(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210301745.6 (22)申请日 2022.03.25 (71)申请人 苏州药诺泰克新药研发有限公司 地址 215000 江苏省苏州市吴江区盛泽 镇 南三环路(溪南村)科创园企业孵化基 地705-1室 (72)发明人 田静　张东伟　 (74)专利代理 机构 苏州谨和知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 32295 专利代理师 许冬莹 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 甲基化位点、 检测甲基化水平的产品的用途 及试剂盒 (57)摘要 本申请属于医疗检测技术领域， 涉及一种甲 基化位点、 检测甲基化水平的产品的用途及试剂 盒。 本申请发现MAPT基因的cg11909912CpG位点 在PANC1细胞系中的甲基化水平明显高于正 常对 照， 能作为胰腺癌诊断标志物， 拓展了癌症临床 检测的途径， 所筛选出的特异性位点可以有效用 于胰腺癌的快速诊断。 与传统活检、 CT、 MRI和其 他影像学检查相比， 本申请不仅对人体无损， 还 具有较高的准确性和可重复性。 权利要求书1页 说明书7页 序列表1页 附图1页 CN 114507738 A 2022.05.17 CN 114507738 A 1.一种MAPT基因甲基化位点作为胰腺癌诊断标志物 的用途， 其特征在于， 所述甲基化 位点为cg11909912。 2.一种检测待测样本中MAPT基因甲基化水平 的产品的用途， 其特征在于， 用于制备胰 腺癌的诊断用品。 3.如权利要求2所述的用途， 其特征在于， 所述产品检测所述待测样本 中MAPT基因甲基 化水平所采用的方法选自焦 磷酸测序、 亚硫酸氢盐测序、 定量和/或定性的甲基化特异 性聚 合酶链式反应、 定量和/或定性的亚硫酸氢盐特异性聚合酶链式反应、 数字聚合酶链式反 应、 联合亚硫酸氢盐 的靶向测序、 DNA印迹法、 限制性界标基因组扫描、 单核苷酸引物延伸、 CpG岛微阵列、 单核苷酸引物延伸SNUPE、 联合亚硫酸氢钠限制性内切酶分析法或质谱中的 任一种或多种。 4.如权利 要求2所述的用途， 其特征在于， 所述产品检测所述MAPT基因的上游 ‑523bp至 下游146bp区域。 5.如权利要求4所述的用途， 其特征在于， 所述产品检测所述MAPT基因的cg11909912位 点。 6.如权利 要求5所述的用途， 其特征在于， 所述产品包括检测所述cg11909912位点的引 物， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示。 7.如权利要求6所述的用途， 其特征在于， 所述产品采用亚硫酸氢盐测序法对所述待测 样本中MAPT基因甲基化水平进行检测。 8.如权利要求2所述的用途， 其特征在于， 所述待测样本为全血或血液分样， 所述血液 分样为血清或血浆。 9.一种MAPT基因甲基化定性检测试剂盒， 其特征在于， 包括检测所述MAPT基因的 cg11909912位点的引物， 所述引物的序列如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示。 10.如权利要求9所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂 盒还包括酶混合液、 dNTP混合液 或PCR缓冲液中的任意 一种或至少两种的组合。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114507738 A 2甲基化位点、 检测甲 基化水平的产品的用途及 试剂盒 技术领域 [0001]本申请涉及一种甲基化位点、 检测甲基化水平的产品的用途及试剂盒， 属于医疗 检测技术领域。 背景技术 [0002]DNA甲基化谱全面系统展现肝癌相关免疫动态变化， 在肝癌早期诊断标志物研究 中优势凸显： 机体免疫系统通过 “免疫监视 ”功能， 包括： 抗原识别、 抗原 递呈、 细胞毒作用等 参与肿瘤发生、 发展的全过程， 参与的免疫细胞， 免疫分子数百种， 而且 呈现动态网络变化， 单一监测某种细胞或细胞 因子不足以反映机体免疫系统在肝癌发生 发展中的整体变化。 因 此， 虽然机体免疫在控制肝癌 发生发展中发挥重要作用已经成为共识， 但至今尚未发现某 种免疫标志物可用于肝癌的诊断。 随着人类基因组测序计划的完成， 以及基因组学、 蛋白组 学、 高通量测序技术的广泛应用， DNA甲基化在细胞正常发育、 遗传、 基因表达调控、 基因修 复以及染色体稳定等方面发挥的重要作用亦 日渐凸显。 涵盖450000免疫功能位点的DNA甲 基化谱可全面、 系统展现免疫系统在肝癌各期病情进展中的细微变化。 因此， 通过DNA甲基 化谱全面展现肝癌相关 免疫动态变化， 进而筛选肝癌早期诊断标志物成为肝癌诊断标志物 研究新亮点。 [0003]现有技术中， 存在各种针对DNA甲基化监测的方法。 例如， 亚硫酸氢盐测序PCR法 (BSP)是Frommer及其同事于1992年开发一种DNA甲基化研究方法， 是甲基化研究领域最常 用的技术之一。 BSP结合了亚硫酸氢盐处理基因组DNA(将非甲基化的胞嘧啶碱基转化为尿 嘧啶)和PCR扩增DNA内目的区域。 然后对扩增产物进行常规测序， 以评估目的DNA序列内的 DNA甲基化水平。 这种方法的特点在于甲基化的胞嘧啶不会与亚硫酸氢钠发生反应， 因此通 过常规测序即可达 到区分甲基化或非甲基化CpG二核苷酸的目的。 [0004]然而， 现阶段在检测甲基化是否异常时缺乏一个统一的、 较为准确的标准， 无法通 过特定位点甲基化水平的变化以尽早预测患有癌症的风险。 发明内容 [0005]本申请的目的在于提供一种甲基化位点、 检测甲基化水平的产品的用途及试剂 盒， 能通过检测MAPT基因特定的 甲基化位点来对胰腺癌进行诊断。 [0006]为达到上述目的， 本申请提供如下技 术方案： [0007]第一方面， 本申请提供一种MAPT基因甲基化位点作为胰腺癌诊断标志物的用途， 所述甲基化 位点为cg11909912。 [0008]第二方面， 本申请还提供一种检测待测样本中MAPT基因甲基化水平的产品的用 途， 其用于制备胰腺癌的诊断用品。 [0009]作为其中一个实施例， 所述产品检测所述待测样本中MAPT基因甲基化水平所采用 的方法选自焦磷酸测序、 亚硫酸氢盐测序、 定量和/或定性的甲基化特异性聚合酶链式反 应、 定量和/或定性的亚硫酸氢盐特异性聚合酶链式反应、 数字聚合酶链式反应、 联合亚硫说　明　书 1/7 页 3 CN 114507738 A 3