(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210625361.X (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 平顶山学院 地址 467000 河南省平 顶山市新城区未来 路南段 (72)发明人 杜会强　张利芳　李玖零　毛冬雪　 何佩娜　 (74)专利代理 机构 北京盛凡佳华专利代理事务 所(普通合伙) 11947 专利代理师 蔡浩 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 47/54(2017.01) A61K 9/50(2006.01) A61K 31/337(2006.01)A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球及其制 备方法与应用 (57)摘要 本发明公开一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向 微球及其制备方法与应用， 属于功能材料技术领 域， 具体制备方法包括以下步骤： (1)空白微球制 备； (2)叶酸修饰微球制备； (3)装载多西紫杉醇。 同时， 本发 明还公开了上述制备方法制备得到的 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球及其在在抗乳腺 癌药物的制备中的应用。 本发明使用复乳法制备 出的空白微球， 其平均粒径为22.38μm， 在人血 浆中进行测定， 72h的累积释放量可达到80％以 上。 另外， 本发明提供的制备方法简单， 便于进行 推广使用。 权利要求书1页 说明书5页 附图4页 CN 114767879 A 2022.07.22 CN 114767879 A 1.一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)空白微球制 备： 将Tris缓冲液、 聚山梨酯20与PLGA的二氯甲烷溶液混合均匀， 得到 第一复乳， 然后将其倒入聚乙烯吡咯烷酮的PBS缓冲溶液中， 得到第二复乳， 继续搅拌除去 有机溶剂后依次进行离心分离、 水洗、 冻干， 得到空白微球； (2)叶酸修饰微球制备： 依次将叶酸的DMS0溶液和三乙胺催化剂加至空白微球分散液 中避光反应2 4h， 反应结束后， 分离产 物， 用TRis缓冲溶液洗涤3次后， 在 去离子水中透析， 得 到叶酸修饰微球； (3)装载多西紫杉醇： 将多西紫杉醇、 HCI溶液依次加入到叶酸修饰微球水分散液中， 搅 拌反应12h后分离产物， 得到所述多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球。 2.根据权利要求1所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述PLGA的二氯甲烷溶 液中PLGA与二氯甲烷的体积比为6 0:40； 所述Tris缓冲液、 聚山梨酯20与PLGA的二氯甲烷溶液的添加量之比为100ml： 100mg： 80mL； 所述聚乙烯吡咯烷酮的PBS缓冲溶 液中聚乙烯吡咯烷酮的质量分数为2％； 所述第一复乳与所述聚乙烯吡咯烷酮的PBS缓冲溶 液的添加量之比为20mL:3 0mL。 3.根据权利要求1所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法， 其特征在于， 步骤(1)中所述搅拌速率为500r/min， 搅拌时间为2min； 所述继续搅拌速率为1000r/min， 搅 拌时间为3 h。 4.根据权利要求1所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述叶酸的DMSO溶 液的浓度为0.0 31g/ml； 所述空白微球分散液浓度为0.28mg/mL； 所述叶酸的DMS0溶 液、 三乙胺 催化剂和空白微球分散液的体积比为2： 0.1： 25 。 5.根据权利要求4所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法， 其特征在于， 步骤(2)中所述避光反应时间为24h 。 6.根据权利要求1所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法， 其特征在于， 步骤(3)中所述H Cl溶液浓度为1mg/ml； 所述叶酸 修饰微球水分散液的浓度为0.19mg/mL。 7.根据权利要求6所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法， 其特征在于， 所述多西紫杉醇与叶酸 修饰微球水分散液的添加量之比为1:1； 所述HCl溶液与叶酸 修饰微球的体积比为1:1。 8.根据权利要求1所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法， 其特征在于， 步骤(3)中所述反应温度为80℃， 搅拌速率 为200r/min。 9.如权利要求1 ‑8任一所述的一种 多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备方法制备得到 的多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球。 10.如权利要求9所述的一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球在抗乳腺癌药物的制备中 的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114767879 A 2一种多西 紫杉醇恶性肿瘤靶向微球及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明涉及功能高分子材料领域， 特别是涉及一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球 及其制备 方法与应用。 背景技术 [0002]癌症己严重危害人类的健康， 成为人类杀手之一， 居常见死亡原因的首位。 全球乳 腺癌发病率自20世纪70年代末开始 一直呈上升趋势， 其进展迅速、 生存质量差， 是迄今全部 肿瘤中治疗效果较差的恶性肿瘤之一， 而且大部分确诊已属晚期， 手术切除率低， 对全身化 疗及放疗均不敏感， 且 全身化疗 存在靶向性差、 疗效不佳、 毒副作用大等 缺点。 [0003]多西紫杉醇， 又称泰素帝， 属于紫杉类化合物抗肿瘤药， 适用于局部晚期或转移性 乳腺癌的治疗， 也适用于局部晚期或转移 性非小细胞肺癌、 卵巢癌的治疗， 即使 是在以顺铂 为主的化疗失败后。 泰素帝的作用机制是加强微管蛋白聚合作用和抑制微管解聚作用， 导 致形成稳定的非功能性微管束， 因而破坏肿瘤细胞 的有丝分裂。 泰素帝在细胞内浓度比紫 杉醇高3倍， 并在细胞内滞留时间长， 这是本品在体外试验中比紫杉 醇抗肿瘤活性大的重要 原因。 [0004]靶向制剂(target ing drug delivery system)属于第三代药物剂型， 将传统的药 物包埋于基质或载体， 利用基质的吸附、 增粘、 支架粘连或膜屏障等作用， 提高药物稳定性， 降低血浓峰谷 现象， 延缓药物释放速度， 提高药物靶向定位， 使 药物吸收变慢、 作用延 长、 毒 性降低， 提高药效和安全度， 解决了传统药物尤其是抗肿瘤药物半衰期短、 难于长期间维持 血药浓度、 全身毒副作用大、 病人较难耐受等缺点， 是目前抗肿瘤药物研究的重要发展趋 势， 并可为 寻找新的治疗方法提供 方向。 [0005]因此， 如何提供一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向制剂是本领域技术人员亟需解决的 技术问题。 发明内容 [0006]本发明的目的是提供一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向制剂及其制备方法与应用， 以 解决上述现有技术存在的问题， 通过细胞实验观察其细胞毒性、 靶向性及其对肿瘤细胞 的 杀伤作用。 [0007]为实现上述目的， 本发明提供了如下 方案： [0008]一种多西紫杉醇恶性肿瘤靶向微球的制备 方法， 包括以下步骤： [0009](1)空白微球制备： 将Tris缓冲液、 聚山梨酯20与PLGA的二氯甲烷溶液混合均匀， 得到第一复乳， 然后将其倒入聚乙烯吡咯烷酮的PBS缓冲溶液中， 得到第二复乳， 继续搅拌 除去有机溶剂后依次进行离心分离、 水洗、 冻干， 得到空白微球； [0010](2)叶酸修饰微球制备： 依次将叶酸 的DMS0溶液和三乙胺催化剂加至空白微球分 散液中避光反应24h， 反应结束后， 分离产物， 用TRis缓冲溶液洗涤3次后， 在去离子水中透 析， 得到叶酸 修饰微球；说　明　书 1/5 页 3 CN 114767879 A 3