(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210360734.5 (22)申请日 2022.04.07 (71)申请人 北京大学 地址 100080 北京市海淀区颐和园路5号 申请人 北京大学人民医院 (72)发明人 尹玉新　邱满堂　刘赪阳　李运　 (74)专利代理 机构 北京高沃 律师事务所 1 1569 专利代理师 苏士莹 (51)Int.Cl. C12N 9/06(2006.01) C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/26(2006.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/573(2006.01) G01N 33/574(2006.01)A61K 45/00(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) C12N 15/113(2010.01) (54)发明名称 一种肺癌的新型代谢免疫靶点IL4I1及其应 用 (57)摘要 本发明提供了一种肺癌 的新型代谢免疫靶 点IL4I1及其应用， 涉及生物医药技术领域。 本发 明所述IL4I1蛋白主要分布于肺腺癌肿瘤微环境 内的巨噬细胞、 树突状细胞及骨髓来源的抑制性 细胞中， 呈点状聚集。 IL4I1的表达 水平随肺腺癌 肿瘤进展而上调， mRNA、 蛋白水平 的高表达均提 示预后不良。 本发明表明IL4I1分子通过代谢色 氨酸、 调控AHR信号通路促进免疫抑制性肿瘤微 环境的形成、 促进癌细胞的侵袭和迁移。 本发明 首次发现了在早期肺腺癌肿瘤微环境内存在高 表达的IL4I1， 同时首次发现了早期肺腺癌的新 型代谢免疫靶点IL4I1， 为肿瘤治疗提供了新的 药物靶点、 新的思路和策略。 权利要求书1页 说明书11页 序列表7页 附图5页 CN 115044567 A 2022.09.13 CN 115044567 A 1.一种检测IL4I1的试剂在制备肺腺癌诊断工具中的应用， 其特征在于， 所述IL4I1的 氨基酸序列包括SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序列， 或对SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序列进行 取代、 缺失和/或添加后形成的与SEQ  ID NO.1功能相同的氨基酸序列。 2.根据权利要求1所述应用， 其特征在于， 所述检测IL4I1的试剂包括： 血浆蛋白标志 物、 病理组化标志物、 引物或探针、 选自IL4I1的多核苷 酸序列的外周血ctDNA/cfDNA标志物 中的一种或多种的组合。 3.IL4I1作为药物作用靶点在筛选治疗肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述IL4I1的 氨基酸序列包括SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序列， 或对SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序列进行 取代、 缺失和/或添加后形成的与SEQ  ID NO.1功能相同的氨基酸序列。 4.根据权利要求3所述应用， 其特 征在于， 所述药物包括a)～f)中的至少一种功能： a)治疗肿瘤或者抑制肿瘤生长； b)抑制肿瘤侵 袭和/或转移； c)促进肿瘤患者的抗肿瘤免疫反应 d)抑制肿瘤微环境中髓系来源的抑制性细胞聚集； e)促进T细胞增殖与活化， 和/或减少T细胞凋亡， 和/或增强T细胞效应功能和肿瘤杀伤 活性； f)与肿瘤免疫疗法联用， 增强免疫疗法效果。 5.根据权利要求3或4所述应用， 其特征在于， 所述肿瘤包括肺腺癌、 黑色素瘤、 慢性淋 巴细胞白血病中的一种或多种。 6.一种干扰IL4I1表达的试剂， 其特征在于， 所述试剂包括： 干扰IL4I1表达的RNA分子、 抗IL4I1抗体、 I L4I1小分子抑制剂、 I L4I1可溶性蛋白和/或靶向I L4I1的PROTAC降解剂； 所述IL4I1的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.1所示的氨基酸序列， 或对SEQ  ID NO.1所示 的氨基酸序列进行 取代、 缺失和/或添加后形成的与SEQ  ID NO.1功能相同的氨基酸序列。 7.