(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210933886.X (22)申请日 2022.08.04 (71)申请人 福建傲农生物科技 集团股份有限公 司 地址 363001 福建省漳州市芗城区金峰经 济开发区兴亭路与宝莲路交叉处 申请人 福建傲凯生物科技有限公司 　 云南快大多畜牧科技有限公司 (72)发明人 王少青　张仙妹　吴春龙　张幻　 陈淋敏　梁世仁　王跃明　吴有林　 (74)专利代理 机构 上海科盛知识产权代理有限 公司 312 25 专利代理师 王颖 (51)Int.Cl. G01N 5/04(2006.01)G01N 1/28(2006.01) G01N 1/30(2006.01) G01N 1/34(2006.01) G01N 1/40(2006.01) (54)发明名称 一种谷朊粉总脂肪的检测方法 (57)摘要 本发明涉及一种谷朊粉总脂肪的检测方法， 包括以下步骤： (1)试样蛋白酶溶解： 称取试样， 与胃蛋白酶混合， 加入盐酸溶液， 使试样完全溶 解； (2)总脂肪水解： 试样完全溶解后， 加入浓盐 酸， 水浴至 试样脂肪游离消化完全； (3)总脂肪 提 取： 萃取得到上清液； (4)总脂肪浓缩、 烘干、 称 重： 将装有上清液的恒重容器于水浴上蒸干后 在 100～110℃干燥至恒重， 称重， 记为m1； (5)结果 计算： 谷朊粉总脂肪含量EE(％)按下式进行计 算： 式中： m1‑已恒重 的“容器+油脂 ”质量， 单位为 g； m0‑已恒重的空容 器质量， 单位为g； m ‑试样质量， 单位为g。 与现有 技术相比， 本发 明通过胃蛋白酶除去谷朊粉水合 粘弹性对脂肪测定的干扰， 检测结果稳定性好， 准确度高， 重复性 好。 权利要求书2页 说明书4页 CN 115436218 A 2022.12.06 CN 115436218 A 1.一种谷 朊粉总脂肪的检测方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： (1)试样蛋白酶溶解： 称取 试样， 与胃蛋白酶混合， 加入盐酸溶 液， 使试样完全溶解； (2)总脂肪水解： 试样完全溶解后， 加入 浓盐酸， 水浴至试样脂肪游离消化完全； (3)总脂肪提取： 萃取 得到上清液； (4)总脂肪浓缩、 烘干、 称重： 将装有上清液的恒重容器于水浴上蒸干后在100～110℃ 干燥至恒重， 称重， 记为m1； (5)结果计算： 谷 朊粉总脂肪含量E E(％)按下式进行计算： 式中： m1‑已恒重的“容器+油脂 ”质量， 单位 为g； m0‑已恒重的空容器质量， 单位 为g； m‑试样质量， 单位 为g。 2.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)称取试样2～ 5g， 记为m， 与等 量胃蛋白酶混合均匀， 置 于250mL带塞磨口瓶中， 加入20～5 0mL的盐酸溶 液。 3.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)所述的盐酸 溶液为新配制的并已预 热至42～45℃的盐酸溶 液。 4.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(1)所述的盐酸 溶液pH为1～ 2。 5.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)试样完全溶 解后， 加入20～50mL浓盐酸， 加盖， 放置于70～80℃水浴中， 每隔5min摇匀一次， 至样品脂肪 游离消化完全为止 。 6.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(2)水解过程中， 如水分蒸发， 应适当补加水， 保持溶 液总体积不变， 以避免酸浓度升高。 7.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(3)取出盛有水 解后的溶液的容器， 加入乙醇后， 混匀， 转移至 分液漏斗中， 用石油醚润洗容器， 洗涤液一起 并入分液漏斗中， 混匀， 冷却 后再加入石油醚， 加塞振荡， 开塞放出气体， 再塞好， 静置， 取上 部澄清液体于100～110℃恒重的烧杯内， 再加入石油醚， 加塞振荡， 开塞放出气体， 再塞好， 静置， 取上部澄清液体于同一个100～110℃恒重的烧杯内， 重复提取， 上部澄清液体并入同 一个100～110℃恒重的烧杯内。 8.根据权利要求6所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(3)取出具塞磨 口瓶， 加入10mL乙醇后， 混匀， 转移至 分液漏斗中， 用石油醚少量多次润洗磨口瓶， 洗涤液一 起并入分液漏斗中， 混匀， 冷却后再加入50mL石油醚， 加塞振荡1min， 开塞放出气体， 再塞 好， 静置10min， 取上部澄清液体于105℃恒重的烧杯内， 再加入50mL石油醚， 加塞振荡1min， 开塞放出气体， 再塞好， 静置10min， 取上部澄清液体于同一个105℃恒重的烧杯内， 重复提 取3～5次， 上部澄清液体并入同一个10 5℃恒重的烧杯内。 9.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(4)将装有上部 澄清液体的恒重容器于水浴上蒸干后在10 5℃烘箱中干燥至恒重 。 10.根据权利要求1所述的谷朊粉总脂肪的检测方法， 其特征在于， 步骤(4)干燥至恒重权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115436218 A 2的过程中， 先烘1.5 h， 取出冷却后称重， 再烘0.5 h， 取出冷却后称重， 直到恒重 。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115436218 A 3