(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210348448.7 (22)申请日 2022.04.01 (71)申请人 中国人民解 放军陆军 军医大学第二 附属医院 地址 400037 重庆市沙坪坝区新 桥正街83 号 (72)发明人 赵景宏　程金波　黄英辉　肖堂利　 章波　 (74)专利代理 机构 北京同恒源知识产权代理有 限公司 1 1275 专利代理师 廖曦 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种肾病综合征患者PDSS2致病突变基因及 其检测试剂 (57)摘要 本发明提供一种肾病综合征患者PDSS2致病 突变基因及其检测试剂， 所述突变位于PDSS2基 因第六号外显子区域， 第980位的核酸序列由鸟 嘌呤替换为胸腺嘧啶， 即PDSS2,c.980(exon6)G> T。 此突变 可引起PDSS2 基因的编码错误， 导致327 位氨基酸由精氨酸变为异亮氨 酸， 引起蛋白质结 构和功能改变。 本发明的检测试剂可有效、 快速 地检测PDSS2的上述 致病突变， 且价格低廉。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图2页 CN 114592052 A 2022.06.07 CN 114592052 A 1.一种肾病综合征患者PDSS2致病突变基因， 其特征在于， 所述突变位于PDSS2基因第 六号外显子区域， 第980位核酸序列由鸟嘌 呤突变为胸腺嘧啶， 即c.980(exon6)G>T； 此突变 可引起PDSS2基因编码蛋白质结构与功能改变。 2.根据权利要求1所述PDSS2致病突变基因的病因学诊断试剂， 其特征在于， 所述诊断 试剂包括基因组DNA点突变分析试剂， 所述分析试剂包括1)患者样本基因组DNA提取试剂 盒； 2)DNA ‑PCR扩增试剂盒： 采用引物P1和P2扩增患者基因组DNA， 获得目的条带； 3)DNA ‑PCR 产物Sanger测序试剂盒： 以引物P2对DNA ‑PCR产物Sanger测序； 当检测得到PDSS2基因第六 号外显子区域， 第980位核酸序列由鸟嘌 呤突变为胸腺嘧啶， 即c.980(exon6)G>T， 确诊为肾 病综合征患者。 3.根据权利要求2所述PDSS2致病突变基因的病因学诊断试剂， 其特征在于， 所述用于 患者基因 组DNA提取的样本为： 外周血、 尿液或指甲。 4.根据权利 要求2所述病因学诊断试剂中用于扩增患者基因组DNA的引物对组P1和P2， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1‑2所示。 5.根据权利 要求2所述病因学诊断试剂中用于基因组DNA ‑PCR产物Sanger测序的引物， 其核苷酸序列如SEQ  ID NO.1所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114592052 A 2一种肾病综合征患者PDS S2致病突变基因及其检测试剂 技术领域 [0001]本发明涉及遗传病基因检测 领域， 具体涉及一种肾病综合征患者PDSS2致病突变 基因及其检测试剂。 背景技术 [0002]肾病综合征(Nephrotic  syndrome,NS)是一种常见的慢性肾脏病， 患者以大量蛋 白尿、 低蛋白血症和全身性水肿为其典型的临床特征。 大约有20％的NS患者表现为激素和 免疫抑制剂治疗无效， 其中36％ ‑50％的患者会在10年内发展为终末期肾病。 目前， 临床常 用的肾活检术并不能从病理诊断上为上述问题提供准确的治疗指导。 [0003]近年来， 50多个与NS发病机制相关的基因突变被陆续鉴定出来， 使得肾病综合征 的基因诊断成为可能。 这些基因的筛查则可以帮助 临床医师完成NS的 “基因诊断 ”， 这不仅 可避免临床盲目用药及由此带来的药物不良反应和经济负担， 对某些患者还可能进行早期 干预或治疗， 延迟甚至避免ESRD的发生。 [0004]在这些肾病综合征的致病基因中， COQ2、 COQ6、 COQ9、 PDSS2和ADCK4基因参与辅酶 Q10的生物 合成。 辅酶Q10是主要由人体合 成的必须维生素。 辅酶Q10缺乏导致能量耗竭和氧 自由基产生细胞损伤， 临床表现多样， 主要累及中枢神经系统、 骨骼肌、 周围神经病变等。 近 年来发现辅酶Q10缺乏可引起肾病综合征， 其特征性表现为激素耐药性 肾病。 原发性辅酶 Q10缺乏是目前唯一可以应用辅酶Q 10补充治疗的肾病综合征， 因此早期发现及 治疗尤为重 要。 [0005]目前， 对NS患者的致病基因的检测， 往往多采用全外显子测序技术。 该方法可以在 全外显子范围内寻找到患者的致病突变。 然而， 该方法测序时间长， 往往需要6 ‑7个工作日， 且需要花费相对较贵， 检测成本大。 因此， 寻找对诊断有效的新致病突变， 并研发省时、 精 准 的对实验条件要求较低的诊断试剂对NS患者进 行快速检测， 是解决NS临床诊断的有效途径 之一。 发明内容 [0006]有鉴于此， 为了克服现有技术的不足， 本发明提供一种NS致病突变基因， 并基于此 研发了突变 检测试剂， 可以快速、 准确判断检测对象是否具有此致病突变 基因。 [0007]本发明公开的一种肾病综合征患者PDSS2致病突变基因， 所述突变位于PDSS2基因 第六号外显子区域， 第980位核酸序列由鸟嘌 呤突变为胸腺嘧啶， 即c.980(exon6)G>T； 此突 变可引起P DSS2基因编码蛋白质结构与功能改变。 [0008]本发明还提供上述PDSS2致病突变基因的病因学诊断试剂， 所述诊 断试剂包括基 因组DNA点突变 分析试剂， 所述分析试剂包括1)患者样本基因组DNA提取试剂盒； 2)DNA ‑PCR 扩增试剂盒： 采用引物P1和P2扩增患者基因组DNA， 获得目的条带； 3)DNA ‑PCR产物Sanger测 序试剂盒： 以引物P2对DNA ‑PCR产物Sanger测序； 当检测得到PDSS2 基因第六号外显子区域， 第980位核酸序列由鸟嘌呤突变为胸腺嘧啶， 即c.980(exo n6)G>T， 确诊为肾病综合征患者。说　明　书 1/5 页 3 CN 114592052 A 3