(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210226858.4 (22)申请日 2022.03.08 (71)申请人 中南大学湘雅三医院 地址 410013 湖南省长 沙市岳麓区桐梓坡 路 (72)发明人 周建大　史可　陈翔　陈舒悦　 陈佳　刘灿　 (74)专利代理 机构 重庆信必达知识产权代理有 限公司 5 0286 专利代理师 李小伟 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/113(2010.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种皮肤黑素瘤诊断标志物has_circ- IFT46及其应用 (57)摘要 本发明属于生物肿瘤标志物 技术领域， 公开 了一种皮肤黑素瘤诊断标志物has_circ ‑IFT46 及其应用， 所述皮肤黑素瘤诊断标志物has_ circ‑IFT46的核苷酸序列为SEQ  ID No.1； 所述 皮肤黑素瘤诊断标志物has_circ ‑IFT46作为皮 肤黑素瘤靶 标， 用于制备筛选 预防、 缓解和/或治 疗皮肤黑素瘤药物。 本发明circ ‑IFT46在皮肤黑 素瘤组织中低表达， 且低表达利于预后， 提示 circ‑IFT46可成为皮肤黑素瘤诊断标志物， 以及 用于制备诊断皮肤黑素瘤的试剂， 对于皮肤黑素 色瘤的诊断和治疗具有重大价值； 通过检测受试 者体内circ ‑IFT46的表达， 快速、 准确及清楚的 评估黑素瘤的进 展阶段。 权利要求书1页 说明书9页 序列表1页 附图5页 CN 114525343 A 2022.05.24 CN 114525343 A 1.一种皮肤黑素瘤诊断标志物has_circ ‑IFT46， 其特征在于， 所述皮肤黑素瘤诊断标 志物has_circ ‑IFT46的核苷酸序列为SEQ  ID No.1。 2.一种如权利要求1所述皮肤黑素瘤诊断标志物has_circ ‑IFT46作为皮肤黑素瘤靶 标， 在制备筛 选预防、 缓解和/或治疗皮肤 黑素瘤药物中的应用。 3.一种应用如权利要求1所述皮肤黑素瘤诊断标志物has_circ ‑IFT46的用于检测hsa_ circ‑IFT46的检测试剂。 4.如权利要求3所述用于检测hsa_circ ‑IFT46的检测试剂， 其特征在于， 所述用于检测 hsa_circ ‑IFT46的检测试剂的引物对包括上游引物和下游引物， 所述上游引物的核苷 酸序 列为SEQ ID No.2， 所述下游引物的核苷酸序列为SEQ  ID No.3。 5.一种如权利要求3～4任意一项所述用于检测hsa_circ ‑IFT46的检测试剂在制 备诊 断皮肤黑素瘤的产品中的应用。 6.如权利 要求5所述用于检测hsa_circ ‑IFT46的检测试剂在制备诊断皮肤黑素瘤的产 品中的应用， 其特征在于， 所述诊断皮肤黑素瘤的产品包括检测hsa_circ ‑IFT46的检测试 剂。 7.如权利 要求5所述用于检测hsa_circ ‑IFT46的检测试剂在制备诊断皮肤黑素瘤的产 品中的应用， 其特 征在于， 所述诊断皮肤 黑素瘤的产品还 包括芯片、 试剂盒 或核酸膜条。 8.一种如权利要求3～4任意一项所述用于检测hsa_circ ‑IFT46的检测试剂在制 备皮 肤黑素瘤的诊断试剂盒中的应用。 9.如权利 要求8所述用于检测hsa_circ ‑IFT46的检测试剂在制备皮肤黑素瘤的诊断试 剂盒中的应用， 其特征在于， 所述皮肤黑素瘤的诊断试剂盒包括组织RNA提取试剂、 检测 hsa_circ ‑IFT46的检测试剂、 去基因 组DNA试剂和一 步法逆转录PCR试剂。 10.