(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210309884.3 (22)申请日 2022.03.25 (71)申请人 江苏先声医学诊断有限公司 地址 210023 江苏省南京市玄武区69 9-18 号28幢 申请人 江苏先声医疗器 械有限公司 　 北京先声医学检验实验室有限公司 (72)发明人 王利　顾馨仪　郑诗雨　郭涛　 胥慧　李诗濛　任用　 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/689(2018.01) C12Q 1/686(2018.01) C12Q 1/14(2006.01) C12Q 1/10(2006.01)C12Q 1/04(2006.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 用于中枢神经感染病原体核酸检测的引物 组、 产品及应用 (57)摘要 本申请涉及生物 技术领域， 具体提供了一种 用于检测中枢神经感染病原 体核酸的引物组、 产 品及应用， 本申请能够在飞行时间质谱平台， 利 用一个多重体系同时完成18种中枢神经感染常 见的病原微生物核酸的检测； 同时实现DNA和RNA 的多重体系检测， 大大降低检测成本， 缩短检测 时间， 为临床提供及时准确的诊断和治 疗依据。 权利要求书2页 说明书14页 附图10页 CN 114672593 A 2022.06.28 CN 114672593 A 1.一种用于中枢神经感染病原体核酸检测的引物组， 其特征在于， 所述中枢神经感染 病原体包括细菌、 病毒、 真菌、 支 原体； 优选的， 所述病原体包括： 肠道病毒(Enterovirus， EV)、 单纯疱疹病毒1型(Herpes   simplex virus 1， HSV‑1)、 单纯疱疹病毒2型(Herpes  simplex virus 2， HSV‑2)、 水痘带状 疱疹病毒(Varic ella zoster virus， VZV)、 巨细胞病毒(Cyto megalovirus， CMV)、 人类疱疹 病毒6型(Human  herpesvirus 6， HHV‑6)、 EB病毒(Epstein ‑Barr virus， EBV)、 流行性腮腺 炎病毒(Mumps  virus， MuV)、 人双埃可病毒(Human  parechovirus， HPeV)、 大肠杆菌 (Escherichi a coli， E.coli)、 单增李斯特氏菌(Listeri a monocyto genes， LM)、 脑膜炎奈 瑟氏菌(Nei sseria meningitidi s， NM)、 无乳链球菌(Strep tococcus  agalactiae， GBS)、 肺 炎链球菌(Streptococcus  pneumoniae， SP)、 流感嗜血杆菌(Haemophilus  influenzae， Hi)、 结核分枝杆菌(Mycobacterium  tuberculosis， MTB)、 新型隐球菌(Cryptococcus   neoformans， CN)、 肺炎支 原体(mycoplas ma pneumonia， MP)。 2.根据权利要求1所述的用于检测中枢神经感染病原体核酸的PCR引物组， 其特征在 于， 所述引物组包括36条PCR扩增引物， 其序列如SEQ  ID NO.1‑36所示， 或者与SEQ  ID  NO.1‑36具有至少85％同一 性。 3.根据权利要求2所述的用于检测中枢神经感染病原体核酸的引物组， 其特征在于， 所 述引物组还包括18条UEP延伸引物， 其序列如SEQ  ID NO.41‑58所示， 或者与 SEQ ID NO.41‑ 58具有至少85％同一 性。 4.根据权利要求2 ‑3任一所述的用于检测中枢神经感染病原体核酸的PCR引物 组， 其特 征在于， 所述引物组包括4条检测内参的PCR扩增引物， 其序列如SEQ  ID NO.37‑40所示， 或 者与SEQ ID NO.37‑40具有至少85％同一 性。 5.根据权利要求4所述的用于检测中枢神经感染病原体核酸的引物组， 其特征在于， 所 述引物组还包括2条检测内参的UEP延伸引物， 其序列如SEQ  ID NO.59‑60所示， 或者与SEQ   ID NO.59‑60具有至少85％同一 性。 6.如权利要求1 ‑5任一项所述的用于检测中枢神经感染病原体核酸的引物组在制备中 枢神经感染病原体核酸检测产品中的应用。 7.一种用于中枢神经感染病原体核酸检测的产品， 其特征在于， 所述产品包括权利要 求1‑5任一项所述的用于检测中枢神经感染相关病原体核酸的引物组。 8.根据权利要求7所述的用于中枢神经感染病原体核酸检测的产品， 其特征在于， 所述 用于中枢神经感染病原体核酸检测的产品还 包括用于检测指标的试剂和/或设备； 优选地， 所述试剂包括： 5 ×Hifair@II  Buffer、 Hifair@II  Enzyme Mix、 随机引物、 0ligo dT、 10×PCR Buffer、 dNTP  Mix、 MgCl2、 Primer Mix、 PCR Enzyme和DEPC处理水； 所述 设备为Mas sARRAY核酸质谱。 9.一种检测中枢神经感染病原体核酸的方法， 其特征在于， 所述方法包括应用权利要 求1‑5任一项所述的引物组对待测样品基因 组中目的病原体的核酸进行检测。 10.根据权利要求9所述的检测中枢神经感染病原体核酸的方法， 其特征在于， 应用权 利要求1‑5任一项所述的引物组对待测样品基因组进行反转录、 PCR扩增及碱基延伸反应， 然后应用Mas sARRAY对反应得到的产物进行检测， 确定所述待测样品中的病原体； 优选地， 所述方法还 包括在碱基延伸反应前对PCR产物进行去磷酸 化的步骤；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114672593 A 2优选地， 所述方法还包括在碱基延伸反应后对所述反应得到的产物进行纯化的步骤， 然后再应用Mas sARRAY检测反应产物。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114672593 A 3