(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210788287.3 (22)申请日 2022.07.06 (71)申请人 合肥工业大 学 地址 230009 安徽省合肥市包河区屯溪路 193号 (72)发明人 王峰　余月　王镇峰　 (74)专利代理 机构 合肥国和专利代理事务所 (普通合伙) 34131 专利代理师 孙永刚 (51)Int.Cl. A61K 47/42(2017.01) A61K 47/24(2006.01) A61K 47/02(2006.01) A61K 9/127(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种可黏附蛋白的脂质体纳米胶水及其制 备方法 (57)摘要 本发明提供一种可黏附蛋白的脂质体纳米 胶水及其制备方法， 包括纳米胶水层、 吸附在表 面的中性脂质体和非修饰的蛋白质， 通过静电相 互作用实现蛋白质在纳米胶水层的表 面黏附。 本 发明的高效蛋白质黏附脂质体的纳米胶水可实 现简单， 便捷的无需结构修饰的将蛋白质黏附在 脂质体表面， 不需要对蛋白质进行修饰。 并且可 在肿瘤细胞谷胱甘肽水平下实现降解， 释放蛋白 质、 脂质体， 完成生物医学功能。 具有优良的生物 相容性， 可携带多种药物分子以及蛋白质分子 等， 在药物递送， 肿瘤治疗等多方面具有广泛的 应用前景。 权利要求书2页 说明书7页 附图4页 CN 115154616 A 2022.10.11 CN 115154616 A 1.一种可黏附蛋白的脂质体纳米胶水， 其特征在于， 包括纳米胶水层、 吸附在表面的中 性脂质体和非修饰的蛋白质， 通过静电相互作用实现蛋白质在 纳米胶水层的表面 黏附。 2.根据权利要求1所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水， 其特征在于， 所述纳米胶水层 为二氧化锰纳米片。 3.根据权利要求1所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水， 其特征在于， 所述中性脂质体 为1,2‑二油酰基 ‑sn‑甘油‑3‑磷酸胆碱， 其粒径为10 0nm， 通过薄膜水化法获得。 4.根据权利要求1 ‑3中任一项权利要求所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水的制备方 法， 其特征在于， 包括以下步骤： (1)制备二氧化锰纳米片； (2)制备DOPC 脂质体； (3)验证Mn O2纳米片能否吸附蛋白质： 以步骤(1)得到的二氧化锰纳米片为纳米胶水层， 通过屏蔽静电相互作用后， 采用物理吸附蛋白质， 与蛋白质按 特定比例混合， 获得二氧化锰 蛋白质纳米颗粒； (4)验证Mn O2纳米片能否吸附脂质体： 以步骤(1)得到的二氧化锰纳米片为纳米胶水层， 采用物理吸附脂质体， 与步骤(2)制备的DOP C脂质体按 特定比例混合， 可获得脂质二氧化锰 纳米颗粒； (5)将步骤(1)获得的二氧化锰纳米片、 步骤(2)获得的DOPC脂质体混合后再与蛋白质 按特定比例混合； 或者直接采用步骤(4)获得的脂质二氧化锰纳米颗粒与蛋白质按特定比 例混合， 得到 脂质蛋白质纳米颗粒。 5.根据权利要求4所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水的制备方法， 其特征在于， 步骤 (1)中二氧化锰纳米片制备步骤如下: 步骤(1.1)以四甲基氢氧化铵和过氧化氢为氧化剂， 快速加入氯化锰， 将混合物在室温 下剧烈搅拌过夜。 步骤(1.2)将制备好的MnO2离心， 并用水和甲醇洗涤各三次， 干燥至无 水分； 步骤(1.3)将大块MnO2样品分散在水中， 在冰浴下， 用超声波处理器将样品超声,获得纳 米尺度的MnO2纳米片。 6.根据权利要求4所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水的制备方法， 其特征在于， 步骤 (2)中DOPC 脂质体的制备 方法包括以下步骤： 步骤(2.1)取一定量溶解在氯仿中的D OPC， 去除溶剂氯仿， 并将样品在室温下存放在真 空干燥箱中， 形成均匀的薄膜； 步骤(2.2)加入缓冲液， 超声处 理乳白色溶 液， 最后在低温下， 将DOPC溶 液孵育过夜； 步骤(2.3)将D OPC混悬液通过两个堆叠的聚碳酸酯膜挤压多次， 挤出后， 脂溶液呈透明 状态， 表明脂质体形成。 7.根据权利要求4所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水的制备方法， 其特征在于， 步骤 (3)中所述的二氧化锰蛋白质纳米颗粒的制备方法为： 以制备得到的MnO2纳米片和FITC ‑ BSA作为原料， 混合均匀后室温孵 育， 离心， 弃 上清， 沉淀 重悬后获得。 8.根据权利要求4所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水的制备方法， 其特征在于， 步骤 (4)中二氧化锰脂质纳米颗粒的制备方法为： 以薄膜水化法制备DOPC,并用缓冲液稀释， 以 制备得到的MnO2纳米片和DOPC作为原料， 混合均匀后室温孵育， 离心， 弃上清， 沉淀重悬后，权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115154616 A 2获得。 9.根据权利要求4所述的可黏附蛋白的脂质体纳米胶水的制备方法， 其特征在于， 步骤 (5)中的脂质蛋白质纳米颗粒的制备方法为： 以步骤(4)制备得到的二氧化锰脂质纳米颗粒 复合物为原料， 先后加入FITC ‑BSA和氯化镁， 混合均匀后， 室温孵育， 离心， 弃上清， 沉淀重 悬后， 得到高效蛋白黏附脂质体的纳米胶水。 10.一种采用权利要求4 ‑9中任一项所述的制备方法获得的可黏附蛋白的脂质体纳米 胶水应用于药物递送、 肿瘤治疗领域。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115154616 A 3