(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 20221027081 1.8 (22)申请日 2022.03.18 (71)申请人 中信湘雅 生殖与遗传专科医院有限 公司 地址 410000 湖南省长 沙市高新 开发区桐 梓坡西路5 67号 申请人 中南大学 (72)发明人 涂超峰　谭跃球　林戈　蒙岚岚　 王韦力　谭琛　李永　张欢　 聂洪川　 (74)专利代理 机构 华进联合专利商标代理有限 公司 44224 专利代理师 戴志攀 (51)Int.Cl. C12Q 1/6883(2018.01)C12N 15/11(2006.01) C12Q 1/686(2018.01) G01N 33/68(2006.01) (54)发明名称 C12orf40 基因的应用 (57)摘要 本发明涉及一种C12orf40基因的应用。 发明 人在临床科研实践中， 通过全外显子测序技术筛 选鉴定到一个导致非梗阻性无精子症患者的致 病 基 因 C 1 2 o r f 4 0 剪 切 位 点 变 异 (N M _ 001031748.4,c.1286+1G>A)， 患者睾丸活检组织 中未见单倍体精子， 表现为非梗阻性无精子症。 该基因特异性表达于睾丸组织， 在其他组织中不 表达， 可作为非梗阻性无精症的生物标志物， 有 助于进一步研究非梗阻性无精子症的机理， 探索 非梗阻性无精 症的治疗。 权利要求书1页 说明书8页 序列表2页 附图1页 CN 114875127 A 2022.08.09 CN 114875127 A 1.C12orf40基因作为生物标志物在制备用于检测或治疗非梗阻性无精症的产品中的 应用。 2.一种突变型C12orf40基因， 其特征在于， 所述突变型C12orf40基因的核苷酸序列与 野生型C12orf40基因的核苷酸序列相比具有c.1286+1G>A突变。 3.一种突变型C12orf40蛋白， 其特征在于， 所述突变型C12orf40蛋白的氨基酸序列与 野生型C12orf40蛋白的氨基酸序列相比具有p.Lys40 5fs突变。 4.一种重组表达载体， 其特征在于， 所述重组表达载体含有权利要求2所述的突变型 C12orf40基因。 5.一种宿主细胞， 其特征在于， 所述宿主细胞的基因组中掺有权利要求2所述的突变型 C12orf40基因。 6.权利要求1所述的C12orf40基因、 权利要求3所述的突变型C12orf40蛋白、 权利要求4 所述的重组表达载体或权利要求5所述的宿 主细胞在制备非梗阻性无精症动物模型中的应 用。 7.权利要求1所述的C12orf40基因或其编码的C12orf40蛋白的检测试剂在制备用于检 测非梗阻性无精 症的产品中的应用。 8.一种用于非梗阻性无精症的检测试剂， 其特征在于， 包括PCR引物对， 所述PCR引物对 能够扩增权利要求1所述的C12orf40基因的全长或部分片段。 9.根据权利要求8所述的检测试剂， 其特征在于， 所述PCR引物对的上游引物能够与所 述C12orf40基因的8号外显子区域互补配对， 所述PCR引物对的下游引物能够与所述 C12orf40基因的10号外 显子区域互补配对。 10.根据权利要求9所述的检测试剂， 其特征在于， 所述上游引物和所述下游引物的核 苷酸序列分别如SEQ  ID NO： 2和SEQ  ID NO： 3所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114875127 A 2C12orf40基因的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生殖遗传技术领域， 特别是涉及一种与非梗阻性无精症相关的   C12orf40基因的应用。 背景技术 [0002]男性不育是一种由多因素引起的表型异质性疾病， 包括少、 弱、 畸形精子  症、 无精 子症及其他原因不明的男性不育。 其中， 非梗阻性无精症(non ‑obstruction  azoospermia， NOA)是男性不育最严重的一种表型， 主要由包括染色体异常、  Y染色体AZF微缺失、 基因突 变在内的遗传缺陷而引发的精子发生障碍所致，  临床上目前缺 乏使患者恢复生精功能的 治疗手段， 主要通过供精生育下一代。  随着以全外显子测序为代表的新一代测序技术在遗 传病致病基因筛查中的广泛  应用， 一些导致NOA的致病基因突变陆续被发现， 这为NOA患者 的诊断、 预  防和生育治疗提供了 重要的分子依据。 [0003]然而， 相当一部分NOA患者进行基因检测后， 由于检出的基因变异缺少功  能研究 证据， 无法判断变异是否与NOA相关， 称之为 “临床意义不明变异 ”， 这为NOA患者的精准防 治带了巨大的挑战。 发明内容 [0004]基于此， 有必要提供一种新的可用于检测或治疗非梗阻性无精 症的生物标  志物。 [0005]本发明提供了一种C 12orf40基因作为生物标志物在制备用于检测或治疗非  梗阻 性无精症的产品中的应用。 [0006]本发明还提供了一种突变型C12or f40基因， 所述突变型C12or f40基因的核  苷酸 序列与野生型C12orf40基因的核苷酸序列相比具有c.1286+1G>A突变。 [0007]本发明还提供了一种突变型C12or f40蛋白， 所述突变型C12or f40蛋白的氨  基酸 序列与野生型C12orf40蛋白的氨基酸序列相比具有p.Lys40 5fs突变。 [0008]本发明还提供了一种重组表达载体， 所述重组表达载体含有如上所述的突  变型 C12orf40基因。 [0009]本发明还提供了一种宿主细胞， 所述宿主细胞的基因组中掺有如上所述的  突变 型C12orf40基因。 [0010]本发明还提供了如上所述的C12orf40基因、 突变型C12orf40蛋白、 重组表  达载体 或宿主细胞在制备非梗阻性无精 症动物模型中的应用。 [0011]本发明还提供了如上所述的C12orf40基因或其编 码的C12orf40蛋白的检测  试剂 在制备用于检测非梗阻性无精 症的产品中的应用。 [0012]在其中一个实施例中， 所述检测试剂包括适用于如下至少一种方法的试剂：  荧光 染料法、 数字PCR、 共 振光散射法、 实时荧 光定量PCR、 测序或生物质谱  法。 [0013]本发明还提供了一种用于 非梗阻性无精症的检测试剂， 包括PC R引物对，  所述PCR 引物对能够扩增如上 所述的C12orf40基因的全长或部分片段。说　明　书 1/8 页 3 CN 114875127 A 3