(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210983444.6 (22)申请日 2022.08.16 (71)申请人 华南农业大 学 地址 510642 广东省广州市天河区五山路 483号 (72)发明人 韦晓群　孙琳媛　王志元　曾广丰　 邱健　陈敏丹　雷红涛　孙远明　 (74)专利代理 机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 专利代理师 苏友云 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/72(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 一种皂角的鉴别模型及其建立方法应用 (57)摘要 本发明属于农作物品种鉴定技术领域， 具体 涉及一种皂角的鉴别模型及其建立方法应用。 本 发明采用甲醇提取皂角米具有较好的提取效果， 能够提取鉴别得到14种活性 成分， 进一步将甲醇 提取所得活性成分的LC ‑Q‑TOF检测数据模拟建 立鉴别模型， 得到的模型对于皂角品种的鉴别准 确率可达 到100％。 权利要求书2页 说明书11页 附图1页 CN 115389657 A 2022.11.25 CN 115389657 A 1.一种鉴别皂角品种模型的建立方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 先将皂角前处理所得皂角米用甲醇摇床提取10～30min， 将提取物用LC ‑Q‑TOF/MS进行 检测得到每个成分的色谱峰面积， 再用OPLS ‑DA对色谱峰面积分析得到VIP值， 用VIP值大于 1对应成分 的色谱峰面积用SPSS26软件建立模型， 过程为： 将皂角米的品种作为分组变量， 分组变量的范围为1～3， VIP值大于1对应的成分及其峰面积数据作为 自变量， 描述设置为 平均值、 单变量ANOVA和Box ’s M三项， 矩阵设置为组内相关性和组内协方差， 函数系数设置 为Fisher； 在分类选项中， 先验概率设置为所有组相等， 使用协方差矩阵设置为分组； 最终 通过预测组成员和判别得分， 得到分类函数系 数表， 将函数系 数表整理成方程即得鉴别皂 角品种的模型。 2.根据权利要求1所述建立方法， 其特 征在于， 所述 LC‑Q‑TOF/MS中液相色谱的条件为： 色谱柱： Waters  BEH C18： 流动相： 流动相A为0.1～0.15％V/V甲酸， 流动相B为乙腈； 梯度洗脱： 0～20min， 5％～90％B； 20～25min， 90％～100％B； 25～43min， 100％B； 43～ 44min， 100 ％～5％B； 44～50min， 5 ％B或0～ 10min 5％～90％B， 10～ 13min 90％‑～100％ B， 13～17mi n 100％B， 17～17.5mi n 100％～5％B， 17.5～ 20min 5％B。 流速： 0.2 ～0.8mL/mi n； 进样量： 4～6 μL； 柱温38～45℃。 3.根据权利要求1所述建立方法， 其特征在于， 所述LC ‑Q‑TOF/MS中四级杆飞行时间质 谱的条件为： 正离子模式进样量 4～6 μL； 负离子模式进样量15～ 25 μL； 柱温35～45℃； 接口方式： ESI和APCI复合源； 一级TOF‑MS扫描准确质量范围5 0～2500Da， 数据采集时间80～10 0ms； 二级IDA‑MS扫描准确质量范围5 0～2500Da， 高灵敏模式， 数据采集时间40～6 0ms； 信号阈值： 80～10 0cps。 4.根据权利要求1所述建立方法， 其特征在于， 所述VIP值大于1所对应成分的色谱峰面 积为Triac anthine的色谱峰面积， Locustoside  A的色谱峰面积， Locustoside  B的色谱峰 面积。 5.根据权利要求1所述建立方法， 其特征在于， 所述皂角米与甲醇的质量体积比为： 0.1g:(1～ 2)ml。 6.根据权利要求1所述建立方法， 其特 征在于， 所述摇床提取的时间为10～ 20min。 7.一种鉴别皂角品种的模型， 其特 征在于， 由权利要求1～6任一所述建立方法得到 。 8.根据权利要求7 所述模型， 其特 征在于， 所述模型如下： yGS＝‑0.005*X1‑9.733*10‑5*X2‑28.077          (1) yGJ‑d＝0.113*X1+0.003*X2‑0.001X3‑459.274      (2) yGJ＝1.050*X1+0.005*X2‑0.003*X3‑4045.087     (3) 其中GS为皂 荚， GJ‑d为山皂荚变种， GJ为山皂 荚， X1为Triacanthine的色谱峰面积， X2为权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115389657 A 2Locustoside  A的色谱峰面积， X3为Locustoside  B的色谱峰面积。 9.一种鉴别皂角品种的方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： 将待测皂角用LC ‑Q‑TOF进行检测， 得到Triacanthine的色谱峰面积， Locustoside  A的 色谱峰面积， Locustosi de B的色谱峰面积， 将其代入权利要求7或8所述模型中计算， 所得 最大数值对应的y就是 该类皂角米。 10.权利要求7或8所述模型或权利要求9所述方法在鉴别皂角品种中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115389657 A 3