(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210320274.3 (22)申请日 2022.03.29 (66)本国优先权数据 202110336982.1 2021.0 3.29 CN (71)申请人 南京大学 地址 210023 江苏省南京市栖霞区仙林大 道163号 (72)发明人 张辰宇　陈熹　付正　李菁　张翔　 周心妍　张丽　余梦超　郭宏源　 (74)专利代理 机构 北京智丞瀚方知识产权代理 有限公司 1 1810 专利代理师 姜司晨 (51)Int.Cl. A61K 31/713(2006.01) A61K 47/46(2006.01)A61K 47/42(2017.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 11/00(2006.01) A61P 1/00(2006.01) A61P 3/04(2006.01) A61P 9/00(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 25/14(2006.01) A61P 21/04(2006.01) A61P 25/28(2006.01) A61P 37/06(2006.01) C12N 15/11(2006.01) C12N 15/113(2010.01) C12N 15/86(2006.01) (54)发明名称 一种基于病毒载体的RNA递送系统及其应用 (57)摘要 本申请提供一种基于病毒 载体的RNA递送系 统及其应用。 其中， 该RNA递送系统包括病毒载 体， 所述病毒载体携带有所需递送的RNA片段， 所 述病毒载体能够在宿主的器官 组织中富集， 并在 所述宿主器官组织中内源性地自发形成含有所 述RNA片段的复合结构， 所述复合结构能够进入 并结合目标组织， 将所述RNA片段送入目标组织。 本申请提供的基于病毒载体的RNA递送系统安全 性和可靠性已被充分验证， 成药性非常好、 通用 性强， 具有极好的经济效益和应用前 景。 权利要求书2页 说明书23页 附图17页 CN 115137741 A 2022.10.04 CN 115137741 A 1.一种基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 该系统包括病毒载体， 所述病毒载 体携带有 所需递送的RNA片段， 所述病毒 载体能够在宿 主的器官 组织中富集， 并在所述宿 主 器官组织中内源性地自发形成含有所述RNA片段的复合结构， 所述复合结构能够进入并结 合目标组织， 将所述RNA片段送入目标组织。 2.如权利要求1所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述病毒载体为腺 病毒相关病毒。 3.如权利要求2所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述腺病毒相关病 毒为腺病毒相关病毒5型、 腺病毒相关病毒8型或腺病毒相关病毒9型。 4.如权利要求1所述的基于病毒载体的RNA递送系 统， 其特征在于， 所述RNA片段包含1 个、 两个或多个具有医疗意义的具体RNA序列， 所述RNA序列是具有医学意义的siRNA、 shRNA 或miRNA。 5.如权利要求1所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述病毒载体包括 启动子和靶向标签， 所述靶向标签能够在宿主的器官组织中形成所述复合结构的靶向结 构， 所述靶向结构位于复合结构的表面， 所述复合结构能够通过所述靶向结构寻找并结合 目标组织， 将所述RNA片段递送进入目标组织。 6.如权利要求5所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述病毒载体中包 括以下任意一种线路或几种线路的组合： 启动子 ‑RNA片段、 启动子 ‑靶向标签、 启动子 ‑RNA 片段‑靶向标签； 每一个所述病毒 载体中至少包括一个RNA片段和一个靶向标签， 所述 RNA片 段和靶向标签位于相同的线路中或位于不同的线路中。 7.如权利要求6所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述病毒载体还包 括能够使所述线路折叠成正确结构 并表达的侧翼序列、 补偿序列和loop序列， 所述侧翼序 列包括5’侧翼序列和3 ’侧翼序列； 所述病毒载体中包括以下任意一种线路或几种线路的组合： 5' ‑启动子‑5'侧翼序列 ‑ RNA片段‑loop序列 ‑补偿序列 ‑3'侧翼序列、 5' ‑启动子‑靶向标签、 5' ‑启动子‑靶向标签 ‑5' 侧翼序列 ‑RNA片段‑loop序列‑补偿序列 ‑3'侧翼序列。 8.如权利要求7所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述5 ’侧翼序列为 ggatcctggaggcttgctgaaggctgtatgctg aattc或与其同源性大于80％的序列； 所述loop序列为gt tttggccactgactgac或与其同源性大于80％的序列； 所述3’侧翼序列为accggtcaggacacaaggcctgttactagcactcacatggaacaaatggcccagat ctggccgcactcg ag或与其同源性大于80％的序列； 所述补偿序列为所述RNA片段的反向互补序列， 并删除其中任意1 ‑5位碱基。 9.如权利要求6所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 在病毒载体中存在 至少两种线路的情况 下， 相邻的线路 之间通过序列1 ‑3组成的序列相连； 其中， 序列1为CAGATC， 序列2是由5 ‑80个碱基组成的序列， 序列3为TG GATC。 10.如权利要求9所述的基于病 毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 在病 毒载体中存在 至少两种线路的情况下， 相邻的线路之间通过序列4或与序列4同源性大于80％的序列相 连； 其中， 序列4 为CAGATCTG GCCGCACTCGAG GTAGTGAGTCGAC CAGTGGATC。 11.如权利要求1所述的基于病 毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述器官组织为肝权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115137741 A 2脏， 所述复合结构为外泌体。 12.如权利要求5所述的基于病 毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述靶向标签选自 具有靶向功能的靶向肽或靶向蛋白。 13.如权利要求12所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述靶向肽包括 RVG靶向肽、 GE1 1靶向肽、 PTP靶向肽、 TCP ‑1靶向肽、 MS P靶向肽； 所述靶向蛋白包括RVG ‑LAMP2B融合蛋白、 GE11 ‑LAMP2B融合蛋白、 PTP ‑LAMP2B融合蛋 白、 TCP‑1‑LAMP2B融合蛋白、 MS P‑LAMP2B融合蛋白。 14.如权利要求5所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述RNA序列的长 度为15‑25个核苷酸。 15.如权利 要求14所述的基于病毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述RNA序列选自 以下RNA中的任意一种 或几种： EGFR基因的siRNA， KRAS基因的siRNA， VEGFR基因的siRNA， mTOR基因的siRNA， TNF ‑α 基因的siRNA,integrin ‑α 基因的siRNA， B7基因的siRNA， TGF ‑β 1基 因的siRNA， H2 ‑K基因的siRNA， H2 ‑D基因的siRNA， H2 ‑L基因的siRNA， HLA基因的siRNA， GDF15基因的siRNA， miRNA ‑21的反义链， miRNA ‑214的反义链， TNC基因的siRNA， PTP1B基因 的siRNA， mHTT基因的siRNA， Lrrk2基因的siRNA， α ‑synuclein基因的siRNA， 或与上述序列 同源性大于80％的RNA序列， 或编码上述RNA的核酸分子 。 16.如权利要求1所述的基于病 毒载体的RNA递送系统， 其特征在于， 所述递送系统为用 于包括人在内的哺乳动物中的递送系统。 17.一种权利要求1 ‑16任意一项所述的基于病毒载体的RNA递送系统在药物中的应用。 18.如权利要求17所述的应用， 其特征在于， 所述药物的给药方式包括口服、 吸入、 皮下 注射、 肌肉注射、 静脉注射。 19.如权利要求17所述的应用， 其特征在于， 所述药物为治疗癌症、 肺纤维化、 结肠炎、 肥胖症、 由肥胖症引起的心血管疾病、 二型糖尿病、 亨廷顿病、 帕金森病、 重症肌无力、 阿尔 兹海默病或移植物抗宿主病的药物。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115137741 A 3