(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210019905.8 (22)申请日 2022.01.10 (71)申请人 华智生物技 术有限公司 地址 410000 湖南省长 沙市芙蓉区合平路 618号 (72)发明人 易丽媛　曹桂元　田冰川　许美娟　 唐顺学　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 代理人 马俊 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/6895(2018.01) C12Q 1/6858(2018.01) C12N 15/11(2006.01)C12R 1/93(2006.01) (54)发明名称 一组检测IHHNV、 EHP和WSSV的引物组、 试剂 盒及其应用 (57)摘要 本发明公开了一组检测IHHNV、 EHP和WSSV的 引物组、 试剂盒及其应用， 涉及分子生物学技术 领域。 本发明用于检测IHHNV、 EHP和WSSV的引物 组包括： IHHNV ‑F和IHHNV ‑R、 EHP‑F和EHP‑R、 WSSV‑F和WSSV‑R。 该引物组特异性强、 灵 敏度高， 可用于检测IHHNV、 EHP和WSSV。 基于该组引 物的 方法具有操作简单、 灵敏度高、 特异性强、 检测通 量高、 检测速度快和成本低的特点， 且通过荧光 数据直接分析得到结果， 结果判读方式简单直 接。 权利要求书2页 说明书10页 序列表3页 附图7页 CN 114262757 A 2022.04.01 CN 114262757 A 1.一组检测IHHNV、 EHP和WSSV的引物组， 其特征在于， 包括： IHHNV ‑F和IHHNV ‑R、 EHP‑F 和EHP‑R、 WSSV‑F和WSSV‑R； 所述IHHNV ‑F的序列如SEQ  ID NO.1所示； 所述IHHNV ‑R的序列如SEQ  ID NO.2所示； 所 述EHP‑F的序列如SEQ  ID NO.3所示； 所述EHP ‑R的序列如SEQ  ID NO.4所示； 所述WSSV ‑F的 序列如SEQ  ID NO.5所示； 所述 WSSV‑R的序列如SEQ  ID NO.6所示。 2.根据权利要求1所述的引物组， 其特征在于， IHHNV ‑F， EHP‑F和WSSV‑F连接有荧光接 头序列。 3.根据权利要求2所述的引物组， 其特征在于， 所述荧光接头序列选自FAM荧光接头序 列和HEX荧光接头序列。 4.权利要求1 ‑3任一项所述的引物组在制备检测IH HNV、 EHP和WSSV的产品中的应用。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述检测IHHNV、 EHP和WSSV的产品中还包 括用于检测内参基因的上游引物IC ‑F和下游引物IC ‑R。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特 征在于， 所述内参基因为对虾GAD PH基因； 所述上游引物IC ‑F的序列如SEQ  ID NO.10所示； 所述下游引物IC ‑R的序列如SEQ  ID NO.11所示。 7.根据权利要求5或6所述的应用， 其特征在于， 所述检测IHHNV、 EHP和WSSV的产品 的使 用方法为： 采用所述检测IHHNV、 EHP和WSSV的产品对样品基因组进行KASP反应检测， 分析检 测数据， 得到分析 结果。 8.根据权利 要求7所述的应用， 其特征在于， 用于KASP反应检测的KASP反应混合液的组 成如下： 和 所述WSSV‑F和IC‑F连接有不同的荧 光接头序列； 所述IHHNV‑F和EHP‑F连接有不同的荧 光接头序列。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114262757 A 29.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述KASP反应 的扩增程序为： 94℃  5min； 94℃ 20s， 65℃‑57℃ 60s， 10个循环， 每个循环降低0.8℃； 94℃  20s， 57℃ 60s， 40个循环。 10.一种检测IHHNV、 EHP和WSSV的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂盒中包括权利要求1 ‑3 任一项所述的引物组。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114262757 A 3