(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211194197.8 (22)申请日 2022.09.28 (71)申请人 普研 （上海） 标准 技术服务有限公司 地址 201318 上海市浦东 新区芙蓉花路5 00 弄12号、 14.15号 一层 (72)发明人 程江闯　李庆　段文锋　赵红峰　 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/30(2006.01) G01N 30/32(2006.01) G01N 30/34(2006.01) G01N 30/72(2006.01) (54)发明名称 一种牛肉中敌草隆残留量的测定方法 (57)摘要 本发明公开了一种牛肉中敌草隆残留量的 测定方法， 包括如下步骤： (1)取待测样品， 加入 水及均质子进行均质， 得均质液； 向所述均质液 中加入乙酸乙腈溶液， 涡旋。 加入氯化钠、 乙酸 钠， 震荡， 离心， 得第一上清液； 向所述第一上清 液中加入中性氧化铝、 C18粉末、 硫酸镁， 震荡， 离 心， 得第二上清液； 将第二上清液过滤膜， 得待测 样液； (2)取空白基质样品按 步骤(1)处理得到空 白基质提取液； 用所述空白基质提取液将敌草隆 标准溶液稀释成基质标准工作溶液系列； (3)将 所述待测样液和基质标准工作溶液系列进行液 相色谱‑质谱分离测定； (4)根据基质标准曲线法 定量。 本发明适用于牛肉中敌草隆残留量的测 定， 方法简单 快速， 灵敏度高， 定量 准确。 权利要求书2页 说明书5页 附图2页 CN 115452999 A 2022.12.09 CN 115452999 A 1.一种牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特 征在于， 包括如下步骤： (1)样品前处 理： 取待测样品2g， 加入水5ml及陶瓷均质子一个， 均质1min。 再用5ml水冲洗均质器二次均 质， 合并均质液； 向所述均质液中加入乙酸乙腈溶液10 ml， 涡旋震荡2min。 加入氯化钠2g、 乙 酸钠1g， 迅速 激烈震荡2mi n， 4000r/min冷冻离心5mi n， 得第一上清液； 向所述第一上清 液中加入中性氧化铝、 C18粉末、 硫酸镁， 迅速激烈震荡2min， 4000r/min 冷冻离心 2min， 得第二上清液； 将第二上清液 过0.22 μm有机滤膜， 得待测样液； (2)基质标准工作溶 液系列： 取空白基质样品按步骤(1)处 理得到空白基质提取 液； 用所述空白基质提取 液将敌草隆标准溶 液稀释成基质标准工作溶 液系列； (3)液相色谱 ‑质谱测定： 将所述待测样液和基质标准工作溶 液系列进行 液相色谱 ‑质谱分离测定； (4)根据基质标准曲线法定量计算牛肉中敌草隆的残留量。 2.根据权利要求1所述的牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特征在于， 所述步骤(1) 中乙酸乙腈溶 液中乙酸与乙腈的体积比为1:9 9。 3.根据权利要求1所述牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特征在于， 所述步骤(1)中 中性氧化铝加入量 为150mg， 所述C18粉末加入量 为150mg， 所述硫酸镁加入量 为900mg。 4.根据权利要求1所述的牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特征在于， 所述步骤(2) 中基质标准工作溶 液系列的质量浓度分别为2、 5、 10、 20、 5 0、 100 μg/L。 5.根据权利要求1所述的牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特征在于， 步骤(3)中的 液相色谱条件如下： a)色谱柱： ZORBAX  Eclipse XDB‑C18(100mm×2.1mm， 1.8 μm)或者 性能相当； b)柱温： 3 0～40℃(优选40℃)； c)流动相： A为0.1％(体积百分比， 下同)甲酸水 溶液(含5mmol/L乙酸铵)， B为乙腈； d)流速： 0.3～0.4mL/mi n(优选0.4mL/mi n)； e)进样量： 2 ～5 μL(优选2 μL)； f)洗脱方式： 梯度洗脱。 6.根据权利要求5所述牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特征在于， 所述梯度洗脱程 序为： 初始流动相B为10％(体积百分比)， 保持0.5min； 0.5～3.0min， B由10％升至95％， 保 持1min； 4.0～4.1mi n， B由95％降至10％， 保持到 6min。 7.根据权利要求1所述牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特征在于， 所述步骤(3)中 的质谱条件如下： a)电喷雾 离子源(ESI)； b)正离子扫描方式； c)多反应监测(MRM)模式； d)喷雾电压： 45 00～5500V(优选5500V)； e)喷雾气流 量： 200～600 μL/min(优选600 μL/min)； f)离子源温度： 40 0～550℃(优选 550℃)；权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115452999 A 2g)敌草隆定量离子对m/z＝233.0/72.0,定性离子对m/z＝233.0/46.0,去簇电压均为 80eV， 碰撞电压分别为 40eV和35eV。 8.根据权利要求1所述牛肉中敌草隆残留量的测定方法， 其特征在于， 所述测定方法的 检出限是10 μg/kg。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115452999 A 3