(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210257614.2 (22)申请日 2022.03.16 (71)申请人 新疆农业大 学 地址 830052 新疆维吾尔自治区乌鲁 木齐 市沙区农大东路31 1号 (72)发明人 耿洪伟　任毅　程宇坤　孙玲　 (74)专利代理 机构 北京纪凯知识产权代理有限 公司 11245 专利代理师 关畅 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与小麦籽粒超氧化物歧化酶活性相关 的分子标记及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种与小麦籽粒超氧化物歧 化酶活性相关的分子标记及其应用。 本发明基于 TaSOD‑A1基因的两种等位变异形式TaSOD ‑A1a和 TaSOD‑A1b基因设计用于扩增包含所述 分子标记 在内的小麦基因组DNA片段的特异引物并提供了 利用所述分子标记和引物鉴定小麦籽粒超氧化 物歧化酶活性的方法。 本发明的分子标记可以快 速鉴定出TaSOD ‑A1a和TaSOD ‑A1b等位变异情况 及其SOD活性的高低、 快速筛选出具有较高SOD活 性的小麦品种， 不仅可以加速优质小麦新品种的 育成步伐， 而且对分子标记辅助选择高SOD活性 小麦品种具有重要的理论 意义和经济价 值。 权利要求书2页 说明书15页 序列表4页 附图1页 CN 114507751 A 2022.05.17 CN 114507751 A 1.分子标记和/或检测所述分子标记的物质的下述任一种应用： A1)在鉴定小麦 籽粒超氧化物歧化酶活性中的应用； A2)在鉴定或辅助鉴定待测小麦为高SOD活性小麦还是低SOD活性小麦中的应用； A3)在鉴定或辅助鉴定低SOD活性小麦品种中的应用； A4)在鉴定或辅助鉴定高SOD活性小麦品种中的应用； A5)在鉴别或辅助鉴别小麦 籽粒中SOD活性高低中的应用； A6)在检测或辅助检测小麦是携带TaSOD ‑A1a基因还是TaSOD ‑A1b基因中的应用； A7)在鉴定或辅助鉴定携带TaSOD ‑A1a基因的小麦品种中的应用； A8)在鉴定或辅助鉴定携带TaSOD ‑A1b基因的小麦品种中的应用； A9)在小麦种质资源分析和鉴定中的应用； A10)在小麦分子 辅助遗传育种中的应用； 所述分子标记为下述任一种： B1)分子标记1， 所述分子标记1为核苷酸序列是SEQ  ID No.5的第140 ‑1558位所示的 DNA分子； B2)分子标记2， 所述分子标记2为核苷酸序列是SEQ  ID No.6的第127 ‑2693位所示的 DNA分子； B3)分子标记组合物， 所述分子标记组合物由所述分子标记1和所述分子标记 2组成。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述物质含有扩增包含权利要求1中所述 分子标记在内的小麦基因 组DNA片段的PCR引物。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特 征在于， 所述PCR引物为下述任一种： C1)引物对1， 所述引物对1由正向引物F1和反向引物 R1组成， 所述正向引物F1为核苷酸 序列是SEQ  ID No.1的单链DNA， 所述反向引物R 1为核苷酸序列是SEQ  ID No.2的单链DNA； C2)引物对2， 所述引物对2由正向引物F2和反向引物 R2组成， 所述正向引物F2为核苷酸 序列是SEQ  ID No.2的单链DNA， 所述反向引物R2为核苷酸序列是SEQ  ID No.3的单链DNA； C3)引物对组合物， 所述引物对组合物由C1)中所述引物对1和C2)中所述引物对2组成。 4.权利要求1中所述的任一分子标记， 和/或， 权利要求3中所述的任一PCR引物。 5.含有权利要求3中任一所述PCR引物的试剂或试剂盒。 6.