(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111357697.4 (22)申请日 2021.11.16 (71)申请人 青岛泱深生物医药有限公司 地址 266000 山东省青岛市崂山区科 苑纬 一路1号青岛国际创新园二期D2栋千 山大厦25 03室 (72)发明人 杨承刚　范冰燕　郭静　李雨晨　 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/113(2010.01) A61K 31/337(2006.01) A61K 31/475(2006.01) A61K 31/555(2006.01) A61K 31/7068(2006.01) A61K 33/243(2019.01) A61K 45/06(2006.01)A61P 35/00(2006.01) G16B 25/10(2019.01) G16B 40/20(2019.01) G16H 10/20(2018.01) G16H 20/10(2018.01) G16H 50/20(2018.01) (54)发明名称 miRNA在预测肺腺癌对含铂双药化疗敏感性 中的应用 (57)摘要 本发明公开了miRNA在预测肺腺癌对含铂双 药化疗敏感性中的应用， 所述miRNA包括miR ‑ 4291、 miR ‑449a、 和/或miR ‑663， 经验证发现， 所 述miRNA作为预测肺腺癌对含铂双药化疗敏感性 的标志物， 具有较高的诊断效能， 可辅助临床医 生判断受试者对含铂双药化疗的敏感性或反应 性， 进而筛选出对含铂双药化疗 敏感的肺腺癌患 者， 以实现个 体化治疗。 权利要求书1页 说明书7页 序列表1页 附图8页 CN 114015776 A 2022.02.08 CN 114015776 A 1.检测样本 中miRNA标志物表达水平的试剂在制备用于预测肺腺癌对含铂双药化疗的 敏感性或反应性的产品中的应用， 其特征在于， 所述miRNA标志物为miR ‑4291、 miR ‑449a、 和/或miR ‑663。 2.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于， 所述试剂选自： 特异性识别所述miRNA标志 物的探针； 或 特异性扩增所述miRNA标志 物的引物。 3.根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述产品包括通过高通量测序方法、 实时 定量PCR、 RT ‑PCR、 原位杂交、 芯片检测样本中所述miRNA标志 物表达水平的试剂。 4.根据权利要求1所述的应用， 其特 征在于， 所述样本来源于受试者的血 液或组织。 5.一种用于预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性或反应性的产品， 其特征在于， 所述产品包含检测样本中miRNA标志物表达水平的试剂， 所述miRNA标志物为miR ‑4291、 miR‑449a、 和/或miR ‑663。 6.根据权利要求5所述的产品， 其特 征在于， 所述试剂选自： 特异性识别所述miRNA标志 物的探针； 或 特异性扩增所述miRNA标志 物的引物。 7.根据权利要求5所述的产品， 其特 征在于， 所述产品包括试剂盒、 芯片、 或试纸。 8.一种用于提高肺腺癌患 者对含铂双药化疗的敏感性或反应性的药物组合物， 其特征 在于， 所述药物组合物包括降低miR ‑4291表达水平的试剂、 降低miR ‑449a表达水平的试剂、 和/或升高miR ‑663表达水平的试剂。 9.miRNA标志物miR ‑4291、 miR ‑449a、 和/或miR ‑663在构建预测肺腺癌患者对含铂双药 化疗的敏感性或反应性的计算模型或者嵌入了所述计算模型的系统中的应用； 所述计算模型以miRNA标志物 miR‑4291、 miR ‑449a、 和/或miR ‑663的表达水平作为输入 变量， 通过生物信息学 方法进行运 算， 输出肺腺癌 患者对含铂双药化疗的敏感性或反应性。 10.