(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111421855.8 (22)申请日 2021.11.26 (66)本国优先权数据 202011364033.6 2020.1 1.27 CN (71)申请人 广东东阳光药业有限公司 地址 523808 广东省东莞 市松山湖园区工 业北路1号 (72)发明人 董军纪　张阔　于婷婷　王旭昉　 徐乐　赵光辉　叶群瑞　冯丽亚　 任志衡　蒋燕　陈小锋　李文佳　 (74)专利代理 机构 北京清亦华知识产权代理事 务所(普通 合伙) 11201 专利代理师 花丽 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01)C07K 19/00(2006.01) C12N 5/10(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/62(2006.01) C12N 15/867(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/68(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 CLDN18.2的抗体及其应用 (57)摘要 本发明提供一种能够特异性识别CLDN18.2 的抗体或其抗原结合片段、 嵌合抗原受体， 该抗 体或其抗原结合片段、 嵌合抗原受体含有选自下 列至少之一的CDR序列或与其具有至少9 5％同一 性的氨基酸序列： 轻链可变区CDR序列： SEQ  ID  NO： 1、 SEQ ID NO： 2、 SEQ  ID NO： 3、 SEQ ID NO： 7、 SEQ IDNO： 8和SEQ  ID NO： 9； 重链可变区CDR序 列： SEQ ID NO： 4、 SEQ  ID NO： 5、 SEQ  ID NO： 6、 SEQID NO： 10、 SEQ  ID NO： 11和SEQ ID NO： 12。 权利要求书3页 说明书20页 附图8页 CN 114560941 A 2022.05.31 CN 114560941 A 1.一种能够特异性识别CLDN18.2的抗体或其 抗原结合片段， 其特 征在于， 含有： 选自下列至少之一的CDR序列或与其具有至少95％同一 性的氨基酸序列： 轻链可变 区CDR序列： SEQ  ID NO： 1、 SEQ  ID NO： 2、 SEQ  ID NO： 3、 SEQ  ID NO： 7、 SEQ  ID  NO： 8和SEQ  ID NO： 9； 重链可变区CDR序列： SEQ  ID NO： 4、 SEQ  ID NO： 5、 SEQ  ID NO： 6、 SEQ  ID NO： 10、 SEQ  ID  NO： 11和SEQ ID NO： 12。 2.根据权利要求1所述的抗体或其 抗原结合片段， 其特 征在于， 所述 抗体包括： 分别如SEQ  ID NO:1、 2和3或者与SEQ  ID NO:1、 2和3具有至少95％同一性的氨基酸序 列所示的轻链可变区CDR 1、 CDR2、 CDR3序列； 或者 分别如SEQ  ID NO:7、 8和9或者SEQ  ID NO:7、 8和9具有至少95％同一性的氨基酸序列 所示的轻链可变区CDR 1、 CDR2、 CDR3序列。 3.根据权利要求1所述的抗体或其 抗原结合片段， 其特 征在于， 所述 抗体包括： 分别如SEQ  ID NO:4、 5和6或者与SEQ  ID NO:4、 5和6具有至少95％同一性的氨基酸序 列所示的重链可变区CDR 1、 CDR2、 CDR3序列； 或者 分别如SEQ  ID NO:10、 11和12或者与SEQ  ID NO:10、 11和12具有至少95％同一性的氨 基酸序列所示的重链可变区CDR 1、 CDR2、 CDR3序列。 4.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 与肽段E相比， 所述抗体 或其抗原结合片段以肽段A作为特异性识别CLDN18.2的优势表 位， 其中所述肽段E的序列如 SEQ ID NO： 14所示， 所述肽段A的序列如SEQ  ID NO： 13所示。 5.根据权利要求1所述的抗体或其 抗原结合片段， 其特 征在于， 含有： 重链框架区序列和轻链框架区序列的至少之一， 其中， 所述重链框架区序列和轻链框架区序列的至少之一的至少一部分来自于鼠源抗 体、 人源抗体、 灵 长目源抗体或其 突变体的至少之一。 6.