(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210270304.4 (22)申请日 2022.03.18 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114525364 A (43)申请公布日 2022.05.24 (73)专利权人 山东省农业科 学院 地址 250100 山东省济南市工业北路202号 专利权人 开封市农林科 学研究院 (72)发明人 夏晗　黄怀玲　邓丽　王兴军　 赵传志　任丽　马婧　田锐铮　 张宪英　侯蕾　李阳　 (74)专利代理 机构 北京东方盛凡知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11562 专利代理师 张换君 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) A01H 1/04(2006.01) (56)对比文件 CN 110578016 A,2019.12.17 AU 202010 0809 A4,2020.07.02 CN 113308564 A,2021.08.27 US 2020030419 A1,2020.01.3 0吴继华等.河南省花 生品质改良现状及对策 思考. 《中国种业》 .20 04,(第07期),第14-15页. 洪彦彬等.花 生深紫色种皮颜色基因的遗传 分析及SSR标记. 《中国油料作物学报》 .20 07,第 29卷(第01期),第3 5-38页. Esnart Nyirenda Yohane等.Phen otypic Divergence Analysis i n Pigeonpea [Cajanus cajan (L.) Mi llspaugh] Germplas m Accessions. 《Agro nomy》 .2020,第10卷(第1 1 期),1682. Shengzhong Zhang等.Ima ged-based phenotyping accelerated QTL map ping and qtl × enviro nment interacti on analysis of testa co lour in peanut (Arac his hypogaea). 《Plant Bre ed》 .2021,第140卷(第5 期),第884-895页. Chuanzhi Zhao等.Genome-Wide Discovery of Microsatel lite Markers from Dipl oid Progenitor Species, Arac his duranensis and A. ipaensis, and Their Ap plication in Cultivated Peanut (A.hypog aea). 《Fro nt Plant Science》 .2017,第8卷1209. (续) 审查员 田原 (54)发明名称 一种与花生白种皮紧密连锁的分子标记 AhyWptc及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种与花生白种皮紧密连锁 的分子标记AhyWptc及其应用， 涉及农业生物技 术领域； 所述分子标记AhyWptc的特异性引物对 为SEQ ID NO： 1所示的正向引物和SEQ  ID NO： 2 所示的反向引物。 利用本发明提供的分子标记 AhyWptc， 可以通过检测子叶的DNA提前确定 下一 代收获材料的种皮颜色， 将其应用到分子育种及 改良花生品种中， 从而可 以大大缩短育种时间，提高育种效率， 可以在更短的时间内获取更多更 优异的花 生种质资源。 [转续页] 权利要求书1页 说明书7页 序列表1页 附图2页 CN 114525364 B 2022.08.26 CN 114525364 B (56)对比文件 Zhuang,W.等.A rachis hypog aea cultivar Shitouqi c hromosome A02. 《GenBan k》 .2020, CP030984.1.2/2 页 2[接上页] CN 114525364 B1.一种利用特异性引物对鉴定白种皮花 生的方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： （1） 提取花 生子叶组织DNA； （2） 采用如SEQ  ID NO： 1‑2所示的特异性引物对 对步骤 （1） 提取的DNA进行PCR扩增； （3） 对步骤 （2） 得到的扩增产物进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测， 若出现210bp大 小的特征条带， 则判定待测花 生材料下代种子为白种皮； 所述花生的品种为FZ0 01。 2.根据权利 要求1所述的方法， 其特征在于， 在步骤 （2） 中， 扩增体系为： DNA模板1μL， 正 向引物和反向引物各1 μL， 2 ×NG PCR MasterMix  10 μL， 加水至20 μL。 3.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 在步骤 （2） 中， 扩增反应程序为： 预变性94 ℃ 5 min； 94℃ 30s， 55℃ 30s， 72℃ 30s， 35个循环； 72℃延伸7mi n。 4.根据权利要求1所述的方法， 其特征在于， 在步骤 （3） 中， 所述非变性聚丙烯酰胺凝胶 的配方为： 40%丙烯酰胺18  mL、 5×TBE 18 mL、 H2O 54 mL、 20%过硫酸铵800 µL和TEMED  80  µ L。 5.一种鉴定白种皮花生的试剂盒， 其特征在于， 包含如SEQ  ID NO： 1‑2所示的特异性引 物对； 所述 花生的品种为FZ0 01。 6.一种特异性引物对在鉴定白色种皮花生中的应用， 其特征在于， 所述特异性引物对 的核苷酸序列如SEQ  ID NO： 1‑2所示； 所述 花生的品种为FZ0 01。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114525364 B 3