(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210010989.9 (22)申请日 2022.01.06 (71)申请人 山西大学 地址 030006 山西省太原市坞城路9 2号 (72)发明人 李建国　牛嘉慧　张雅卓　夏娟　 吴长新　 (74)专利代理 机构 太原申立德知识产权代理事 务所(特殊普通 合伙) 14115 代理人 张向莹 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/6869(2018.01) C12N 15/11(2006.01) C12R 1/93(2006.01) (54)发明名称 一种新型冠状病毒全基因组序列的扩增引 物及扩增方法 (57)摘要 本发明属于生物 技术领域， 具体涉及一种新 型冠状病毒全基因组序列的扩增引物及扩增方 法。 为解决现有扩增方法成本高、 耗时长、 难度高 等问题， 本发明设计36对引物， 并利用所述36对 扩增引物进行PCR扩增， 使用质量浓度为1 ％琼脂 糖凝胶电泳检测PCR扩增产物， 使用PCR扩增引物 进行双端测序， 测序序列使用DNASTAR软件包的 SeqMan进行拼接 。 权利要求书3页 说明书8页 序列表12页 附图1页 CN 114292960 A 2022.04.08 CN 114292960 A 1.一种新型 冠状病毒全基因 组序列的扩增引物， 其特 征在于， 包括3 6对引物对： 第1对引物的上游引物为： 5 ’‑TGCTTAGTGCACTCACGCAG ‑3’， 下游引物为： 5 ’‑ GCCACAAAATTCGCAAGTGGC‑3’； 第2对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GATCTGTCTATCCAGTTGCGTCACC ’， 下游引物为： 5 ’ ‑ TGTACAATCCCTTTGAGTGCGTGAC ‑3’； 第3对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GTTCAGTTGACTTCGCAGTGGC ‑3’， 下游引物为5 ’ ‑ CCTGCAACACCTCCTCCATG‑3’； 第4对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CCTGTGTTGTGGCAGATGCTGTC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ AACCCTGACCCGGGTAAGTGG‑3’； 第5对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CCAGATTCTGCCACTCTTGTTAGTGAC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GGCAAGATAACAGTTGTTATCTGCCCA‑3’； 第6对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CCACACGCAAGTTGTGGACATGTC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CCACCACATCAC CATTTAAGTCAGGG‑3’； 第7对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GATGTCAGCACCACCTGCTCAGTATG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CCACCACATCAC CATTTAAGTCAGGG‑3’； 第8对引物的上游引物为： 5 ’‑AAGTCAGAGGACGCGCAGG ‑3’， 下游引物为： 5 ’‑ CTAACCATAGCTGA AATCGGGGCC‑3’； 第9对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GCTTTTGGCTTAGTTGCAGAGTGG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GCTACCTGCGCAT TAATATGACGC ‑3’； 第10对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GGTGATAGTGCGGAAGTTGCAG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GGCAAGGCATGTTACTACGATAGCTAC ‑3’； 第11对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CCTGGTTTGCCTGGCACGAT ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GGTGCAGATCACATGTCT TGGACAG‑3’； 第12对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GAAGAAGCTGCGCTGTGCACC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GTCCACACTCTC CTAGCACCATCATC‑3’； 第13对引物的上游引物为： 5 ’ ‑AGCTTGGTTGTACGCTGCTG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GTAACTGGACACATTGAGCCCACA‑3’； 第14对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GATCAAGCCATTTCCATGTGGGCTC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CCATCACTCT TAGGGAATCTAGCCCAT‑3’； 第15对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CAATGCAAGAGATGGTTGTGTTCCCTTG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GCATAGACGAG GTCTGCCATTGTGT‑3’； 第16对引物的上游引物为： 5 ’ ‑TGCCACAGTACGTCTACAAGCTGG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CTGCAGTTAAAGCCCTGGTCAAGG‑3’； 第17对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GGCAGACCTCGTCTATGCTTTAAGGC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CTACAGTAGCTC CTCTAGTG GCGGC‑3’； 第18对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CAGGATGGTAATGCTGCTATCAGCG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ ACTGTATGCG GTGTGTACATAGC CTC‑3’； 第19对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GTCAAGCTGTCACGGCCAATG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CTTGTGGCACTAGTGTAG GTGCAC‑3’；权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114292960 A 2第20对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GATGTGGTGCTTGCATACGTAGACC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CTTGTAAAGTTGCCACATTCCTACGTGG‑3’； 第21对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GGCGACCCTGCTCAATTACCTGC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ TCGTGGACAGCTAGACAC CTAGTCATG ‑3’； 第22对引物的上游引物为： 5 ’ ‑ATTGGCTTCGATGTCGAGGGGTGT ‑3’， 下游引物为5 ’ ‑ CCCACAAGCTAAAGCCAGCTGAGATC ‑3’； 第23对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CCCAGTTCTTCACGACATTGGTAACC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CCGGTTGCCACGCTTGACTAGA ‑3’； 第24对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GGAGTCACATTAATTGGAGAAGCCG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ ACACACTGACTAGAGACTAGTG GC‑3’； 第25对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CTACGGGTACGCTGCTTGTCG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CAGCACCAGCTGTC CAACCTG‑3’； 第26对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CATGGGACACTTCGCATGGTGG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GGGTCAAGTGCACAGTCTACAGCATC ‑3’； 第27对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GTCTCTGGGACCAATGGTACTAAGAGG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GAATAGCAACAGGGACTTCTGTGCAG ‑3’； 第28对引物的上游引物为： 5 ’ ‑TCTATCAGGCCGGTAGCACACCTTG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CCGCTAACAGTGCAGA AGTGTATTGAGC‑3’； 第29对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GTGACACTTGCAGATGCTGGCTTCATC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ TCACCATTACTATGGCAATCAAGCCAGC‑3’； 第30对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GGCACACACTGGTTTGTAACACAAAGG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CACGCTAGTAGTCGTCGTCG GTTC‑3’； 第31对引物的上游引物为： 5 ’ ‑TGGCCATGGTACATTTGGCTAGGT ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ AGTACCGTTGGAATCTGCCATGGC‑3’； 第32对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CTTCAGGTGATGGCACAACAAGTCC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ AGTTACTGGCCATAACAGCCAGAGG‑3’； 第33对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GTTACACTAGCCATCCTTACTGCGC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CCTCGTATGT TCCAGAAGAGCAAGG‑3’； 第34对引物的上游引物为： 5 ’ ‑GCGTGTAGCAGGTGACTCAGG ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ ACCAAACGTAATGCGGGGTGC‑3’； 第35对引物的上游引物为： 5 ’ ‑AATTGTGCGTGGATGAGGCTGGTTC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ GATGGCACCTGTGTAG GTCAACC‑3’； 第36对引物的上游引物为： 5 ’ ‑CATTGGCACCCGCAATCCTGC ‑3’， 下游引物为： 5 ’ ‑ CACATTAGGGCTCTTCCATATAGGCAGC‑3’。 2.一种利用权