(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210015613.7 (22)申请日 2022.01.07 (71)申请人 甘肃润牧生物工程有限责任公司 地址 737206 甘肃省金昌市永昌县 朱王堡 镇绿色工业园区 (72)发明人 王维民　张兆才　杨晓斌　李发弟　 张小雪　李建栋　宿平平　孙锦林　 周伟善　郭旭　沈先林　 (74)专利代理 机构 北京智为时代知识产权代理 事务所(普通 合伙) 11498 代理人 王加岭 (51)Int.Cl. C12Q 1/6888(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 一种与湖羊饲料转化率相关的分子标记及 其应用 (57)摘要 本发明提供了一种与湖羊饲料转化率相关 的分子标记， 以及该分子标记的检测方法和应 用。 本发明通过对湖羊ADCY8基因进行PCR扩增和 序列分析， 发现在扩增片段的第486位存在一个 T/C多态性位点， 进一步使用KASPar引物对981只 湖羊的多态性位点进行检测和建立最小二乘模 型， 对基因型与饲料转化率进行关联分析， 最终 确定了本发明扩增的ADCY8基因片段可以作为与 湖羊饲料转化率相关的分子标记。 本发明的分子 标记可用于选留TT纯合的湖羊进入核心 群， 以提 高湖羊的饲料转化率， 降低生产成本， 有助于增 加经济效益。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图2页 CN 114182026 A 2022.03.15 CN 114182026 A 1.一种与湖羊饲料转化率相关的分子标记， 其特征在于， 所述分子标记的核苷酸序列 如SEQ ID NO.1所示， 其中在该序列的第486bp处的Y是C或T， 该突变导致分子标记的C/T多 态性。 2.一种检测权利要求1所述的分子标记的PCR引物对， 其特征在于， 其包括核苷酸序列 如SEQ ID NO.2所示的正向引物， 和如SEQ  ID NO.3所示的反向引物。 3.一种检测权利 要求1所述的分子标记的KASPar引物对， 其特征在于， 所述KASPar引物 对包括如SEQ  ID NO.4所示的用于检测 AlleleC的正向引物A1、 如SEQ  ID NO.5所示的用于 检测AlleleT的正向引物 A2和如SEQ ID NO.6所示的通用反向引物C 。 4.一种检测权利要求1所述的分子标记的试剂 盒， 其特征在于， 所述试剂 盒包含权利要 求2或3所述的引物对。 5.一种检测权利要求1所述的分子标记的方法， 其包括如下步骤： a)使用权利要求2或3所述的引物对， 或者使用权利要求4所述的试剂盒， 对湖羊基因组 DNA进行扩增； b)对步骤a)获得扩增产物的多态性 位点进行鉴定 。 6.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于， 步骤b)中， 所述鉴定的方法选自测序法、 荧 光探针法、 基因芯片法、 高分辨 率溶解曲线法。 7.根据权利要求5所述的方法， 其特征在于， 利用权利要求3所述的KASPar引物对进行 PCR扩增， 扩增结束后， 再通过检测荧 光信号确定分型 结果。 8.权利要求1所述的分子标记及其多态性位点、 或权利要求2或3所述的引物对， 或权利 要求4所述的试剂盒， 或权利要求5 ‑7任一项所述的方法在湖羊饲料转 化率检测中的应用。 9.权利要求1所述的分子标记及其多态性位点、 或权利要求2或3所述的引物对， 或权利 要求4所述的试剂盒， 或权利要求5 ‑7任一项所述的方法在湖羊育种中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特 征在于， 所述育种为培 育饲料转 化率高的湖羊。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114182026 A 2一种与湖羊饲料转化 率相关的分子标记及其应用 技术领域 [0001]本发明属于分子标记制备及应用技术领域， 具体涉及一种ADCY8基因片段作为影 响湖羊饲料转 化率的分子标记及其应用。 背景技术 [0002]腺苷酸环化酶(ADCY8)是一种膜结合酶， 可催化ATP形成环AMP。 酶活性受几种激素 的控制， 不同的多肽参与信号从受体到催化部分 的转导。 刺激性或抑制性受体(Rs和Ri)与 具有GTPase活性的G蛋白(Gs和Gi)相互作用， 它们调节腺苷酸环化酶催化亚基的活性 (RefSeq， Jul  2008)。 响应钙进入催化cAMP的形成， 导致cAMP信号激活， 影响突触可塑性和 胰岛素分泌等过程， ADCY8水平与体重指数和Hb1Ac水平呈正相关， 全基因组分析研 究确定 了ADCY8基因变异、 肥胖和异常脂肪组织库之间的关联(Abdel ‑Halim， S.M.， Al  Madhoun， A.， Bitar， M.S.， &Al ‑Mulla， F.， 2020)。 [0003]据国家统计局数据显示， 2017年的绵、 山羊的存栏量达3.02亿只， 羊肉产量达 471.07万吨， 是世界最大的羊肉生产和消费国(张小雪.不同剩余采食量羔羊生产性能和瘤 胃微生物区系及肝脏转录组研 究[D].兰州大学， 2019.)。 羊肉生产现在大多数是舍饲条件 下喂养， 对粮食依赖性大， 如何最大程度的提高羊群饲料转化率， 不仅能解决缓解粮食供给 不足的问题， 还能有效提高经济效益。 在不影响动物正常生长的前提下， 降低饲料投入的遗 传改良所 涉及的指标即畜禽的饲料利用率的提高， 有重要的研究意 义。 [0004]动物的饲料利用率指动物对所采食饲粮的利用效率， 主要受饲粮以及动物两方面 因素的影响。 饲料效率(Feed  efficiency， FE)是饲料转化率(Feed  conversion  ration， FCR)的简称， 也叫饲料报酬， 一般情况下饲料转化率是指动物增 重1kg所消耗的饲料量， 即 料重比(feed  intake/gain， F/G)， 是长期以来人们使用的衡量饲料利用率高低的一项重要 经济指标。 另外， 增重饲料比(gain/feed  intake， G/F)都是表示畜禽增重和日粮采食量之 间关系的指标。 如何能筛选出对湖羊饲料转化率相关的基因及有什么关联， 对湖羊培育出 节粮型优质肉羊新品种的培 育， 能有效解决对粮食需要的压力。 [0005]本发明通过对ADCY8基因进行测序和分析， 探讨其不同基因型与湖羊饲料转化率 之间的关联， 旨在为提高湖羊饲料转化率的遗传改良方面提供基因素材， 加速拥有自主知 识产权的饲料转 化率高型优质肉羊新品种的培 育进程。 发明内容 [0006]为了解决上述技术问题， 本发明提供一种作为与湖羊饲料转化率相关的分子标记 及其应用。 [0007]为实现上述目的， 本发明采用以下的技 术方案为： [0008]一种与湖羊饲料转化率相关的分子标记， 该分子标记通过对湖羊ADCY8基因进行 扩增而获得， 具体的， 该分子标记的核苷 酸序列如SEQ  ID NO.1所示， 其中该序列的第48 6位 的Y表示C或T， 由于在该碱基处的T/C突变， 从而导致了湖羊ADCY8基因在该位点的C/T多态说　明　书 1/6 页 3 CN 114182026 A 3