根据权利 要求6所述的试剂， 其特征在于， 所述干扰IL4I1表达的RNA分子包括 ①或② 中的序列： ①SEQ ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示的shRNA； ②将SEQ ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示的shRNA删除或增加或改变一个或几个核苷酸， 且与SEQ ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示的shRNA保持相同功能的核苷酸。 8.一种治疗肺腺癌的药物， 其特 征在于， 所述药物包括权利要求6或7 所述的试剂。 9.IL4I1作为靶点在开发或设计肿瘤免疫治疗药物、 肿瘤联合治疗策略中的应用， 其特 征在于， 所述IL4I1的氨基酸序列包括SEQ  ID NO.1所示的氨 基酸序列， 或对SEQ  ID NO.1所 示的氨基酸序列进行取代、 缺失和/或添加后形成的与SEQ  ID NO.1功能相同的氨基酸序 列。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115044567 A 2一种肺癌的新型代谢免疫靶点IL4I1及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一种肺癌的新型代谢 免疫靶点  IL4I1及 其应用。 背景技术 [0002]在适应性免疫应答及肿瘤免疫中， T淋巴细胞响应激活的高代谢需求使  其非常容 易受到生化环境改变的影响， 如高度依赖外源性摄取 的必需氨基酸  以满足其快速增殖及 激活的需要。 在肿瘤微环境中， 髓系来源的细胞如巨噬  细胞等能够通过产生分解代谢必需 或半必需氨基酸的免疫抑制酶， 一方面造  成营养缺陷、 改变营养物质的可用性， 另一方面 产生有毒分解代谢物、 促进  免疫细胞凋亡， 从而参与破坏局部抗肿瘤免疫反应。 [0003]L‑氨基酸氧化酶是在从细菌到哺乳动 物的整个进化过程中均有发现的  黄素腺嘌 呤二核苷酸(FAD)结合酶， 通常具有抗感染特性， 在调节淋巴细  胞过度活化和 炎症方面有 较为突出的功能。 这些酶可根据其氨基酸底物分  为： 分解代谢半必需氨基酸精氨 酸的iNOS (诱导型一氧化氮合酶)和  Arg1/Arg2(1/2型精氨酸酶)、 分解代谢必需氨基酸色氨酸的 IDO1/IDO2(1/2  型吲哚胺2,3 ‑双加氧酶)和TDO(色氨酸2,3双加氧酶)、 以及分解代谢苯  丙 氨酸的IL4I1(白细胞介素4 诱导的基因1)。 [0004]IL4I1基因最早于细胞因子白细胞介素4刺激后 的脾B细胞中被发现，  并因此得 名。 其人类基因位于第19号染色体上的白细胞受体复合物内， 小  鼠基因则位于第7号染色 体上， 该区域缺陷易患系统性红斑狼疮。 人IL4I1  主要在淋巴组织、 精子、 中枢神经系统的 稀有细胞中表达 。 [0005]IL4I1蛋白是一种分泌型的L ‑苯丙氨酸氧化酶， 有糖基化修饰， 属于FAD  结合酶的 L‑氨基酸氧化酶(LAAO)家族， 既往研究认 为， IL4I1能够将苯  丙氨酸氧化脱氨成苯丙酮酸， 并在此过程中释放H2O2和NH3， 对色氨酸和  精氨酸也有较低的分解代谢活性。 有研 究表明， 一些苯丙氨酸衍生物可以初  步抑制IL4I1的活性， 但其特异性有限、 且活性相对较低(微摩 尔级别)。 [0006]在病理状态下， IL4I1主要表达于免疫细胞， 尤其是炎症和T辅助细胞1(Th1)刺激 状态(Toll样受体、 IL1、 IFN1/2的配体)的骨髓来源细胞(单  核细胞/巨噬细胞和树突细 胞)， 这种诱导表达诱导依赖于NFκB和STAT1的  激活。 IL4I1在结节病和结核病患者的慢性 Th1肉芽肿中的树突细胞和巨噬  细胞群中有显著高表达， 在肿瘤浸润巨噬细胞中也有表 达。 此外， IL4I1在  受IL4和CD40L激活 的人外周血B细胞中， Th17细胞和CD4+T细胞中有  轻 微表达， 后者的转录受RORT控制。 近期研究表明， IL4I1还可由粘膜相  关不变T细胞 (Mucosal‑Associated  Invariant  T cells， MAIT)表 达， 后者是  一种MR1限制性抗菌T细胞 亚群， 主要在屏障位点以及肝脏和血液中被检  测到。 常规CD8+T细胞及NK细胞中均未检测 到IL4I1的表达 。 [0007]目前尚未有研究对IL4I1在肿瘤中的蛋白表达情况进行大规模分析， 或  对其作为 肿瘤治疗 靶点、 与免疫疗法联用的可能性进行探究。说　明　书 1/11 页 3 CN 115044567 A 3