下述任一种方法： D1)一种鉴定或辅助鉴定小麦为高SOD活性小麦还是低SOD活性小麦的方法； D2)一种鉴别或辅助鉴别小麦 籽粒中SOD活性高低的方法； D3)一种检测或辅助检测小麦是携带TaSOD ‑A1a基因还是TaSOD ‑A1b基因的方法； 其特征在于， 所述方法包括以下步骤： E1)以待鉴定小麦基因组DNA为模板， 利用权利 要求3中所述的引物对1、 引物对2 或引物 对组合物进行PCR扩增， 得到PCR产物； E2)根据所述PCR产物来鉴定小麦为 高SOD活性小麦还是低S OD活性小麦， 或鉴别小麦籽 粒中SOD活性高低， 或检测小麦是携带TaSOD ‑A1a基因还是TaSOD ‑A1b基因。 7.根据权利要求6所述的方法， 其特 征在于， 所述E2)为F1)、 F2)或F3)： F1)所述根据所述PCR产物来 鉴定小麦为高SOD活性小麦还是低SOD活性小麦为： 当利用权利要求3中所述的引物对1进行PCR扩增时， 如果所述PCR产物含有所述分子标权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114507751 A 2记1， 则待鉴定小麦为 或候选为高SOD活性小麦； 如果所述PCR产 物不含有所述分子标记1， 则 待鉴定小麦为或候选为低SOD活性小麦； 当利用权利要求3中所述的引物对2进行PCR扩增时， 如果所述PCR产物含有所述分子标 记2， 则待鉴定小麦为 或候选为低 SOD活性小麦； 如果所述PCR产 物不含有所述分子标记2， 则 待鉴定小麦为或候选为高SOD活性小麦； 当利用权利要求3中所述的引物对组合物进行PCR扩增时， 如果所述PCR产物含有所述 分子标记2， 且不含有所述分子标记1， 则待鉴定小麦为或候选为低SOD活性小麦； 如果所述 PCR产物含有所述分子标记1， 且不含有所述分子标记2， 则待鉴定小麦为或候选为高SOD活 性小麦； F2)所述根据所述PCR产物来 鉴别小麦 籽粒中SOD活性高低为： 当利用权利要求3中所述的引物对1进行PCR扩增时， 所述PCR产物含有所述分子标记1 的待鉴定小麦籽粒中的SOD活性高于所述P CR产物不含有 所述分子标记1的待鉴定小麦籽粒 中的SOD活性； 当利用权利要求3中所述的引物对2进行PCR扩增时， 所述PCR产物含有所述分子标记2 的待鉴定小麦籽粒中的SOD活性低于所述P CR产物不含有 所述分子标记2的待鉴定小麦籽粒 中的SOD活性； 当利用权利要求3中所述的引物对组合物进行PCR扩增时， 所述PCR产物含有所述分子 标记1， 且不含有 所述分子标记2的待鉴定小麦籽粒中的SOD活性高于所述P CR产物含有所述 分子标记 2， 且不含有所述分子标记1的待鉴定小麦 籽粒中的SOD活性； F3)所述根据所述PCR产物来检测小麦是携带TaSOD ‑A1a基因还是TaSOD ‑A1b基因为： 当利用权利要求3中所述的引物对1进行PCR扩增时， 如果所述PCR产物含有所述分子标 记1， 则待鉴定小麦携带TaSOD ‑A1a基因； 如果所述PCR产物 不含有所述分子标记1， 则待鉴定 小麦携带TaSOD ‑A1b基因； 当利用权利要求3中所述的引物对2进行PCR扩增时， 如果所述PCR产物含有所述分子标 记2， 则待鉴定小麦携带TaSOD ‑A1b基因； 如果所述PCR产物 不含有所述分子标记2， 则待鉴定 小麦携带TaSOD ‑A1a基因； 当利用权利要求3中所述的引物对组合物进行PCR扩增时， 如果所述PCR产物含有所述 分子标记2， 且不含有所述分子标记1， 则待鉴定小麦携带TaSOD ‑A1b基因； 如果所述PCR产物 含有所述分子标记1， 且不含有所述分子标记 2， 则待鉴定小麦携带TaSOD ‑A1a基因。 8.权利要求1中所述的分子标记， 和/或， 权利要求2或3中所述的PCR引物， 和/或， 权利 要求5所述的试剂或试剂盒在培育高SOD活性小麦品种和 /或培育低SOD活性小麦品种中的 应用。 9.权利要求5所述的试剂 或试剂盒在鉴定小麦籽粒超氧化物歧化酶活性中的应用， 和/ 或， 在小麦种质资源分析和鉴定中的应用， 和/或， 在小麦分子 辅助遗传育种中的应用。 10.扩增权利要求1中所述的分子标记的PCR引物。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114507751 A 3