻多糖相比， 低分子量的岩藻寡糖在生物利 用度和生物活性方面显示出一定的优势， 具有极大的应用潜力。 因此， 如何通过降解 天然大 分子量的岩藻多糖获得具有多种生理功 能的低分子量岩藻寡糖引起了 国内外科研工作者 的关注。 [0003]岩藻多糖酶是降解岩藻多糖 的关键酶， 由于岩藻多糖种类丰富， 因此降解岩藻多 糖的菌种和其产生的岩藻多糖酶也各有不同。 已报道的在CAZY数据库分类的岩藻多糖酶共 有18种， 岩藻多糖分子结构的复杂性和多样性决定了岩藻多糖酶种类和功能的多样性。 目 前报道的产岩藻多糖酶菌株存在产酶量低和产出酶的酶活力差的问题， 面对上述问题， 目 前的解决方法主要是， 通过优化培养基、 培养条件和物理诱变的方式来提升产酶量或者酶 活力， 但效果并不显著， 现在依旧无法实现岩藻多糖酶的商品化， 目前关于岩藻多糖酶的研 究主要集中在异源表达和 最基本的酶学特性表征方面对岩藻多糖酶的相关机理和底物特 异性分析都没有更深入的研究。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种岩藻多糖酶基因Fcn1及其应用。 所述Fcn1基因能够编 码岩藻多糖酶， 其对岩藻聚糖硫酸酯具有高效且专一的降解作用。 [0005]为实现上述发明目的， 本发明采用以下技 术方案予以实现： [0006]本发明提供了一种岩藻多糖酶基因Fcn1， 所述Fcn1基因的核苷酸序列如SEQ  ID  No.1所示。 [0007]进一步的， 所述Fcn1基因来源于 菌株Flavobacteriaceae  bacterium  RC2‑3菌株。 [0008]本发明还提供了用于检测所述的岩藻多糖酶基因Fcn1的引物， 所述引物的序列 为： [0009]Fcn1‑F： 5’ ‑GGTACCATGAATAAACTAATTTCAATATTTCTAGGAGGG‑3’； [0010]Fcn1‑R： 5’ ‑GGATCCTTAATCTAACCAAGTAATTTTAGCTTC‑3’。 [0011]本发明还提供了所述的岩藻多糖酶基因Fcn1编码的岩藻多糖酶， 所述岩藻多糖酶 的氨基酸序列如SEQ  ID No.2所示。 [0012]本发明还提供了含有所述的岩藻多糖酶基因Fcn1的重组载体 [0013]进一步的， 所述载体为pLB载体。说　明　书 1/9 页 3 CN 114854778 A 3