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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210624301.6 (22)申请日 2022.06.02 (71)申请人 周溪桥 地址 150000 黑龙江省哈尔滨市南岗区极 乐三道街16号5 01室 (72)发明人 周溪桥  (51)Int.Cl. C12N 5/074(2010.01) C12M 3/00(2006.01) C12M 1/00(2006.01) C12M 1/22(2006.01) (54)发明名称 一种干细胞培 养工艺 (57)摘要 本发明涉及干细胞培养领域, 更具体的说是 一种干细胞培养工艺。 工艺包 括: S1: 将细胞冻存 管从液氮中取出, 置于37℃水浴中融解, 取出后 用酒精擦拭冻存管旋口及外壁; S2: 将冻存管内 细胞悬液转移至培养液的离心管内, 离心4min; S3: 离心后将上清液吸除, 另加入新鲜的培养液; S4: 在培养装置上加入培养液, 然后将离心管内 的干细胞转移至培养装置上培养。 所述培养装置 包括培养皿、 V形件和底条, 培养皿的下侧固定连 接有V形件, V形件的下端固定连接有两个底条。 可以将离心管内的干细胞转移至培养装置上培 养, 培养装置可以将干细胞均匀摊平。 权利要求书1页 说明书3页 附图10页 CN 114752553 A 2022.07.15 CN 114752553 A 1.一种干细胞培 养工艺, 其特 征在于, 包括以下步骤: S1: 将细胞冻存管从液氮中取出, 置于37℃水浴中融解, 取出后用酒精擦拭冻存管旋口 及外壁; S2: 将冻存管内细胞 悬液转移至 培养液的离心管内, 离心4mi n; S3: 离心后将上清液吸除, 另加入新鲜的培 养液; S4: 在培养装置上加入培 养液, 然后将离心管内的干细胞转移至 培养装置上培 养。 2.根据权利要求1所述的一种干细胞培 养工艺, 其特 征在于: 所述S1中使用75%酒精。 3.根据权利要求1所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述S2中离心速度为 1200rpm。 4.根据权利要求1所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述培养装置包括培养皿 (101)、 V形件(105)和底条(106), 培养皿(101)的下侧固定连接有V形件(105), V形件(105) 的下端固定连接有两个底条(10 6)。 5.根据权利要求4所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述培养装置还包括缺口 (103)和橡胶块(201), 培养皿(101)的一侧设置有缺口(103), 橡胶块(201)插在缺口(103) 处。 6.根据权利要求5所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述培养装置还包括侧翼 (202), 橡胶块(201)上一体成型有两个侧翼(202), 两个侧翼(202)均位于培养皿(101)的内 侧。 7.根据权利要求6所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述培养装置还包括圆杆 (102)、 连接柱(104)、 插槽(2 03)和座块(205), 培养皿(101)上通过两个连接柱(104)连接有 圆杆(102), 圆杆(102)位于缺口(103)的前侧, 橡胶块(201)的外端固定连接有座块(205), 座块(205)的下侧设置有插槽(203), 插槽(203)的远离培养皿(101)侧为斜面, 圆杆(102)位 于插槽(20 3)处。 8.根据权利要求7所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述培养装置还包括卡槽 (204), 插槽(20 3)的斜面处设置有卡槽(204), 圆杆(102)位于卡槽(204)内。 9.根据权利要求8所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述培养装置还包括固定 套(107)、 固定轴(301)、 连接块(302)和弧形杆(304), 培养皿(101)的左右两侧均设置有固 定套(107), 两个连接块(302)分别插在两个固定套(107)上, 插销穿过连接块(302)和固定 套(107)进而将连接块(302)和固定套(107)之间固定, 两个固定轴(301)分别固定连接在两 个连接块(3 02)的外侧, 两个弧形 杆(304)分别固定连接在两个固定轴(3 01)的外端。 10.根据权利要求9所述的一种干细胞培养工艺, 其特征在于: 所述培养装置还包括横 杆(401)、 条形槽(403)和侧架(405), 横杆(401)的左右两端均固定连接有侧架(405), 两个 侧架(405)的上侧均设置有条形槽(403), 两个弧形杆(304)分别放置在两个条形槽(403) 处。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 114752553 A 2一种干细胞培养工艺 技术领域 [0001]本发明涉及干细胞培 养领域, 更 具体的说是一种干细胞培 养工艺。 背景技术 [0002]干细胞具有针对适当信号作出响应, 自我更新或分化为多种类型细胞的独特能 力。 这些特性使得干细胞具有强大的组织修复、 置换和再生能力, 在人类干细胞在医学研究 中备受关注。 胚胎干细胞可分化的细胞类型更多。 多种体内因子可触发分化, 其中部 分可在 体外干细胞培养时被复制。 在培养干细胞时, 干细胞溶液容易不均匀分布在培养基上, 这样 干细胞在生长时会在培养皿内不均匀地分布, 因此需要解决干细胞溶液容易不均匀分布在 培养基上的问题。 发明内容 [0003]为克服现有技术的不足, 本发明提供一种干细胞培养工艺, 其有益效果为可以将 离心管内的干细胞转移至 培养装置上培 养, 培养装置可以将干细胞均匀摊平。 [0004]一种干细胞培 养工艺, 包括以下步骤: [0005]S1: 将细胞冻存管从液氮中取出, 置于37℃水浴 中融解, 取出后用酒精擦拭冻存管 旋口及外壁; [0006]S2: 将冻存管内细胞 悬液转移至 培养液的离心管内, 离心4mi n; [0007]S3: 离心后将上清液吸除, 另加入新鲜的培 养液; [0008]S4: 在培养装置上加入培 养液, 然后将离心管内的干细胞转移至 培养装置上培 养。 [0009]所述S1中使用75%酒精。 [0010]所述S2中离心速度为120 0rpm。 [0011]所述培养装置包括培养皿、 V形件和底条, 培养皿的下侧固定连接有V形件, V形件 的下端固定连接有两个底条。 附图说明 [0012]下面结合附图和具体实施方法对本发明做进一 步详细的说明。 [0013]图1为一种干细胞培 养工艺的流 程图; [0014]图2为培养装置的结构示 意图一; [0015]图3为培养装置的结构示 意图二; [0016]图4为培养装置的结构示 意图三; [0017]图5为培养皿的结构示 意图一; [0018]图6为培养皿的结构示 意图二; [0019]图7为橡胶块的结构示 意图一; [0020]图8为橡胶块的结构示 意图二; [0021]图9为固定轴的结构示 意图一;说 明 书 1/3 页 3 CN 114752553 A 3

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