(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111397602.1 (22)申请日 2021.11.23 (71)申请人 福建中医药大学 地址 350003 福建省福州市五四路282号 申请人 福建拓天生物科技有限公司 (72)发明人 王英豪　肖志勇　方丽金　 (74)专利代理 机构 福州盈创知识产权代理事务 所(普通合伙) 35226 代理人 李明通 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 47/62(2017.01) A61K 31/12(2006.01) A61K 31/4525(2006.01) A61P 35/00(2006.01)C12N 5/09(2010.01) C12N 5/071(2010.01) C12Q 1/02(2006.01) (54)发明名称 iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体及 其制备方法 (57)摘要 本发明公开一种iRGD肽修饰共载姜黄素和 胡椒碱脂质体的制备方法， 将姜黄素、 胡椒碱、 卵 磷脂、 胆固醇、 iRGD ‑PEG2000 ‑DSPE、 DSPE ‑ PEG2000、 三氯甲烷混合， 得到混合物； 将混合物 进行旋蒸成膜； 将膜在酸性环境下溶解， 并依次 搅拌、 过滤后， 得到iRGD肽修饰共载姜黄素和胡 椒碱脂质体。 本发明还公开一种iRGD肽修饰共 载 姜黄素和胡椒碱脂质体。 本发明还公开一种iRGD 肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体在建立离体 A549细胞抑制模型中的应用以及旋转蒸发仪。 本 发明具有将iRGD肽作为纳米递药系统的特异性 靶向配体， 可增加药物在肿瘤细胞内的聚集， 减 少在正常组织的分布， 可以达到更好的抗肿瘤效 果的优点。 权利要求书2页 说明书14页 附图13页 CN 114344479 A 2022.04.15 CN 114344479 A 1.一种姜黄素和胡椒 碱联合脂质体的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 步骤一、 将卵磷脂、 胆固醇、 姜黄素、 胡椒 碱、 三氯甲烷混合， 得到混合物； 步骤二、 将混合物进行旋蒸成膜； 步骤三、 将膜溶解， 并依次搅拌、 过 滤后， 得到姜黄素和胡椒 碱联合脂质体。 2.一种iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体的制备方法， 其特征在于， 包括以下步 骤： 步骤一、 将COOH ‑PEG2000‑DSPE、 N‑N‑羟基琥珀酰亚胺、 二氯乙烷、 三氯甲烷混合反应， 得到第一混合反应 体系； 步骤二、 iRGD多肽溶解， 得到第二混合体系； 步骤三、 将第一混合反应 体系、 第二混合体系混合反应， 将反应产物旋蒸得到固体； 步骤四、 固体置 透析袋中透析后， 冻干得到iRGD ‑PEG2000‑DSPE； 步骤五、 将姜黄素、 胡椒碱、 卵磷脂、 胆固醇、 iRGD ‑PEG2000‑DSPE、 DSPE ‑PEG2000、 三氯 甲烷混合， 得到混合物； 步骤六、 将混合物进行旋蒸成膜； 步骤七、 将膜在酸性环境下溶解， 并依次搅拌、 过滤后， 得到iRGD肽修饰共载姜黄素和 胡椒碱脂质体。 3.根据权利要求2所述的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体的制备方法， 其特征 在于， 所述 步骤四中， 固体置 于500分子截留量的透析袋中透析3天。 4.根据权利要求2所述的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体的制备方法， 其特征 在于， 步骤五中胆固醇、 卵磷脂的质量比为1:5.19。 5.根据权利要求2所述的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体的制备方法， 其特征 在于， 步骤六中在3 5～45℃下用旋转蒸发仪将溶剂蒸干成膜。 6.根据权利要求2所述的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体的制备方法， 其特征 在于， 步骤六中所述旋转蒸发仪包括旋转导流机构； 旋转导流机构能带动多个蒸发瓶同时 旋转； 旋转导流机构还包括导流管、 滑动块、 连接管体； 滑动块与导流管在导流管的导向滑 动配合， 连接管体与滑动块 转动配合； 当需要进行蒸发瓶 安装或者拆卸时， 包括以下步骤： 步骤6.1、 滑动块向外运动使得 连接管体脱离导 流管； 步骤6.2、 滑动块、 连接管体同步向上运动使得倾斜状的蒸发瓶向上脱离水浴锅的同时 转动至蒸发瓶的开口向上的竖直状或者近似竖直状； 当进行蒸发瓶旋转蒸发时， 包括以下步骤： 步骤6.3、 滑动块、 连接管体同步向下使得竖直状或者近似竖直状的蒸发瓶向下运动至 其底部伸入至水浴锅的同时转动至蒸发瓶呈倾 斜状； 步骤6.4、 滑动块向内运动使得倾 斜状的连接管体的一端伸入至导 流管中。 7.根据权利要求2所述的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体的制备方法， 其特征 在于， 步骤七中， 在60℃恒温磁力搅拌20min， 0.22 μm的滤膜滤过， 得到iRGD肽修饰共 载姜黄 素和胡椒 碱脂质体。 8.一种采用如权利要求2 ‑7任意项所述的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体的制 备方法制备 得到的的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒 碱脂质体。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114344479 A 29.一种姜黄素和胡椒碱联合脂质体制备系统， 其特征在于， 包括混合装置、 旋转蒸发 仪、 搅拌装置、 过滤装置； 原料在所述混合装置中混合； 所述旋转蒸发仪用以对混合后的原 料进行旋蒸得到膜； 所述搅拌装置用以对溶解后的膜进行搅拌得到膜溶液； 过滤装置用以 对搅拌后的膜溶 液进行过滤。 10.一种iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒碱脂质体在建立离体A549细胞抑制模型中的应 用； 其特征在于， 包括以下步骤： 步骤一、 对离体的A549细胞进行体外 培养； 步骤二、 每孔分别加入至1.25ug/mL、 2.5ug/mL、 5ug/mL、 10ug/mL、 20ug/mL、 40ug/mL、 80ug/mL的iRGD肽修饰共载姜黄素和胡椒 碱脂质体， 分别培 养24h、 48h、 72h； 步骤三、 每孔加入20 μLMT T溶液， 继续孵 育4h， 终止 培养； 步骤四、 吸弃孔内培 养液， 每孔加入15 0 μLDMSO， 摇床振荡10mi n； 步骤五、 49 2nm下， 酶标仪测定各孔 光密度值， 记录结果。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114344479 A 3