(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210907332.2 (22)申请日 2022.07.29 (71)申请人 江阴天江药业有限公司 地址 214429 江苏省无锡市江阴高新区新 胜路1号 (72)发明人 张云天　顾超　何雪霞　翟燕娟　 周敏　张宇静　李松　陈盛君　 过科家　周海琴　浦香兰　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 王艳 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/54(2006.01)G01N 30/74(2006.01) G01N 30/88(2006.01) (54)发明名称 一种槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法 及其指纹图谱和应用 (57)摘要 本发明公开了一种槟榔及其炮制品指纹图 谱的构建方法及其指纹图谱和应用， 本方法通过 色谱条件优化提高了分析效率， 在较 短的分析时 间内获得了较多的共有峰。 经过对照品的指认， 确认了共有峰中包括了生物碱、 多酚类及黄酮类 成分， 专属性较高， 有利于产品的质量控制， 并且 通过指纹图谱共有峰 的个数不同能够区分槟榔、 炒槟榔和焦槟榔的样品， 适于对槟榔、 炒槟榔和 焦槟榔的药材、 饮片、 提取物、 标准汤剂、 配方颗 粒以及含有槟榔及其炮制 品的经典名方的基准 样品、 制剂中间产品、 成 品进行快速、 全面地质量 控制， 方法高效， 适于连续 化生产的质量 监控。 权利要求书2页 说明书13页 附图5页 CN 115406980 A 2022.11.29 CN 115406980 A 1.一种槟榔 及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特 征在于， 包 含以下步骤： (1)配制供试品溶液和参照物溶液： 所述供试品溶液为槟榔或其炮制品提取得到的溶 液， 所述参照物 为对照品， 包括原花青素B1、 儿茶素、 表儿茶素、 去甲槟榔次碱、 槟榔次碱、 去 甲槟榔碱和槟榔碱； (2)利用超高效液相色谱仪分别对供 试品溶液和参照物溶 液进行检测； (3)对照参照物确认共有峰， 构建指纹图谱。 2.根据权利要求1所述的构建方法， 其特 征在于， 所述炮制品为炒槟榔、 焦槟榔。 3.根据权利要求1所述的构建方法， 其特征在于， 步骤(1)中， 所述供试品包括槟榔及其 炮制品的药材、 饮片、 提取物、 标准汤剂、 配方颗粒或者含有槟榔及其炮制品的经典名方的 基准样品、 制剂中间产品或 成品。 4.根据权利要求1所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特征 在于， 步骤(1)中， 所述供试品溶液用提取溶剂提取供试品得到， 提取溶剂与供试品的液固 比为50～250mL/g， 所述 参照物溶 液为用溶剂溶解对照品得到 。 5.根据权利要求4所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特征 在于， 所述 提取溶剂为水、 醇或醇 ‑水溶液， 所述溶剂为水、 醇或醇 ‑水溶液。 6.根据权利要求5所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特征 在于， 所述醇为甲醇， 醇 ‑水溶液为甲醇 ‑水溶液； 配置供试品溶液时， 甲醇 ‑水溶液中的甲醇 体积分数不低于10％； 配置参照物溶 液时， 甲醇 ‑水溶液中的甲醇体积分数不低于 30％。 7.根据权利要求1所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特征 在于， 步骤(1)中， 原花青素B1溶液的浓度为70 μg/mL， 儿茶素的浓度为80 μg/mL， 表儿茶素的 浓度为90 μg/mL， 去甲槟榔次碱的浓度为60 μg/mL， 槟榔次碱的浓度为50 μg/mL， 去甲槟榔碱 的浓度为10 0 μg/mL， 氢溴酸槟榔的浓度为80 μg/mL。 8.根据权利要求1所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特征 在于， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱仪的色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱， 色谱柱柱 长为100～150mm， 内径为2.1m m， 填料粒径为1.6～1.8 μm。 9.根据权利要求8所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特征 在于， 所述色谱柱选自CORTE CS T3、 HSS T3或BEH C18。 10.根据权利要求1所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特征 在于， 步骤(2)中， 所述超高效液相色谱仪的流动相： A相为乙腈 或甲醇， B相为用磷酸调pH值 后的十二烷基硫酸钠水溶液， 其质量浓度为0.001～0.060mol/L， pH值为2～4； 所述超高效 液相色谱仪的检测器为 紫外检测器、 蒸发光散射检测器或电雾式检测器。 11.根据权利要求10所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特 征在于， 步骤(2)中， 检测时采用梯度洗脱程序： 0min →14min→20min→35min→40min， A相 的体积百分比： 10％ →18％→25％→35％→35％； 流速： 0.10～0.30mL/min， 柱温： 20～40 ℃， 检测波长： 20 0nm～250nm。 12.根据权利要求11所述基于标准汤剂的槟榔及其炮制品指纹图谱的构建方法， 其特 征在于， 利用超高效液相色谱仪进 行检测时， 流动相： A相为乙腈， B相为用磷酸调pH值至3的 0.002mol/L十二烷基硫酸钠溶液； 流速： 0.15～0.25mL/min， 柱温： 25～35℃， 检测器： 紫外 检测器， 检测波长： 215nm。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115406980 A 213.根据权利要求1所述的构建方法， 其特征在于， 当所述供试品为槟榔时， 槟榔药材的 指纹峰为21个， 槟榔标准汤剂的指纹峰为16个， 槟榔配方颗粒的指纹峰为14个， 其中均有7 个峰与对照品一 致。 14.根据权利要求1所述的构建方法， 其特征在于， 其特征在于， 当所述供试品为炒槟榔 时， 炒槟榔饮片的指纹峰为20个， 炒槟榔标准汤剂的指纹峰为 18个， 炒槟榔配方颗粒的指纹 峰为22个， 其中均有7个峰与对照品一 致。 15.根据权利要求1所述的构建方法， 其特征在于， 当所述供试品为焦槟榔时， 焦槟榔饮 片的指纹峰为19个， 焦槟榔标准汤剂的指纹峰为 17个， 焦槟榔配方颗粒的指纹峰为 19个， 其 中均有7个峰与对照品一 致。 16.权利要求1～15任一项所述构建方法得到槟榔 及其炮制品指纹图谱。 17.根据权利要求16所述的指纹图谱， 其特征在于， 所述指纹图谱中包含原花青素B1、 儿茶素、 表儿茶素、 去甲槟榔次碱、 槟榔次碱、 去甲槟榔碱和槟榔碱的指纹峰。 18.权利要求16或17任一项所述的指纹图谱在槟榔及其炮制品的经典名方的基准样 品、 制剂中间产品或 成品质量评价中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115406980 A 3