(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210913324.9 (22)申请日 2022.07.28 (71)申请人 江阴天江药业有限公司 地址 214429 江苏省无锡市江阴高新区新 胜路1号 (72)发明人 顾芹英　何雪霞　何一萍　翟燕娟　 张云天　张宇静　周海琴　胡剑虹　 (74)专利代理 机构 南京苏高专利商标事务所 (普通合伙) 32204 专利代理师 叶江栩 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/54(2006.01) G01N 30/74(2006.01)G01N 30/88(2006.01) (54)发明名称 一种芦根药 材指纹图谱的建立方法 (57)摘要 本发明公开了一种芦根药材指纹图谱的建 立方法， 通过超高效液相色谱法建立指纹图谱， 以对羟基苯甲酸和对香豆酸为对照峰， 通过优化 的检测方法， 对芦根药材进行较为全面地质量监 测。 本发明方法操作简单， 重现性好， 准确可靠， 节约时间， 为芦根药材的内在质量控制提供了一 种新的分析手段。 权利要求书1页 说明书14页 附图8页 CN 115389652 A 2022.11.25 CN 115389652 A 1.一种芦根药 材指纹图谱的建立方法， 其特 征在于， 包 含以下步骤： (1)取芦根药 材制备得到供试品溶液； (2)取对羟基苯甲酸和对香豆酸对照品制备 得到对照品溶 液； (3)用超高效液相色谱仪分别检测供试品溶液和对照品溶液， 分别得到供试品溶液和 对照品溶 液的色谱图； (4)将供试品溶液和对照品溶液的色谱图进行对比， 从供试品溶液的超高效液相色谱 图中选择共有峰， 构建芦根药 材的超高效液相色谱指纹图谱。 2.根据权利要求1所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于： 步骤(3)中超高 效液相色谱仪检测时色谱条件为： 十八烷基键合硅胶色谱柱， 流动相A： 乙腈、 流动相B： 0.1％甲酸溶 液或水， 按以下的洗脱梯度进行洗脱： 检测波长： 2 20nm或25 5nm； 流速： 0.25～0.3 5ml/min； 柱温： 3 5～45℃。 3.根据权利要求1所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于： 所述芦根药材的 超高效液相色谱指纹图谱包含10个共有峰， 以6号峰作为参照峰， 各共有峰 的相对保留时间 如下： 1号峰： 0.47； 2号峰： 0.59； 3号峰： 0.64； 4号峰： 0.78； 5号峰： 0.9 0； 6号峰： 1.00； 7号峰： 1.12； 8号峰： 1.31； 9号峰： 1.9 9； 10号峰： 2.0 3。 4.根据权利要求1所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于： 所述步骤(1)的 供试品溶液的制备包括溶剂提取、 水饱和乙酸乙酯萃取和甲醇溶解。 5.根据权利要求4所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于： 所述溶剂提取中 以水为溶剂， 25ml/2g供 试品用量溶解， 提取 方式为加热回流， 提取时间为6 0～120分钟。 6.根据权利要求1所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于： 所述步骤(2)中 对照品溶 液的浓度为： 对羟基苯甲酸3 μg/ml， 对香豆酸 40 μg/ml。 7.根据权利要求1所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于： 所述步骤(3)中 供试品溶液和对照品溶 液的检测进样量 为2 μL。 8.根据权利要求2所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于： 所述十八烷基键 合硅胶色谱柱包 括： SB‑AQ， Agilent， 2.1 ×100mm， 1.8 μm、 SB ‑C18， Agilent， 100 ×2.1mm， 1.8 μm、 COTE CS UPLC T3， Waters， 2.1 ×100mm， 1.6 μm。 9.根据权利要求1所述的芦根药材指纹图谱的建立方法， 其特征在于， 还包括： (5)将待 测的供试品溶液按照步骤(3)的进样检测， 以对羟基苯 甲酸和对香豆酸的总含量作为含量 指标成分， 对芦根药 材进行质量分析。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115389652 A 2一种芦根药材指纹图谱的建立方 法 技术领域 [0001]本发明涉及一种芦根指纹图谱的建立方法， 尤其涉及一种快速、 可靠 的芦根药材 的指纹图谱建立方法。 背景技术 [0002]芦根为禾本科植物芦苇Phragmites  communis  Trin.的新鲜或者干燥根茎。 芦根 性寒味甘， 具有清热泻火、 生津止渴、 除烦、 止呕、 利尿的功效， 主要用于治疗热病烦渴、 肺热 咳嗽、 肺痈吐脓、 胃热呕吐、 热淋涩痛等症。 现代临床研究中， 芦根做为一种常用中药之一， 亦可作为食材， 具有解热镇痛、 清热生津的作用， 常用于治疗 大叶性肺炎、 萎缩性胃炎、 糖尿 病、 肾结石、 食管反流 性哮喘、 痤疮以及便 秘等疾病。 [0003]芦根在中国有两个品种及一个变种， 分布甚广， 主产于江苏、 浙江、 安徽、 湖北等 地， 以华东地区产量最大。 不同产地、 采收时间及品种的芦根 都存在较大差异。 因此， 建立一 种全面、 快速、 客观评价其内在质量的方法至关重要。 中药指纹图谱作为一种综合的， 可量 化的鉴定手段， 可用于评价中药材、 中药制剂以及半成品的质量， 是对中药整体质量控制的 手段， 能够系统、 整体、 专属地来表征中药的内在指纹， 已作为一种有效评价中药质量的方 法被世界卫生组织所接受。 [0004]目前为止， 已有文献报道芦根提取物的HPLC的指纹图谱研究， 但未对芦根药材进 行指纹图谱研究， 也未 见芦根药 材指纹图谱与含量测定相结合的质量分析 方法。 发明内容 [0005]发明目的： 本发明的目的是为芦根药材的内在质量控制提供一种快速、 可靠 的指 纹图谱的建立方法。 [0006]技术方案： 本发明所述的芦根药 材指纹图谱的建立方法， 包 含以下步骤： [0007](1)取芦根药 材制备得到供试品溶液； [0008](2)取对羟基苯甲酸和对香豆酸制备 得到对照品溶 液； [0009](3)用超高效液相色谱仪分别检测供试品溶液和对照品溶液， 分别得到供试品溶 液和对照品溶 液的色谱图； [0010](4)将供试品溶液和对照品溶液的色谱图进行对比， 从供试品溶液的超高效液相 色谱图中选择共有峰， 构建芦根药 材的超高效液相色谱指纹图谱。 [0011]进一步地， 步骤(3)中超高效液相色谱仪检测时色谱条件为： 十八烷基键合硅胶色 谱柱， 流动相A： 乙腈、 流动相B： 0.1％甲酸溶 液或水， 按以下的洗脱梯度进行洗脱：说　明　书 1/14 页 3 CN 115389652 A 3