(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210372691.2 (22)申请日 2022.04.11 (83)生物保 藏信息 CGMCC No. 14305 2017.0 6.15 (71)申请人 北京勤邦生物技 术有限公司 地址 102206 北京市昌平区回龙观国际信 息产业基地高新四街8号 (72)发明人 吴小胜　王兆芹　丁银巧　贾芳芳　 凡静静　惠光朋　 (51)Int.Cl. C12N 5/20(2006.01) C07K 16/12(2006.01) C12Q 1/689(2018.01) C12Q 1/6844(2018.01) C12N 15/11(2006.01)G01N 33/569(2006.01) G01N 33/543(2006.01) G01N 33/558(2006.01) G01N 33/52(2006.01) G01N 33/577(2006.01) (54)发明名称 快速检测阪崎肠杆菌技 术 (57)摘要 本发明提供了快速检测阪崎肠杆菌技术， 特 别适用于环介导等温基因扩增技术(LAMP技术) 和胶体金免疫层析技术检测食品中阪崎肠杆菌 的残留量。 本发 明筛选出一株分泌抗阪崎肠杆菌 单克隆抗体杂交瘤细胞株， 发现将其应用于环介 导等温扩增技术和胶体金免疫层析技术， 取得了 良好的实验效果。 技术要求低， 具有快速、 简便等 优点， 解决了传统检测方法时间长， 结果可靠性 差等问题， 适合各级实验室及基层单位推广使 用。 权利要求书1页 说明书9页 CN 114958773 A 2022.08.30 CN 114958773 A 1.一种分泌阪崎肠杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株， 其特征在于， 命名为F ‑4‑1， 保藏 编号为CGMCC No.14305。 2.如权利要求1所述的杂交瘤细胞株在制备检测阪崎肠杆菌的胶体金免疫层析试纸条 中的应用。 3.一种阪崎肠杆菌单克隆抗体， 其特征在于， 由权利要求1所述的杂交瘤细胞株或其传 代细胞株分泌产生。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114958773 A 2快速检测阪崎肠杆菌 技术 技术领域 [0001]本发明涉及快速检测阪崎肠杆菌技术， 特别适用于环介导等温基因扩增技术 (LAMP技术)和胶体金免疫层析技 术检测食品中阪崎肠杆菌的残留量。 背景技术 [0002]致病菌在食品安全中出现的问题越来越多， 最近北京某大学就出现了一起由致病 菌导致的群体中毒事件。 致病菌种类较多， 本申请人把 目光投到了容易引起婴幼儿尤其是 新生儿患病的阪崎肠杆菌 。 [0003]阪崎肠杆菌(又称阪崎氏肠杆菌)是肠杆菌科的一种， 1980年由黄色阴沟肠杆菌更 名为阪崎肠杆菌。 阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、 小肠结肠炎和菌血症， 死亡率高 达50％以上。 微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源， 但许多病例报告表明婴儿配方 粉是发现的主要感染渠道。 阪崎氏肠杆菌这病原体一般只感染免疫系统较弱的人士， 它对 公众健康的影响日渐令人关注。 阪崎氏肠杆菌是一种属 革兰氏阴性、 不会形成孢子而呈棒 状的细菌， 最适宜在摄氏37度至43度之间生长。 阪崎氏肠杆菌可令各年龄组别的人受入侵 性感染， 但新生儿(出生28天或以下)和不足2个月的婴儿， 尤其是早产、 体重不 足2.5公斤和 免疫力较弱的婴儿的风险最高。 新生儿(尤其是早产婴儿)的胃的酸性较成年人为低， 这可 能是阪崎氏肠杆菌可在婴儿体内生存的一个主要因素。 感染阪崎氏肠杆菌而引致的菌血症 或脑膜炎偶有发生， 亦曾小规模爆发。 虽然婴儿可在 任何年龄出现有关疾病， 早产婴儿较多 在新生儿期后出现菌血症， 足月婴儿则较多在新生儿期出现脑膜炎。 上述的不同情况， 可能 与婴儿在不同时间感染到阪崎氏肠杆菌而非与婴儿易受感染的因素有关。 [0004]传统的致病微生物检测方法有国标法和纸片法， 这些操作复杂且测试周期长的检 测方法无法跟上经济发展的步伐， 不能满足我国快速发展的食品行业对食品检测方面的需 要， 因此， 建立 一种在婴幼儿奶粉中快速、 高效灵敏的检测阪崎肠杆菌的方法是必要的。 [0005]本申请筛选出一株分泌抗阪崎肠杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞株， 发现将其应用于 环介导等温扩增技 术和胶体金免疫层析技 术， 取得了良好的实验效果。 发明内容 [0006]本发明的目的在于提供一株分泌抗阪崎肠杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞株， 并将其 应用于环介导 等温扩增技 术和胶体金免疫层析技 术， 用来快速鉴定阪崎肠杆菌 。 [0007]为达到上述目的， 本发明所采用的技 术方案如下： [0008]一株阪崎肠杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞株， 其命名为F ‑4‑1， 已保藏于中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心， 保藏单位地址是： 北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所， 邮编100101， 保藏日期2017年6月15日， 保藏编号为CGMCC   No.14305。 [0009]阪崎肠杆菌单克隆抗体， 它由所述保藏编号为CGMCC  No.14305的阪崎肠杆菌单克 隆抗体杂交瘤 细胞株F‑4‑1所分泌产生。说　明　书 1/9 页 3 CN 114958773 A 3