(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210980752.3 (22)申请日 2022.08.16 (71)申请人 江阴天江药业有限公司 地址 214429 江苏省无锡市江阴高新区新 胜路1号 (72)发明人 顾超　翟燕娟　张云天　谢佳英　 张宇静　顾芹英　李松　陈盛君　 刘新宇　邵琪　浦香兰　周叶　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 柏尚春 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/54(2006.01)G01N 30/88(2006.01) (54)发明名称 一种用于区分麦冬和山麦冬水提物的色谱 方法 (57)摘要 本发明公开了一种用于区分不同产地麦冬 和不同基原山麦冬水提物的色谱 方法， 包括标准 汤剂的制备、 供试品溶液的制备、 参照物溶液的 制备、 色谱方法的建立、 不同产地及不同伪品的 样品测定及比较、 不同基原 麦冬及伪品的物质基 础研究和待测样品鉴定等步骤。 本发 明通过对麦 冬不同产地、 以及与伪品对比研究成分差别开展 的色谱方法， 采用超高效液相色谱法， 对不同产 地麦冬及不同基原山麦冬标准汤剂进行对比研 究， 对整个麦冬标准汤剂内在品质进行把控， 能 够比较全面地反应麦冬标准汤剂不同产地及伪 品的特征， 可以为麦冬标准汤剂和配方颗粒的内 在质量控制提供新的分析手段， 并达到鉴别不同 产地及伪品山麦冬标准汤 剂和配方颗粒的目的。 权利要求书2页 说明书10页 附图12页 CN 115326963 A 2022.11.11 CN 115326963 A 1.一种用于区分不同产地麦冬和不同基原山麦冬水提物的色谱方法， 其特征在于， 包 括以下步骤： （1） 标准汤剂的制备： 取麦冬饮片， 称定， 加入水浸泡， 煎煮， 趁热过滤， 滤液减压浓缩， 并冷冻干燥， 即得麦冬标准汤 剂； （2） 供试品溶液的制备： 取麦冬标准汤剂， 加有机溶剂提取， 摇匀， 滤过， 取续滤液， 蒸干 后加水溶解， 用水饱和正 丁醇振摇提取并用氨试 液清洗， 蒸干， 定容， 即得 所述供试品溶液； （3） 参照物溶液的制 备： 取麦冬龙脑苷对照品、 麦冬皂苷C对照 品、 麦冬皂苷元 ‑3‑O‑α‑ L‑吡喃鼠李糖基 ‑(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷对照品、 重楼皂苷 Ⅵ对照品和麦冬皂苷D对照 品， 分别加溶剂溶解， 既得 所述参照物溶 液； （4） 色谱方法的建立： 分别吸取所述的参照物溶液和供试品溶液， 注入超高效液相色谱 仪， 测定， 既得所述色谱方法； 所述中超高效液相图谱的洗脱条件为： 以乙腈为流动相A， 以 0.08%甲酸溶 液为流动相B； 采用梯度洗脱； （5） 不同产地及不同伪品的样品测定及比较： 测定川麦冬、 浙麦冬、 伪品湖北麦冬、 伪品 短葶山麦冬标准汤 剂样品， 分别生成对照特 征图谱， 并进行不同产地及伪品的比较 研究； （6） 不同基原麦冬及伪品的物质基础研究： 用液质联用技术， 按照麦冬色谱方法的液相 色谱条件， 采集高分辨质谱 数据， 结合同位数分析推测川麦冬、 浙麦冬、 伪品湖北麦冬、 伪品 短葶山麦冬中化合物的分子式， 然后进行对照品 比对， 对其川麦冬、 浙麦冬特征峰进行归 属， 对湖北麦冬、 短葶山麦冬区别成分进行指认； （7） 待测样品鉴定： a. 若被检测的样品在麦冬龙脑苷对照品相应保留时间无色谱峰或色谱峰峰面积低于 上述对照品的峰面积； 在麦冬皂苷元 ‑3‑O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基 ‑(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷 对照品相应保留时间无色谱峰或色谱峰峰面积低于上述对照品的峰面积， 则被检测样品为 湖北麦冬； b. 若被检测的样品在麦冬龙脑苷对照品相应保留时间存在色谱峰； 在麦冬皂苷元 ‑3‑ O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基 ‑(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷对照品相应保留时间无色谱峰或色谱峰 峰面积低于上述对照品的峰面积， 则被 检测样品为短葶山麦冬； c. 若被检测的样品在麦冬龙脑苷对照品相应保留时间存在色谱峰； 在麦冬皂苷元 ‑3‑ O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基 ‑(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷对照品相应 保留时间存在色谱峰； 在麦冬 皂苷D对照品相 应保留时间无色谱 峰或色谱 峰峰面积低于上述对照品的峰面积， 则被检测 样品为浙麦冬； d. 若被检测的样品在麦冬龙脑苷对照品相应保留时间存在色谱峰； 在麦冬皂苷元 ‑3‑ O‑α‑L‑吡喃鼠李糖基 ‑(1→2)‑β‑D‑吡喃葡萄糖苷对照品相应 保留时间存在色谱峰； 在麦冬 皂苷D对照品相应保留时间存在色谱峰， 则被 检测样品为川麦冬。 2.根据权利要求1所述的用于区分不同产地麦冬和不同基原山麦冬水提物的色谱方 法， 其特征在于， 步骤 （2） 中所述提取溶剂为体积浓度为30 ‑70%的甲醇水溶液， 提取时间为 30‑90分钟， 提取 方式为超声处 理或振摇提取或加热回流。 3.根据权利要求1所述的用于区分不同产地麦冬和不同基原山麦冬水提物的色谱方 法， 其特征在于， 步骤 （2） 中所述水饱和正丁醇 的提取次数为1 ‑2次； 氨试液清洗次数为1 ‑2 次。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115326963 A 24.根据权利要求1所述的用于区分不同产地麦冬和不同基原山麦冬水提物的色谱方 法， 其特征在于， 步骤 （4） 所述超高效液相相色谱的条件为： 色谱柱以十八烷基键合硅胶为 填充剂； 以乙腈为流动相A， 以0.08%磷酸溶液为流动相B， 按以下梯度进行洗脱： 0min ‑4min‑ 7min‑15min‑16min‑19min‑29min‑36min， 流动相A： 23% ‑26%‑33%‑33%‑ 37%‑37%‑49%‑49%； 柱温为35‑45℃； 流速为0.25 ‑0.35ml； 采用电雾式检测器 检测。 5.一种权利要求1 ‑4任一所述的用于区分不同产地麦冬和不同基原山麦冬水提物的色 谱方法在麦冬标准汤 剂和配方颗粒质量检测中的应用。 6.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 能够对不同产地麦冬标准汤剂和配方颗粒 进行区别。 7.根据权利要求5所述的应用， 其特征在于， 能够对麦冬及其伪品山麦冬标准汤剂和配 方颗粒进行区别。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115326963 A 3