如权利要求8所述用于检测hsa_circ ‑IFT46的检测试剂在制备皮肤黑素瘤的诊断 试剂盒中的应用， 其特征在于， 所述皮肤黑素瘤的诊断试剂盒用于检测肿瘤组织h sa_circ‑ IFT46的表达水平。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114525343 A 2一种皮肤黑素瘤诊断标志物h as_circ‑IFT46及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物肿瘤标志物技术领域， 尤其涉及一种皮肤黑素瘤诊断标志物has_ circ‑IFT46及其应用。 背景技术 [0002]目前， 皮肤黑素瘤(cutaneous  malignant  melanoma， CM)是最具侵袭性的皮肤癌 类型， 仍然 是世界范围内皮肤癌相关死亡的首要原因。 近年， 免疫疗法和靶向治疗方法为黑 素瘤的治疗提供了新的思路， 其治疗具有一定的效果， 一定程度上能够延 长患者的生存期， 但是符合临床使用标准的治疗手段仍然有限， 并且对于已经出现了肿瘤转移的晚期黑色素 瘤患者而言， 现有药物和包括靶向治疗在内的不同治疗策略并未显著提高晚期黑素瘤患者 的生存率和生存期。 因此， 寻找新的诊断标志 物， 提供更有效的治疗 靶点是迫切 和必要的。 [0003]环状RNA(circRNA)是一种特殊类型的非编 码RNA， 与线性 RNA相比， circRNA是通过 非规范剪接产生的， 没有游离的3 ′端和5′端， 这使得它们能够抵抗核糖核酸酶； 同时， 作为 一种共价封闭的环状分子， circRNAs比其他RNA更稳定。 此外， circRNA在真核细胞中广泛存 在， 具有一定的组织特异性， 时空特异性和疾病特异性， 其中大多数是高度保守的。 越来越 多的证据 表明， circRNAs通过多种机制在肿瘤 进展和转移中发挥着潜在的中介作用。 因此， circRNAs很可能成为有用的治疗 靶点分子， 并被 证明是治疗癌症的理想生物标志 物。 [0004]通过上述分析， 现有技术存在的问题及缺陷为： 现有药物和包括靶向治疗在内的 不同治疗策略并未显著提高晚期黑素瘤患者的生存率和生存期。 [0005]解决以上问题及缺陷的难度为： 以生物大分子为主要代表的肿瘤标志物， 虽然研 究广泛， 但是符合临床使用标准的肿瘤标志物仍然有限； 靶向治疗药物精准且缓解率高， 但 维持时间短暂， 且不能避免耐药情况发生， 对于晚期患者收益不佳； 同时黑素瘤治疗方法首 选手术， 并根据不同分期对手术切除界限进 行调整， 而术中往往很难判断， 因此亟待寻找可 靠的术前肿瘤标志 物， 对肿瘤分期进行判断。 [0006]解决以上问题及缺陷的意义为： 皮肤BCC、 cSCC及黑色素瘤中circRNA的显著上调 或下调及其在其他肿瘤系的异常表达提示， 肿瘤的发生与致癌基因异常剪接circRNA有密 切关系。 circRNA可作为一种快速诊断指标， 可指导对患者预后的判断及指导手术方法。 此 外， circRNA作为 miRNA海绵的作用， 即circRNA的多个miRNA结合位点来吸附miRNA， 或与RNA 结合蛋白相结合来影响mRNA表达， 可为未来靶向治疗肿瘤提供新思路。 通过适当修改 circRNA分子， 沉默与癌症相关的重要 结合位点， 也可以针对特定的分子药物 来改变下游的 基因表达以治疗癌症。 由此来看circRNA在临床诊断和治疗中的应用有望成为转化医学和 精准医学的新的立足点。 [0007]虽然肿瘤标志物的研究如火如荼， 各种生物大分子在肿瘤中的差异表达的研究也 不断深入， 但是符合临床使用标准的肿瘤标志物仍然非常有限。 基于现有技术的现状与基 础， 本申请的发明人拟提供一种 具有特异性的标志物， 具体涉及一种诊断早期肿瘤的标志 物、 检测试剂盒及其用途。说　明　书 1/9 页 3 CN 114525343 A 3