(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202211128832.2 (22)申请日 2022.09.16 (71)申请人 江苏嘉逸医药有限公司 地址 226000 江苏省南 通市经济技 术开发 区通旺路2 9号 (72)发明人 黄乐群　刘蕾　周磊　王磊　 (74)专利代理 机构 北京一格知识产权代理事务 所(普通合伙) 11316 专利代理师 万小侠 (51)Int.Cl. G01N 30/02(2006.01) G01N 30/06(2006.01) G01N 30/86(2006.01) (54)发明名称 高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构 体的方法 (57)摘要 本发明提出的是一种高效液相色谱法测定 精氨酸培哚普利中异构体的方法， 首先配制供试 品和异构体对照品的系统适用性溶液， 取待测精 氨酸培哚普利本品配制供试品溶液和对照溶液； 取系统适用性溶液注入液相色谱仪， 记录色谱 图， 系统适应性溶液中异构体和精氨 酸培哚普利 依次出峰， 再精密量取对照溶液和供试品溶液注 入液相色谱仪， 记录色谱图。 本发明能够有效分 离异构体， 可有效控制精氨酸培哚普利中的异构 体含量， 对于成 品及制剂的质量控制有着不可或 缺的意义。 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 CN 115469032 A 2022.12.13 CN 115469032 A 1.高效液相色谱法测定精 氨酸培哚普利异构体的方法， 具体包括如下步骤： 1） 系统适用性溶液的配制： 取精氨酸培哚普利及其立体异构体混合对照品适量， 用混 合溶剂制成每1ml中含精氨 酸培哚普利2mg及精氨 酸培哚普利立体异构体0.01mg的溶液， 作 为系统适用性溶 液； 2） 供试品溶液的配制： 取待测精氨酸培哚普利20mg， 用混合溶剂制成每1ml中含2mg精 氨酸培哚普利的溶 液， 作为供 试品溶液； 3） 对照溶液的配制： 精密量取供试品溶液1ml， 用混合溶剂制成每1ml中含0.01mg供试 品的溶液， 作为对照溶 液； 4） 异构体的液相色谱检测： 取系统适用性溶液10 μl注入液相色谱仪， 记录色谱图， 当色 谱图中立体异构体色谱 峰及主峰的相互分离度均大于1.5时， 再精密量取对照溶液和供试 品溶液各10µl注入液相色谱仪， 记录色谱图； 其特征在于： 所述步骤4） 液相色谱检测采用的流动相为氨基酸络合物 ‑甲醇溶液， 其中 氨基酸络合物和甲醇的质量比为95:5～5:95 。 2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法， 其特征 在于： 所述氨基酸络合物 为氨基酸 ‑铜盐络合物， 具体包括L ‑半胱氨酸、 L‑谷氨酸、 L‑谷氨酰 胺、 L‑亮氨酸、 L ‑酪氨酸、 L ‑组氨酸与硫酸铜、 氯化铜、 乙酸铜、 硝酸铜中的一种或多种经溶 解后混合组成， 其浓度为20～5 0mmol/L。 3.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法， 其特征 在于： 所述 步骤1）~3） 中的混合溶剂为质量比5 0:50的乙醇‑水溶液。 4.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法， 其特征 在于： 所述步骤4） 中液相色谱仪的色谱条件为： 采用菲罗门  Luna色谱柱， 规格150 ×4.6mm， 填料粒径5 μm； 柱温60℃， 等度洗脱， 流速为0.8ml/min； 采用检测器为紫外检测器， 检测波长 220nm。 5.根据权利要求1所述的高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法， 其特征 在于： 所述步骤4） 中记录 色谱图后， 供试品溶液的色谱图中如显异构体峰， 杂质峰面积不得 大于对照溶 液主峰面积的0.2倍； 异构体含量的具体 计算公式如下：  。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115469032 A 2高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方 法 技术领域 [0001]本发明涉及的是一种高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法， 属于化 学检测分析技 术领域。 背景技术 [0002]精氨酸培哚普利为第三代血管紧张素转换酶抑制剂， 服后6小时降压效果最大， 作 用持续时间长， 培垛普利可扩张大、 小动脉， 减少血容量， 降低系统血管阻力、 左室充盈压和 肺毛细血管楔压， 增加心排血量和每搏输出量， 增加心脏指数而不改变心率， 提高患者运动 耐量， 减轻左室心肌肥厚， 改善血流动力学。 本品耐受性好， 不引起高血糖， 对血脂亦无不良 影响。 培哚普利服后对ACE的抑制较其他ACE抑制剂起效慢， 对ACE的抑制率达90%以上， 服后 1小时起效， 3～4小时达最大 药理效应， 维持24小时。 [0003]2018年4月28日， 复方制剂 （FDC） 精氨酸培哚普利10 mg/氨氯地平5mg （开素达 ®） 正 式获国家食品药品监督管理总局 （CFDA） 批准上市。 精氨 酸盐的加入使培哚普利的保存稳定 性增加了约50%。 在疗效方面， 培哚普利与氨氯地平机制互补， 具有协同发挥降压疗效的优 势， 是降压治疗的 “黄金搭档 ”。 培哚普利/氨氯地平FD C半衰期长达30小时， 长效作用可以覆 盖全天血压。 培哚普利/氨氯地平这一组合的心血管益处已经被ASCOT、 EUROPA ‑CCB等大型 临床研究证实， 其在降低全因死亡、 心血管死亡、 总冠脉事件、 卒中、 新 发糖尿病以及肾损伤 风险方面均表现出临床优势。 [0004]在降压类药物中， 异构体的存在是影响药效的一大因素， 如氨氯地平在初期使用 时为混旋体， 后期拆分为药效更强的左旋氨氯地平。 精氨酸培哚普利中的异构体也是影响 产品质量的重要杂质： 中国药典、 欧洲药典、 美国药典等均将其限度定为0.1%。 上述参考标 准中的方法均为： 用适合的十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱 （如Inertsil  ODS3 ； 5 μm； 25cm× 4.6mm） ； 以乙腈 ‑正戊醇‑0.15%庚烷磺酸钠溶液 （用35%的高氯酸溶液调节pH至2.0） （217:3: 780） 为流动相； 检测波长215nm； 柱温50℃； 检测结果如附图5所示。 在该条件下， 单针的分析 时间长达18 0分钟， 且分离效果受试剂 影响较大， 各种品牌的离子对 试剂对于本品原标准色 谱条件的分离度、 基线情况干扰 较大， 对于日常检测造成很大的影响。 发明内容 [0005]本发明的目的在于解决现有精氨酸培 哚普利制备和质量检测过程中存在的上述 问题， 提出一种高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构 体的方法， 并严格进 行方法验证， 保证方法的科 学严谨， 满足研发和生产的需求。 [0006]本发明的技术解决方案： 高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体 的方法， 具 体包括如下步骤： 1） 系统适用性溶液的配制： 取精氨酸培哚普利及其立体异构体混合对照品适量， 用乙醇‑水 （1:1） 的混合溶剂制成每1ml中含精氨酸培哚普利2mg及精氨酸培哚普利立体异 构体0.01mg的溶 液， 作为系统适用性溶 液；说　明　书 1/4 页 3 CN 115469032 A 3