(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210309104.5 (22)申请日 2022.03.28 (71)申请人 中国医科 大学附属第一医院 地址 110001 辽宁省沈阳市和平区南京北 街155号 (72)发明人 徐莹莹　王梦申　李鑫妍　张强　 余科达　许守平　邱鹏飞　吕志栋　 (74)专利代理 机构 沈阳亚泰专利商标代理有限 公司 21107 专利代理师 史力伏 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/574(2006.01) A61K 45/00(2006.01)A61K 31/713(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 TMC5在乳腺癌特异性骨转移中的诊断、 治疗 的应用 (57)摘要 本发明公开了与乳腺癌和乳腺癌特异性骨 转移相关的分子标记物、 抑制剂、 试剂盒和药剂， 属于生物医药领域。 所述的分子标记物是TMC5基 因或其表达的蛋白， 所述TMC5基因在乳腺癌和乳 腺癌特异性骨转移中表达上调。 所述抑制剂选自 TMC5基因的反义链中的siRNA和shRNA， 可以用在 制备抑制乳腺癌和乳腺癌骨转移发生和/或发展 的药物中。 所述试剂盒包括能够定量检测TMC5基 因的表达量的试剂。 所述药剂中含有抑制TMC基 因表达的试剂。 本发明为乳 腺癌和乳腺癌特异性 骨转移的诊断和治疗提供了新的靶点， 具有重大 的临床意 义。 权利要求书1页 说明书11页 序列表1页 附图7页 CN 114574583 A 2022.06.03 CN 114574583 A 1.一种TMC5基因或其编码蛋白的表达水平的检测试剂在制备用于辅助诊断乳腺肿瘤 产品中的应用， 其特 征在于， 所述肿瘤包括癌乳腺癌或乳腺癌特异性骨转移。 2.根据权利 要求1所述的应用， 其特征在于， 所述产品通过逆转录PCR、 实时定量PCR、 芯 片、 高通量测序平台检测样本中TMC5基因的表达水平； 所述产品通过western  blot、 免疫组 织化学染色或 酶联免疫吸附检测样本中TM C5基因编码的蛋白的表达水平。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述产品中含有扩增TMC5基因 的特异性引 物如SEQ ID NO .1和SEQ ID NO .2所示； 与TMC5基因核苷酸序列杂交的探针或与TMC5蛋白 特异性结合的单 克隆抗体或多克隆抗体。 4.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述产品包括芯片、 制 剂或试剂盒； 所述样 本为组织、 血清或细胞。 5.一种TMC5基因表达水平 的抑制剂在制备治疗乳腺肿瘤药物中的应用， 其特征在于， 所述肿瘤包括乳腺癌或乳腺癌特异性骨转移。 6.一种TMC5基因表达水平的抑制剂在制备抑制乳腺癌细胞迁移、 增殖、 钙离子趋化性、 骨微环境定植或破骨 细胞形成的药物中的应用。 7.根据权利要求5或6所述的应用， 其特征在于， 所述TMC5基因的表达抑制剂包括特异 靶向TMC5基因的siRNA、 shRNA、 表达siRNA的载体或表达shRNA的载体。 8.根据权利要求7所述 的应用， 其特征在于， 所述shRNA或siRNA靶序列如SEQ  ID NO： 5 所示。 9.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述siRNA的序列如SEQ  ID NO .3～SEQ  ID NO .4所示。 10.根据权利要求7所述的应用， 其特征在于， 所述表达载体包括真核细胞表达载体， 所 述真核细胞表达载体包括质粒表达载体或病毒表达载体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114574583 A 2TMC5在乳腺癌特异性骨 转移中的诊断、 治疗的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药领域， 具体涉及一种潜在的乳腺癌特异性骨转移标记物TMC5 用于制备检测试剂盒中的应用， TMC5基因在导致乳腺癌特异性骨转移的过程中发挥作用， 并且涉及TM C5在乳腺癌特异性骨转移诊断、 治疗以及预后中的应用。 背景技术 [0002]乳腺癌是女性常见的一种恶性肿瘤， 乳腺癌在欧美发达国家以及中国上海等大城 市的发病率已经成为女性恶性肿瘤的首位。 约8 0%的晚期 乳腺癌伴随骨转移， 进而发生高钙 血症、 骨质疏松和骨折， 严重影响患者的生活质量和生存。 [0003]由于乳腺癌具有惊人地增长速度和致死率， 使得早期诊断和预后判断对于提高乳 腺癌特异性骨转移患者的生存率具有十 分重要的意义。 目前的乳腺癌特异 性骨转移诊断手 段包括ECT、 pet ‑CT、 穿刺活检等， 但是这些检测手段存在灵敏度和特异性有限、 有创性检查 等缺点。 因此， 发现新的高效的乳腺癌特异性骨转移特异表达靶标对于乳腺癌特异性骨转 移的早期诊断和治疗具有重要的意 义。 发明内容 [0004]针对上述问题， 本发明主要提供了一种TMC5基因或其编码蛋白的表达水平的检测 试剂在制备用于乳腺癌和乳腺癌特异 性骨转移的辅助诊断产品中的应用， 发现TMC5基因在 乳腺癌特异性骨转移呈现高表达。 同时， 提供了一种TMC5基因表达水平的抑制剂在制备治 疗乳腺癌特异性骨转移的药物中的应用以及TMC5基因表达水平的抑制剂在制备抑制乳腺 癌细胞迁移、 侵 袭、 钙离子趋化性、 骨微环境定植和破骨 细胞形成的药物中的应用。 [0005]为了实现上述目的， 本发明提供了如下技 术方案。 [0006]本发明提供了一种TMC5基因或其编码蛋白的表达水平的检测试剂在制备用于辅 助诊断乳腺肿瘤产品中的应用， 其特征在于， 所述肿瘤包括癌乳腺癌或乳腺癌特异性骨转 移。 [0007]进一步地， 所述产 品通过逆转录PCR、 实时定量PCR、 芯片、 高通量测序平台检测样 本中TMC5基因的表达水平； 所述产品通过western  blot、 免疫组织化学染色或酶联免疫吸 附检测样本中TM C5基因编码的蛋白的表达水平。 [0008]更进一步地， 所述产品中含有扩增TMC5基因的特异性引物如SEQ  ID NO .1和SEQ  ID NO .2所示、 与TMC5基因核苷 酸序列杂交的探针或与TMC5蛋白特异性结合的单克隆抗体 或多克隆抗体。 [0009]更进一步地， 所述产品包括芯片、 制剂或试剂盒； 所述样本为组织、 血清或细胞。 [0010]本发明还提供一种TMC5基因表达水平的抑制剂在制备治疗乳腺肿瘤药物中的应 用， 其特征在于， 所述肿瘤包括乳腺癌或乳腺癌特异性骨转移。 [0011]本发明还提供一种TMC5基因表达水平的抑制剂在制备抑制乳腺癌细胞迁移、 增 殖、 钙离子趋化性、 骨微环境定植或破骨 细胞形成的药物中的应用。说　明　书 1/11 页 3 CN 114574583 A 3