(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210947615.X (22)申请日 2022.08.09 (71)申请人 成都普康生物科技有限公司 地址 610000 四川省成 都市新津 县工业园 区A区青年 （大 学生） 创业园 (72)发明人 舒娟　徐春梅　吴涛　牟心　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 专利代理师 覃蛟 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/34(2006.01) (54)发明名称 一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离 检测方法 (57)摘要 本发明公开了一种索马鲁肽修饰剂中同系 物杂质的分离检测方法， 涉及医药中间体分析技 术领域。 采用高效液相色谱仪对 供试品溶液进行 检测， 利用流动相A和流动相B按不同的比例混合 作为流动相进行梯度洗脱， 利用面积归一化法计 算杂质含量； 其中， 流动相A是由磷酸盐缓冲液和 乙腈混合而得； 流动相B是利用磷酸盐缓冲液、 乙 腈和水混合而得； 用于配置流动相A和流动相B的 所述磷酸 盐缓冲液的pH值为3.5～5.0。 利用高效 液相色谱 方法， 通过优化色谱条件和洗脱条件能 够在较短的时间内将索马鲁肽修饰剂中同系物 杂质进行有效分离， 具有较好的专属性和精密 度， 有利于控制终产品的质量。 权利要求书1页 说明书7页 附图3页 CN 115326956 A 2022.11.11 CN 115326956 A 1.一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法， 其特征在于， 包括： 采用高效液 相色谱仪对供试品溶液进 行检测， 利用流动相A和流动相B 按不同的比例混合作为流动相进 行梯度洗脱， 利用面积归一 化法计算杂质含量； 其中， 所述 流动相A是由磷酸盐缓冲液和乙腈混合而得； 所述流动相B是利用磷酸盐缓冲液、 乙腈和水混合而得； 用于配置所述 流动相A和所述 流动相B的所述磷酸盐缓冲液的pH值 为3.5～5.0 。 2.根据权利要求1所述的分离检测方法， 其特征在于， 所述流动相A的制备过程包括： 将 所述磷酸盐缓冲液和乙腈混合， 过 滤， 所述磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为17～ 21:1。 3.根据权利要求1所述的分离检测方法， 其特征在于， 所述流动相B的制备过程包括： 将 所述磷酸盐缓冲液、 乙腈和水混合， 过滤， 所述磷酸盐缓冲液、 乙腈和水的体积比为0.8～ 1.2:7～9:1。 4.根据权利要求1所述的分离检测方法， 其特征在于， 用于配置所述流动相A和所述流 动相B的所述磷酸盐缓冲液的制备过程包括： 将磷酸二氢盐和水混合， 用磷酸调节pH值为 3.5～5.0； 优选地， 在制备所述磷酸盐缓冲液的过程中， 所述磷酸二氢盐为磷酸二氢钾， 每1L水对 应所述磷酸 二氢钾的用量 为4.0g～4.3g。 5.根据权利要求1 ‑4中任一项所述的分离检测方法， 其特 征在于， 洗脱程序如下： 当时间为0.0min时， 混合流动相中流动相A的体积分数为50 ‑70％， 流动相 B的体积分数 为30‑50％； 当时间为10.0min时， 混合流动相中流动相A的体积分数为25 ‑30％， 流动相B的体积分 数为70‑75％； 当时间为20.0min时， 混合流动相中流动相A的体积分数为10 ‑20％， 流动相B的体积分 数为80‑90％； 当时间为55.0min时， 混合流动相中流动相A的体积分数为10 ‑20％， 流动相B的体积分 数为80‑90％。 6.根据权利要求1所述的分离检测方法， 其特征在于， 所述供试品溶液是将待测样品与 稀释剂混合， 控制待测样品在所述供 试品溶液中的浓度为1mg/mL～3mg/mL； 其中， 所述待测样品中含有索马鲁肽修饰剂X6及同系物， 所述同系物包括C14、 C15、 C16、 C17、 C19和C20衍 生物。 