根据权利 要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体具有如SEQ  ID  NO： 15或SEQ  ID NO： 16所示氨基酸序列的轻链可变区， 和/或者， 所述抗体具有如SEQ  ID NO： 17或SEQ  ID NO： 18所示氨基酸序列的重链可变区； 任选地， 所述抗体具有如SEQ  ID NO:15所示氨基酸序列的轻链可变区和 如SEQ ID NO： 17所示氨基酸序列的重链可变区； 任选地， 所述抗体具有如SEQ  ID NO： 16所示氨基酸序列的轻链可变区和 如SEQ ID NO： 18所示氨基酸序列的重链可变区。 7.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体含有重链恒定 区和轻链恒定区的至少之一， 所述重链恒定区和轻链恒定区的至少之一的至少一部 分来自 于鼠源抗体、 人源抗体、 灵 长目源抗体或其 突变体的至少之一。 8.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体的轻链恒定区 和重链恒定区均来自于鼠源IgG抗体或其 突变体。 9.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 具有如SEQ  ID NO： 19、 SEQ ID NO： 20、 SEQ  ID NO： 32或SEQ  ID NO： 34所示氨基酸序列的轻链。 10.根据权利 要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 具有如SEQ  ID NO： 21、权　利　要　求　书 1/3 页 2 CN 114560941 A 2SEQ ID NO： 22、 SEQ ID NO： 31或SEQ  ID NO： 33所示氨基酸序列的重链。 11.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体为单链抗体、 嵌合抗体、 多聚体抗体、 CDR移植 抗体。 12.根据权利要求11所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体为单链抗 体， 所述单链抗体具有SEQ  ID NO： 23或SEQ  ID NO： 24所示的氨基酸序列。 13.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗原结合片段包 括Fab片段、 (Fab)2片段、 scFv ‑Fc融合蛋白、 scFv ‑Fv融合蛋白、 Fv片段、 以及最小识别单位 的至少之一。 14.一种嵌合 抗原受体， 其特 征在于， 包括： 胞外区， 所述胞外区包括单链抗体的重链可变区和轻链可变区， 其中， 所述轻链可变区 和所述重链可变区是根据权利要求1～13任一项中所限定的抗体或其抗原结合片段确定 的。 15.根据权利要求14所述嵌合抗原受体， 其特征在于， 进一步包括跨膜区和胞内区， 其 中所述跨膜区包括CD 8跨膜区， 所述胞内区包括 ICOS胞内段、 4 ‑1BB及CD3 δ链。 16.根据权利 要求15所述嵌合抗原受体， 其特征在于， 所述ICOS胞内段的N端与所述CD8 跨膜区的C端相连， 所述ICOS胞内段的C端与所述4 ‑1BB胞内段的N端相连， 所述4 ‑1BB胞内段 的C端与所述CD3 δ链的N端相连。 17.一种免疫细胞， 其特 征在于， 所述免疫细胞表达 权利要求14所述的嵌合 抗原受体； 可选的， 所述免疫细胞包括T淋巴细胞、 DC细胞、 NK细胞和NKT淋巴细胞的至少之一。 18.一种核酸分子， 其特征在于， 所述核酸分子编码权利要求1～13任一项所述的抗体 或其抗原结合片段或者权利要求14所述的嵌合 抗原受体。 19.根据权利要求18所述的核酸分子， 其特 征在于， 所述核酸分子为DNA。 20.一种表达载体， 其特 征在于， 携带权利要求18或19所述的核酸分子 。 21.根据权利要求20所述的表达载体， 其特征在于， 所述表达载体为真核表达载体或者 病毒， 优选的， 所述病毒为慢病毒。 22.一种重组细胞， 其特 征在于， 所述重组细胞： 携带权利要求18或19所述的核酸分子， 或者 权利要求20或21所述的表达载体， 表达所述核酸分子编码权利要求1～13任一项所述的抗体或其抗原结合片段或者权利 要求14所述的嵌合 抗原受体。 23.根据权利要求22所述的重组细胞， 其特征在于， 所述重组细胞为真核细胞， 可选的， 所述重组细胞为哺乳动物细胞。 24.一种药物组合物， 其特 征在于， 含有： 权利要求1～13任一项所述的抗体或其 抗原结合片段； 权利要求14～16任一项所述的嵌合 抗原受体； 权利要求17 所述的免疫细胞； 权利要求18或19所述的核酸分子； 权利要求20或21所述的表达载体； 或者 权利要求2 2或23所述的重组细胞。权　利　要　求　书 2/3 页 3 CN 114560941 A 3