(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210658251.3 (22)申请日 2022.06.12 (71)申请人 内蒙古溢多利生物科技有限公司 地址 010206 内蒙古自治区呼和浩特市托 克托县工业园区 (72)发明人 程礼海　汪东武　朱报常　颜学锋　 贺翠荣　 (51)Int.Cl. C12N 9/24(2006.01) C12N 1/16(2006.01) C12N 9/96(2006.01) C12M 1/34(2006.01) C12M 1/36(2006.01) C12M 1/38(2006.01) C12M 1/00(2006.01) A23K 20/189(2016.01)C12R 1/84(2006.01) (54)发明名称 一种木聚糖酶的制备方法 (57)摘要 本发明属于发酵技术领域， 提出了一种木聚 糖酶的制备方法， 将生产木聚糖酶的种子液按照 6‑8％的接种量接种至发酵培养基中在发酵罐中 进行发酵培养， 培养温度28 ‑30℃， 培养140 ‑ 160h， 补料培养， 得到发酵液； 将发酵液中菌丝体 进行过滤、 超滤浓缩除盐， 得到粗酶液； 粗酶液经 添加载体稳定化处理形成喷雾料浆后进行喷雾 干燥， 得到木聚糖酶固体酶制剂。 本发明解决了 现有技术中毕赤酵母工程菌株发酵生产木聚糖 酶存在的酶的产率、 酶活低、 生产成本高， 以及喷 雾干燥温度难于控制影响产品 品质的问题。 权利要求书2页 说明书7页 CN 114891769 A 2022.08.12 CN 114891769 A 1.一种木聚糖酶的制备 方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)制备发酵 液 将生产木聚糖酶种子液按照6 ‑8％的接种量接种至发酵培养基中在发酵罐中进行发酵 培养， 培养温度28 ‑30℃， 培养140‑160h， 补料培 养， 得到发酵 液； (2)制备粗酶液 将发酵液中菌丝体进行 过滤、 超滤浓 缩除盐， 得到粗酶液； (3)稳定化干燥 粗酶液经添加载体稳定化处理形成喷雾料浆后进行喷雾干燥得到木聚糖酶固体酶制 剂。 2.根据权利要求1所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(1)中， 所述 发酵培养工艺控制参数为： 培养温度30℃、 罐压0.05MPa、 PH值4.5 ‑5.0、 转速140 ‑150rpm、 通 风比1.0:1、 溶 氧控制20％、 补料量5 0％、 培养周期15 6h。 3.根据权利要求1所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(1)中， 所述 发酵培养还包括流加含生物素的氨水或者甲醇进行诱 导培养产生木聚糖酶。 4.根据权利要求1所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述发酵培养基包 括： 葡萄糖25 ‑35份， 蛋白胨5 ‑10份， 磷酸二氢钾1 ‑2份， 七水合硫酸镁0.5 ‑1份， 氯化钾0.5 ‑1 份， 水900‑1000份。 5.根据权利要求1所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(1)中， 所述 种子液的制备方法包括： 将生产木聚糖 酶的摇瓶种子接种到一级种子培养基上进 行一级种 子培养获得一级种子， pH控制4.5 ‑5.0， 然后将一级种子接种到二级种子培养基进 行二级种 子培养， pH控制4.5 ‑5.0； 种子经 过两级扩培， 湿重 达到70克/升后形成所述种子液。 6.根据权利要求5所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述一级种子培养条 件为： 温度30℃、 罐压0.05MPa、 PH值4.5 ‑5.0、 转速300rpm、 通风比1.5:1、 接种量1％、 培养周 期24h。 7.根据权利要求5所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述二级种子培养条 件为： 温度30℃、 罐压0.05MPa、 PH值4.5 ‑5.0、 转速200rpm、 通风比1.5:1、 接种量10％、 培养 周期16h。 8.根据权利要求1 ‑7任一项所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述步骤 (3)中， 所述稳定化处理为粗酶液进入配料罐， 向粗酶液中加入包含酶保护剂的辅助料， 按 喷雾料浆质量百分比计， 所述辅助料包括： 玉米淀粉10 ‑15％、 微晶纤维素2 ‑4％、 保护剂 0.5‑2％、 载体1 ‑3％。 9.根据权利要求1 ‑7任一项所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述步骤 (3)中， 所述喷雾干燥在酶制剂恒温喷雾干燥系统中进 行， 所述酶制剂恒温喷雾干燥系统包 括料浆喷雾干燥塔和控制器； 所述料浆喷雾干燥塔在顶端的进风口接收热风并用于对喷雾 料浆进行干燥； 所述控制器通过设置于所述料浆喷雾干燥塔顶端内壁上温度传感器采集的 实时温度生成调节指 令调节所述热风的温度和/或风量以使 所述料浆喷雾干燥塔内保持温 度相对恒定 。 10.根据权利要求9所述的一种木聚糖酶的制备方法， 其特征在于， 所述控制器根据所 述温度传感器采集的实时温度， 并结合所述进风温度上次及历史调节指令， 确定下次调节权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114891769 A 2指令调整的方向和幅度； 所述控制器包括恒温决策算法： 1)温度传感器采集实时温度， 控制器接收并对温度数据进行诊断， 去除无效数据； 2)控制器通过最优化自回归数据处理算法获取对下次热风温度设定值的估计， 消除对 延时带来的误差的影 响； 其模型为： Ta＝Tk+(ΔT k‑1+ΔT k‑2)/2； 其中， Ta为下次热风温度调 节设定值， Tk为当前温度值， ΔT  k‑1和ΔT k‑2分别为历史上最近两次温度设定值调节幅度 变化矢量 值， 其计算公式为下次设定温度值减去上次设定温度值， 对温度设定值进行修 正。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114891769 A 3