7.根据权利要求6所述的分离检测方法， 其特 征在于， 所述稀释剂为乙腈或甲醇。 8.根据权利 要求1所述的分离检测方法， 其特征在于， 色谱条件： 柱温为45℃～55℃， 流 速为0.9mL/mi n～1.1mL/mi n， 检测波长为20 0nm～220nm， 进样量 为15 μL～ 25 μL。 9.根据权利要求8所述的分离检测方法， 其特征在于， 所采用的色谱柱为Agilent   Poroshel l 120EC‑C18。 10.根据权利要求9所述的分离检测方法， 其特征在于， 色谱柱的长度为90mm～120mm， 内径为4mm～5mm， 填料粒径为2 μm～3 μm， 所述色谱柱的填料是由1.5 μm ‑2.0 μm直径的实心核 和0.3 μm‑0.7 μm厚的多孔外层构成的小粒径填料； 或， 所述色谱柱的填料为 亚2微米全多孔 填料。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115326956 A 2一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及医药中间体分析技术领域， 具体而言， 涉及一种索马鲁肽修饰剂中同 系物杂质的分离检测方法。 背景技术 [0002]索马鲁肽(sem aglutide)(别名： 索玛鲁肽、 司美格鲁肽)是由丹麦诺和诺德公司开 发的新一代GLP ‑1(胰高血糖素样肽 ‑1)类似物， 索马鲁肽是基于利拉鲁肽基本结构而开发 的长效剂型， 其治疗2型糖尿病的效果更好。 是继艾塞那肽、 利拉鲁肽、 阿比鲁肽、 度拉糖肽、 利司那肽、 贝那鲁肽(中 国批准)之后， 全球第7个上市的GLP ‑1受体激动剂， 也是全球第三款 长效GLP‑1周制剂。 [0003]在索马鲁肽的生产过程中， 修饰剂的中的杂质情况尤其是同系物会影响最终产品 的品质， 若能够 在短时间内检测修饰剂中的杂质情况， 对于控制终产品的质量至关重要。 [0004]鉴于此， 特提出本发明。 发明内容 [0005]本发明的目的在于提供一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法， 能够 在较短时间内检测修饰剂X6的杂质情况， 从而控制终产品的质量， 具有良好的专属 性和精 密度。 [0006]本发明是这样实现的： [0007]第一方面， 本 发明提供一种索马鲁肽修饰剂中同系物杂质的分离检测方法， 包括： 采用高效液相色谱仪对供试品溶液进 行检测， 利用流动相A和流动相B 按不同的比例混合作 为流动相进行梯度洗脱， 利用面积归一 化法计算杂质含量； [0008]其中， 流动相A是由磷酸盐缓冲液和乙腈混合而得； [0009]流动相B是利用磷酸盐缓冲液、 乙腈和水混合而得； [0010]用于配置流动相A和流动相B的磷酸盐缓冲液的pH值 为3.5～5.0 。 [0011]在可选的实施方式中， 流动相A的制备过程包括： 将磷酸盐缓冲液和乙腈混合， 过 滤， 磷酸盐缓冲液和乙腈的体积比为17～ 21:1。 [0012]在可选的实施方式中， 流动相B的制备过程包括： 将磷酸盐缓冲液、 乙腈和水混合， 过滤， 磷酸盐缓冲液、 乙腈和水的体积比为0.8～1.2:7～ 9:1。 [0013]在可选的实施方式中， 用于配置流动相A和流动相B的磷酸盐缓冲液的制备过程包 括： 将磷酸 二氢盐和水混合， 用磷酸调节pH值 为3.5～5.0； [0014]优选地， 在制备磷酸盐缓冲液的过程中， 磷酸二氢盐为磷酸二氢钾， 每1L水对应磷 酸二氢钾的用量 为4.0g～4.3g。 [0015]在可选的实施方式 中， 洗脱程序如下： [0016]当时间为0.0min时， 混合流动相中流动相A的体积分数为50 ‑70％， 流动相B的体积 分数为30‑50％；说　明　书 1/7 页 3 CN 115326956 A 3