(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210399766.6 (22)申请日 2022.04.15 (71)申请人 重庆市农业科 学院 地址 401329 重庆市九龙坡区白市驿镇农 科大道 (72)发明人 陶涛　王永清　邹敏　杨洋　 田时炳　周珊珊　胡玮　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 王颖 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种区分茄子果肉颜色的DNA分子标记及应 用 (57)摘要 本发明公开了一种区分茄子果肉颜色的DNA 分子标记及应用， 属于分子生物学领域。 所述DNA 分子标记为茄子基因第8号染色体80586213到 80589660碱基位， 核苷酸序列如SEQ  ID NO： 21所 示。 还公开了扩增所述的DNA分子标记的引物对， 以及该分子标记或引物对在在茄子果肉颜色选 育中的应用。 通过试验验证发现， 本发明公开的 DNA分子标记可以将绿肉和白肉类型的材料区分 开来， 提高茄子 育种效率。 权利要求书1页 说明书9页 序列表9页 附图12页 CN 114574624 A 2022.06.03 CN 114574624 A 1.一种区分茄子果肉颜色的DNA分子标记， 其特征在于， 其为茄子基因第8号染色体 80586213到80589660碱基位， 核苷酸序列如SEQ  ID NO： 21所示。 2.扩增权利要求1中所述的DNA分子标记的引物对。 3.如权利要求2所述的引物对， 其特 征在于， 所述引物对 包括如下 所示任一对： ep7‑17F： ATGAAAACTCCACTCTACTCTACTC CAC； ep7‑17R： GTTTGCTAACGTACGC CTCAATTGCTCT； 0802018‑3F： AACTTACAGAAATCCCACATTGAGG； 0802018‑4R： CCGCGCTACACT TTCTTCCT； 0802018‑6R： CCATGTAATTGCAGTTTACTCGTTC； SSR9F： CTCTGTCAT TGTCACAT TAGG； SSR9R： ATG GTCGAATTGGCAAGAA； SSR90F： TTCTGGTTGTTCTCTTCGAT； SSR90R： TGAG GTAATGGTAAGGTCTAC； SSR‑133F： GGAGAAACAACCATCTATTC； SSR‑133R： CAACGAATTGGTGACAGT； SSR‑165F： CATCG GAGCATCACTGT T； SSR‑165R： GACCAAAGTCAAAGCAAGTT； SSR‑377F： CATGTCATCGAG GTATCATT； SSR‑377R： GCTCACACACT TGAAAGG； SSR‑852F： CAGT TGCCTGCTTAATTGTC； SSR‑852R： CGAT TGACGTGTCTGCT TA。 4.一种区分茄子果肉颜色的试剂盒， 其特征在于， 包括权利要求1所述的DNA分子标记 或权利要求2 ‑3任一项所述的引物对。 5.一种如权利 要求1所述的DNA分子标记， 或权利要求2 ‑3任一项所述的引物对， 或权利 要求4所述的试剂盒在茄子果肉颜色选 育中的应用。 6.一种利用权利要求1所述的DNA分子标记检测茄子果肉基因的方法， 其特征在于， 包 括以下步骤： (1)利用权利要求2或3所述的引物对 扩增待检测茄子果肉DNA； (2)如果扩增产物显示222bp的条带， 为白色果肉； 扩增产物仅显示199bp条带， 为绿色 果肉； 扩增产物显示2 22bp和199bp两条带时， 为绿色果肉。 7.如权利要求6所述的方法， 其特征在于， 扩增反应体系为： ddH2O 4.7 μL， 2×Mix 5 μL， F 引物和R引物各0.1 μL， 模板DNA  0.1 μL。 8.如权利要求6所述的方法， 其特征在于， 扩增程序为： 95℃预变性5min； 95℃变性 30sec、 55℃退火3 0sec、 72℃延伸1mi n， 35个循环； 反应结束后， 72℃再延伸2mi n； 4℃保存。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114574624 A 2一种区分茄子果 肉颜色的DNA分子标记及应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子生物学领域， 特别是涉及一种区分茄子果肉颜色的DNA分子标记 及应用。 背景技术 [0002]茄子(Solanum  melongena  L.)原产于印度、 东南亚热带地区， 于公元4 ‑5世纪传入 国内， 中国被认为是茄子的第二起源地。 在中国， 茄子果实形态演化出圆球、 卵圆、 长筒、 长 条、 短羊角等11种类型， 果色也演化出白、 绿、 紫红、 黑紫等8种颜色。 茄子在中 国各地广泛栽 培， 是人们喜爱 的一种重要果菜。 根据2016年联合 国粮食及农业组织(FAO)统计显示， 中国 是茄子栽培面积最大的国家， 播种面积78.19万公顷， 占世界茄子产业的43.59％。 长期以 来， 由于中国各区域多样化的气候生态类型以及差异化的消费习惯， 各区域形成了独特 的 茄子栽培品种类型， 不同区域生产和消费的茄子品种在果形、 果色、 果 肉色、 果肉软硬程度 等性状方面存在巨大差异。 茄子栽培种果肉颜色有白、 黄白、 绿白、 绿等， 果肉色差异的主要 原因是叶绿素有 无或在果 实发育过程中叶绿素积累或降解程度。 有关茄子果皮颜色的遗传 和分子标记研究相对较多， 而有关茄子果 肉色的遗传研究相对较少 。 有关与果肉相关的分 子标记还未 见报道。 发明内容 [0003]本发明的目的是提供一种区分茄子果肉颜色的DNA分子标记及应用， 以解决上述 现有技术存在的问题， 该分子标记可以将绿肉和白肉类型 的材料区分开来， 提高茄子育种 效率。 [0004]为实现上述目的， 本发明提供了如下 方案： [0005]本发明提供一种区分茄子果肉颜色的DNA分子标记， 其为茄子基因第8号染色体 80586213到80589660碱基位， 具体核苷酸序列如SEQ  ID NO： 21所示(该分子标记的基因序 列见http://eggplant‑hq.cn/Eggplant/home/index)。 [0006]本发明还提供了扩增所述的DNA分子标记的引物对。 [0007]优选的是， 所述引物对 包括如下 所示任一对： [0008]ep7‑17F(SEQ ID NO： 1)： ATGA AAACTCCACTCTACTCTACTC CAC； [0009]ep7‑17R(SEQ ID NO： 2)： GT TTGCTAACGTACGC CTCAATTGCTCT； [0010]0802018‑3F(SEQ ID NO： 3)： AACTTACAGAAATCCCACATTGAGG； [0011]0802018‑4R(SEQ ID NO： 4)： CCGCGCTACACT TTCTTCCT； [0012]0802018‑6R(SEQ ID NO： 5)： CCATGTAATTGCAGTTTACTCGTTC； [0013]SSR9F(SEQ ID NO： 6)： CTCTGTCAT TGTCACAT TAGG； [0014]SSR9R(SEQ ID NO： 7)： ATG GTCGAATTGGCAAGAA； [0015]SSR90F(SEQ  ID NO： 8)： TTCTGGTTGTTCTCTTCGAT； [0016]SSR90R(SEQ  ID NO： 9)： TGAG GTAATGGTAAGGTCTAC；说　明　书 1/9 页 3 CN 114574624 A 3