(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210992822.7 (22)申请日 2022.08.18 (71)申请人 开封市食品药品检验所 地址 475000 河南省开封市龙亭区金祥路8 号 (72)发明人 葛敏敏　李赵平　董宇　谢晓燕　 (74)专利代理 机构 深圳国联专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 44465 专利代理师 刘兰燕 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/08(2006.01) (54)发明名称 一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测 方法 (57)摘要 本发明公开了一种用于食用植物油中乙基 麦芽酚的检测方法， 包括样品前处理和定量检 测， 所述样品前处理包括以下步骤： Ⅰ、 称取混合 均匀的食用植物油1.00g， 加入1mL二氯甲烷， 涡 旋混匀后， 加入NaOH水溶液5mL， 涡旋30min， 4℃ 条件下4000r/min离心5min后， 取上清液； Ⅱ、 固 相萃取柱经过5mL乙腈、 5mL纯净水依次润洗活 化， 取上清液2.5mL用磷酸调节pH至2～9后注入 固相萃取柱， 待过柱液流出后用5mL水淋洗2次， 弃去淋洗 液， 甲醇洗脱并定容， 滤液过滤， 以进行 净化， 待HPLC ‑MS/MS上样分析。 本发明与现有技 术相比的优点在于： 检测准确、 灵敏度高， 尤其能 有效减少芝麻油的基质效应， 适用范围广。 权利要求书1页 说明书5页 附图2页 CN 115372512 A 2022.11.22 CN 115372512 A 1.一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测方法， 其特征在于： 包括样品前处理和定 量检测， 所述样品前 处理包括以下步骤： Ⅰ、 称取混合均匀的食用植物油1.00g， 加入1mL二氯 甲烷， 涡旋混匀后， 加入0～3％NaOH水溶液5mL， 涡旋30min， 4℃ 条件下4000r/min离心5min 后， 取上清液； Ⅱ、 固相萃取柱经过5mL乙腈、 5mL纯净水依次润洗活化， 取上清液2.5mL用磷 酸调节pH至2～9后注入固相萃取柱， 待 过柱液流出后用5mL水淋洗2次， 弃去淋洗液， 甲醇洗 脱并定容1～5mL， 滤液过滤， 以进行净化， 待HPLC ‑MS/MS上样分析； 所述定量检测 采用电喷 雾电离源正离 子多反应监测模式进行检测， 采用溶剂匹配标准曲线外标法进行定量。 2.根据权利要求1所述的一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测方法， 其特征在于： 所述固相萃取柱采用PLS固相萃取柱。 3.根据权利要求1所述的一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测方法， 其特征在于： 所述NaOH水溶液浓度为1.5％。 4.根据权利要求1所述的一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测方法， 其特征在于： 所述上清液2.5mL用磷酸调节pH 至4～7。 5.根据权利要求1所述的一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测方法， 其特征在于： 所述甲醇洗脱并定容2mL。 6.根据权利要求1所述的一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测方法， 其特征在于： 色谱条件： 色谱柱： Kinetex ‑C18色谱柱(100mmx ‑C18MS， 2.6mm)； 柱温： 40℃； 进样量： 2 μL； 流 动相A： 含1％甲酸的水溶液； 流动相B： 甲醇溶液； 梯度洗脱程序： 0～0.2min， 80％A； 0.2～ 3min， 80％～2 0％A； 3～4min， 2 0％～10％A； 4～4.1min， 10％～80％A； 4.1～9min， 80％A； 流 速： 0.25mL/min； 质谱条件： 离子源： 电喷雾正离子源(ESI+)； 毛细管电压： 3.00kV； 锥孔电 压： 35.00V； 离子源温度： 150℃； 干燥气温度： 500℃； 干燥气流速： 1000L/h(氮气)； 锥孔气流 速： 1L/h(氮气)； 碰撞气： 氩气； 采集模式： 多反应监测(MRM)模式。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115372512 A 2一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及乙基麦芽酚的检测， 具体是指一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检 测方法。 背景技术 [0002]乙基麦芽酚是一种广普的食品添加剂， 具有香味且能达到增香抑菌作用， 在肉制 品、 饼干、 饮料中应用广泛， 有研究表明乙基麦芽酚的过量摄入会对人的肝脏、 肺产生一定 影响。 一些生产厂家 为了使劣质食用油以次充好或达到造假的目的在其中加入乙基麦芽酚 这种香料， GB  2760‑2014食品安全国家标准食品添加剂使用标准中明确规定食用植物油脂 中不得添加任何香精香料， 食用植物油中乙基麦芽酚的非法添加 不仅存在食品安全隐患， 更会损害消费者的经济利益。 [0003]食品中乙基麦芽酚的检测方法有高效液相色谱、 气相色谱、 高效液相色谱串联质 谱法、 气相色谱串联质 谱法， 分光光度法、 光谱法等检测方法等， 研究基质 主要为饮料、 烟 草、 糖果、 肉制品、 饼干、 面包、 乳及乳制品等， 食品中乙基麦芽酚检测的高效液相色谱、 气相 色谱、 气相色谱串 联质谱、 分光光度检测方法的检出限在100～1000 μg/kg范围， 检出限仍处 于较高水平。 由于植物油中的乙基麦芽酚属于违法添加， 其检测方法要求检出限应当尽可 能低， 尽管食品中乙基麦芽酚的检测方法较多， 而植物油中乙基麦芽酚合适的检测方法只 有液相色谱串联质谱方法。 [0004]唐韵熙等在 《分析试验室》 上发表的 《芝麻油、 芝麻调和油中乙基麦芽酚HPLC ‑MS/ MS分析》 一文中建立了食用植物油中乙基麦芽酚检测的液相色谱串联质谱方法， 提取溶剂 为甲醇， 方法定量限为4.0 μg/kg； 陈坤等在 《质量与认证》 上发表的 《固相萃 取—液相色谱串 联质谱法检测食用植物油中乙基麦芽酚的研究》 和宁霄等在 《食品安全质量检测学报》 上发 表的 《超高效液相色谱 ‑串联质谱法同时测定食品中麦芽酚， 乙基麦芽酚， 香兰素， 甲基香兰 素和乙基香兰素》 中建立了食用植物油中乙基麦芽酚检测的固相萃取液相色谱串联质谱方 法， 方法定量限分别为5 μg/kg和4.5 μg/kg， 提取溶剂均为有机试剂， 固相萃取柱分别 为C18 固相萃取小柱和WAX混合型阴离子交换固相萃取柱， 其提取净化过程操作较为复杂。 目前， 食用植物油中乙基麦芽酚暂无国标检测方法， 目前的国家抽检按照市场监督管理局发布的 补充方法 《食用植物油中乙基麦芽酚的测定》 (BJS201708)进行测定， 该方法与唐韵熙等 《芝 麻油、 芝麻调和油中乙基麦芽酚HPLC ‑MS/MS分析》 中较为一致， 没有净化步骤对仪器污染较 大。 发明内容 [0005]本发明要解决的技术问题是克服以上技术缺陷， 提供一种检测准确、 灵敏度高， 尤 其能有效减少芝麻油的基质效应， 适用范围广的一种用于食用植物油中乙基麦芽酚的检测 方法。 [0006]为解决上述技术问题， 本发明提供的技术方案为： 一种用于食用植物油中乙基麦说　明　书 1/5 页 3 CN 115372512 A 3