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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210383267.8 (22)申请日 2022.04.12 (83)生物保 藏信息 CCTCC M20211408 2021.1 1.15 (71)申请人 集美大学 地址 361021 福建省厦门市集美区银 江路 185号 (72)发明人 李辰睿 林茂 刘波 全睿  童桂香  (74)专利代理 机构 厦门市新 华专利商标代理有 限公司 3 5203 专利代理师 张月娥 (51)Int.Cl. C12N 7/00(2006.01) A01N 63/40(2020.01)A01P 1/00(2006.01) C12Q 1/70(2006.01) C12N 15/11(2006.01) A23K 10/18(2016.01) A23K 50/80(2016.01) A61K 35/76(2015.01) A61P 31/04(2006.01) (54)发明名称 一株鱼类致病气单胞菌噬菌体φA008及其 应用 (57)摘要 本发明公开了一株鱼类致病气单胞菌噬菌 体 及其应用, 该噬菌体 在2021年 11月15日保藏于武汉市的中国典型培养物保藏 中心, 保藏编号为CCTCCNO: M2 0211408。 所述噬菌 体对致病气单胞菌特异性强, 裂解能力强, 裂解 量可达105PFU/cell。 体外和体内实验都有效证 实了该噬菌体对致病气单胞菌有强烈的裂解作 用, 对预防和治疗由致病气单胞菌引起的水生动 物疾病提供了有效的治 疗方法。 权利要求书1页 说明书12页 序列表29页 附图4页 CN 114891754 A 2022.08.12 CN 114891754 A 1.一株嗜水气单胞菌噬菌体, 其特征在于, 所述嗜水气单胞菌噬菌体为嗜水气单胞菌 噬菌体 (Aeromonas  hydrophila  phage ), 其保藏编号为CCTCC  NO: M20211408。 2.根据权利要求1所述的嗜水气单胞菌噬菌体, 其特征在于, 所述 嗜水气单胞菌噬菌体 (Aeromonas hydrophi la phage )具有SEQ  ID No.1所示的核苷酸序列。 3.根据权利要求1或2 任一所述的嗜水气单胞菌噬菌体 (Aeromonas  hydrophila  phage )在如下(1)~(4)至少一项中的应用: (1)制备杀灭嗜水气单 胞菌的产品; (2)制备抑制嗜水气单 胞菌生长的产品; (3)制备预防和/或治疗嗜水气单 胞菌所致鱼类疾病的产品; (4)制备预防和/或治疗由嗜水气单 胞菌引起的炎症反应的产品。 4.一种噬菌体制剂, 其特征在于, 所述噬菌体制剂以权利要求1或2所述的嗜水气单胞 菌噬菌体 (Aeromonas hydrophi la phage )为活性成分。 5.根据权利要求4所述的噬菌体制剂, 其特征在于, 所述噬菌体制剂中, 嗜水气单胞菌 噬菌体 (Aeromonas hydrophi la phage )的剂量大于或等于105PFU/cell。 6.根据权利要求4所述的噬菌体制剂, 其特征在于, 所述噬菌体制剂还包括载体, 所述 载体为固体载体或液体载体。 7.根据权利要求4所述的噬菌体制剂, 其特征在于, 所述噬菌体制剂的剂型为液体制 剂、 冻干制剂或口服固体制剂。 8.权利要求 4~7任一项所述的噬菌体制剂在 如下(1)或(2)中的用途: (1)制备预防和/或治疗嗜水气单 胞菌所致鱼类疾病的产品; (2)制备预防和/或治疗由嗜水气单 胞菌引起炎症反应的产品。 9.包含权利要求1或2所述的嗜水气单胞菌噬菌体 (Aeromonas  hydrophila   phage )为有效成分的饲料 添加剂、 饮水用添加剂或环境杀菌剂。 10.一组扩增嗜水气单胞菌噬菌体 的特异性引物, 其特征在于, 所述特异性引物 的序列如SEQ  ID No.2、 SEQ ID No.3、 SEQ ID No.4、 SEQ ID No.5所示。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 114891754 A 2一株鱼类致病气单胞菌噬菌 体φA008及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域, 尤其涉及一株鱼类致病气单胞菌噬菌体 及其 应用。 背景技术 [0002]嗜水气单胞菌是革兰氏阴性细菌, 能够引发鳗鲡的败血症、 赤鳍病、 烂鳃病等, 同 时也会造成鳗鲡的脱粘、 溃疡、 肾脏发生病变、 鳃部出血等症状。 这些年来造成了我国多个 地区淡水养殖鱼类的大量死亡, 给众多养殖户造成了巨大损失的同时也对我国的淡水养殖 业带来了巨大的冲击 。 [0003]多年来, 水产养殖业在细菌性病害的治疗一直依赖于使用抗生素, 但是长期和滥 用抗生素取得的效果是有限的, 并具有使病原菌产生耐药性的危险。 因此, 亟 须寻找新的治 疗方法来代替抗生素。 噬菌体制剂作为新兴药物, 在水产细菌性疾病的防控和治疗上有着 显著的效果, 并且其特异性 强, 不会对非靶标生物造成危害以及 对环境友好, 是当前生物 技 术研究的热点。 发明内容 [0004]针对上述问题, 本发明提供了一株嗜水气单胞菌噬菌体 及其应用。 该 噬菌 体特异性强, 对嗜水气单胞菌有强烈的裂解能力, 能够在一定程度上有效的解决水产养殖 中出现的弧菌病害感染问题, 具有良好的应用前 景。 [0005]具体的, 本发明涉及以下技 术方案: [0006]本发明的第一方面, 提供了一株嗜水气单胞菌噬菌体 该噬菌体自福建省 的一个鳗鲡养殖场分离得到的, 已于2021年11月15 日保藏于中国典型培养物保藏中心, 保 藏地址为武汉市武昌珞珈山武汉大学校内。 保藏编号为CCTCC  NO: M20211408。 所述噬菌体 具有如下 特征: [0007]电镜下观测到: 该噬菌体为廿面体, 头部长为66.7nm, 头宽81.8nm, 根据国际病毒 分类委员会第九次报告的分类标准鉴定, 最后结合全基因组比对可确定该噬菌体属于肌尾 噬菌体科(Myoviridae)。 [0008]在本发明中: 所述的噬菌体在30℃~50℃下放置1h其活性稳定, 在60℃下处理1h 完全失活; 在pH为4~10左右时, 噬菌体保持较高活性; 当pH  为2时, 噬菌体完全失活; 所述 噬菌体 裂解谱较广, 裂 解能力强, 裂 解量可达105PFU/cell; 有效效价高, 感染复数为 0.1时噬菌体效价最高, 为  4.00×108pfu/mL; 噬菌体φA008潜伏期短, 裂解量大, 适合用于 噬菌体制剂的研发。 [0009]优选地, 本发明的嗜水气单胞菌噬菌体 (Aeromonas  hydrophila phage )具有SEQ  ID No.1所示的核苷酸序列。说 明 书 1/12 页 3 CN 114891754 A 3

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