(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210047839.5 (22)申请日 2022.01.17 (71)申请人 广西壮族自治区农业科 学院 地址 530007 广西壮 族自治区南宁市大 学 东路174号 (72)发明人 郭辉　冯锐　陈灿　张宗琼　 农保选　夏秀忠　徐志健　梁树辉　 曾宇　张晓丽　李丹婷　 (74)专利代理 机构 北京正华智诚专利代理事务 所(普通合伙) 11870 代理人 杨浩林 (51)Int.Cl. C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01)A01H 1/04(2006.01) (54)发明名称 与水稻抗褐飞虱主效基因bph41(t)连锁的 InDel分子标记及其引物和应用 (57)摘要 本发明公开了一种与水稻抗褐飞虱主效基 因bph41(t)连锁的InDel 分子标记及其引物和应 用。 该分子标记为4M141， 其 由如SEQ ID NO.1和 SEQ ID NO.2所示的引 物序列扩增得到。 本发明 所开发与水稻抗褐飞虱主效基因bph41(t)连锁 的分子标记是一对特异性共显性 分子标记， 其定 位的抗褐飞虱主效基因位点位置明确， 鉴定方 便， 可快速筛选抗虫品种或品系， 有效提高水稻 抗褐飞虱效率。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图1页 CN 114292951 A 2022.04.08 CN 114292951 A 1.一种与水稻抗褐飞虱主效基因bph41(t)连锁的InDel分子标记， 其特征在于， 所述分 子标记为 4M141， 由如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示的引物序列扩增得到 。 2.一种筛选抗褐飞虱水稻的方法， 其特征在于， 采用权利要求1所述的引物序列对待检 样本进行PCR检测， 若利用引物序列扩增出255bp的扩增片段， 且为纯合状态， 则该样 本中存 在抗褐飞虱主效基因bph41(t)。 3.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述PCR的反应体系包括： 10 ×PCR  Buffer1.0 μL， 10mmol/L  dNTP 0.2 μL， 5U/ μL  Taq DNA polymerase  0.1 μL， 10 μmol/L上、 下 游引物各0.2 μL， DNA模板1.0 μL， 最后用d dH2O补足至10.0 μL。 4.根据权利要求2所述的方法， 其特征在于， 所述PCR反应程序为： 95℃预变性5min； 95 ℃变性30s， 55℃退火3 0s， 72℃延伸45s， 进行34个 循环； 72℃延伸5mi n， 4℃保存。 5.一种试剂盒， 其特 征在于， 包括权利要求1所述引物序列。 6.权利要求1所述的分子标记或引物序列， 或权利要求5所述试剂盒在筛选/鉴定抗褐 飞虱水稻品种中的应用。 7.权利要求1所述的分子标记或引物序列， 或权利要求5所述试剂盒在作物分子育种、 培育转基因水稻或水稻种质资源改良中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114292951 A 2与水稻抗褐飞虱主 效基因bph41(t)连锁的InDel分子标记及 其引物和应用 技术领域 [0001]本发明属于基因工程技术领域， 具体涉及一种与水稻抗褐飞 虱主效基因bph41(t) 连锁的InDel分子标记及其引物和应用。 背景技术 [0002]褐飞虱是我国水稻生产的主要虫害之一。 由于它们具有爆发性和毁灭性特点， 对 水稻生产构成了极大威胁， 每年都造成不同程度的损失。 2006年 ‑2015年10年平均， 稻飞虱 实际造成损失占总损失的2 9.51％， 已严重威胁着水稻粮食生产。 [0003]目前生产上仍以化学防治为主， 这不仅增加生产成本、 污 染环境、 影响生态且农药 残留也严重影响人们身体健康。 实践表明， 发掘利用抗褐飞虱基因， 培育推广抗性品种是防 治褐飞虱最有效、 最经济和最 安全的技 术措施。 [0004]迄今为止， 已从栽培稻和野生稻资源中鉴定报道抗褐飞虱主效基因超过40个， 大 部分抗褐飞虱主效基因已定在水稻不同的染色体上,其中利用图位克隆法,克隆验证了8个 基因。 [0005]利用抗褐飞虱基因培育抗虫水稻品种是褐飞虱综合防治中最为经济有效的方法。 国际水稻研究所(IRRI)的研究结果和东南亚的水稻生产实践证明， 即使 是只有中等抗性水 平的水稻品种， 也足以将褐飞虱的群体控制在造成危害的水平以下， 不至于对水稻造成实 际的危害和产量损失。 因此， 挖掘水稻抗褐飞虱基因以及相 应的分子标记并在水稻育种项 目中应用是防治水稻褐飞虱的根本措施。 发明内容 [0006]针对现有技术中的上述不足， 本 发明提供一种与水稻抗褐飞 虱主效基因bph41(t) 连锁的InDel分子标记及其引物和应用， 旨在提高抗褐飞虱水稻选 育的育种效率。 [0007]为实现上述目的， 本发明解决其 技术问题所采用的技 术方案是： [0008]一种与抗褐飞虱基因bph41(t)连锁的共显性分子标记4M141， 其由如SEQ  ID NO.1 和SEQ ID NO.2所示的引物序列扩增得到 。 [0009]引物具体序列为： [0010]4M141‑F： CATTTCCTCATGCAG GTCAGA(SEQ  ID NO.1) [0011]4M141‑R： TAGTTGCCTCTGTGCATC CT(SEQ ID NO.2) [0012]一种筛选抗褐飞虱水稻的方法， 采用上述引物序列 对待检样本进行PCR检测， 若利 用引物序列扩增出255bp 的扩增片段， 且为纯合状态， 则该样本中存在抗褐飞虱主效基因 bph41(t)。 [0013]进一步地， 利用该引物扩增水稻抗源HS204的后代材料或抗褐飞虱基因bph41(t) 单基因系后代材料DNA， 若能扩增出255bp的扩增片段， 则表明该杂交后代材料含有抗褐 飞 虱主效基因位 点bph41(t)。说　明　书 1/5 页 3 CN 114292951 A 3