一种预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性或反应性的系统或装置， 其特征在 于， 所述系统或装置包括： (1)评估装置： 包括控制单元和存储单元， 用于预测评估肺腺癌患 者对含铂双药化疗的 敏感性或反应性； (2)彼此通信连接的信息通信终端装置： 用于提供关于来自肺腺癌患者的样本中miRNA 标志物miR‑4291、 miR‑449a、 和/或miR ‑663的表达水平的数据； 所述评估 装置的控制单 元包括如下四个单 元： 1)数据接收单元： 用于接收从所述信 息通信终端设备传输的关于来自肺腺癌患 者的样 本中所述miRNA标志 物表达水平的数据； 2)判别值计算单元： 其基于对 由所述数据接收单元接收的所述miRNA标志物的表达水 平以及存储在所述存储单元中的作为解释 变量的所述mi RNA标志物的表达水平的判别来计 算判别值； 3)判别值基准评价单元： 其基于由所述判别值计算单元计算的判别值， 对所述肺腺癌 患者对含铂双药化疗的敏感性或反应性进行评价； 4)评估结果发送单元： 其将由所述判别值基准评估单元获得的所述肺腺癌患 者的预测 评估结果发送到所述信息通信终端装置 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114015776 A 2miRNA在预测肺腺癌对含铂双药 化疗敏感性中的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医学技术领域， 具体地， 本发明涉及miRNA在预测肺腺癌对含铂 双 药化疗敏感性中的应用。 背景技术 [0002]肺癌(Lung  cancer)是全球范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤， 其中， 非小细 胞肺癌(Non ‑small cell lung cancer， NSCLC)占80 ％， 而肺腺癌(Lung  adenocarcinoma) 是NSCLC的主要组织学类型(Ji  P,Diederichs  S,Wang W,et al.MALAT ‑1,a novel  noncoding  RNA,and thymosinβ 4predict  metastasis  and survival  in early‑stage  non‑small cell lung cancer[J].Oncogene,2 003,22(39):8031 ‑8041.)。 尽管目前对肺癌 的相关研究和临床试验进展迅速， 但肺癌预后仍较差， 80 ‑85％患者诊断时已是中晚期， 5年 生存率不到15％(Bailey ‑Wilson J E,Amos C I,Pinney  S M,et al.A major lung  cancer susceptibility  locus maps to chromosome  6q23–25[J].The  American   Journal of Human Genetics,2004,75(3):460 ‑474.)， 因此， 为达到肺癌患者的早期诊断 和精准化、 个体化治疗， 亟需筛查新的生物标志物和作用靶点， 探讨 肺癌发生 发展的作用机 制， 提高肺癌病人患者的生存率。 [0003]miRNA是一种长度为19 ‑22个核苷酸的非编码单链RNA。 它们通过沉默mRNA来发挥 作用， 从而在转录后水平调节基因的表达。 miRNA的合成首先是由miRNA编码基因转录出 pre‑miRNA， 随后由RNase Ⅲ家族成员Drosh a将pri‑miRNA剪切成为长度 大约为80bp的发卡 结构的pre ‑miRNA， 也是miRNA前体。 最后， pre ‑miRNA在细胞质中被RNase Ⅲ家族成员Dicer 加工成双 链的RNA。 其中一条则与RNA沉 默复合物(RNA ‑induced silencing  complex， RISC) 结合形成了RISC ‑miRNA复合物， 随后再次结合到靶基因的mRNA的3 ’UTR来调控靶 标。 随着近 期生物信息学在miRNA领域应用逐步推广和深入， 科学家应用生物信息学软件对miRNA的机 制进行分析， 显示许多miRNA调控靶点位于与细胞癌变密切相关的肿瘤调控因子或通路上， 这对于肿瘤病因学的研究具有重要意义。 但目前对肺腺癌的分析多局限在对靶基因的预 测。 [0004]目前， 治疗肺腺癌的常规方法有手术治疗、 含铂双药化疗、 放疗和靶向治疗等， 其 中， 含铂双药化疗作为一种晚期肺腺癌的治疗方案备受关注， 也是临床上在晚期肺腺癌患 者人群中应用较广的一种治疗方案， 含铂双药化疗是指将铂类化疗药物(卡铂、 顺铂)与其 他非铂单药(紫杉 醇、 吉西他滨、 长春瑞滨)联合应用， 但是目前仍然难以预测哪些肺腺癌患 者会对含铂双药化疗治疗方案具有敏感性， 预测肺腺癌患者对含铂双药化疗的敏感性或反 应性仍然是一个巨大 的挑战， 因此， 发现能够用于肺腺癌对含铂双药化疗敏感性进行准确 预测的生物标志物， 并将其应用于化疗前肺腺癌患者的筛查中对于本领域而言具有重要意 义。说　明　书 1/7 页 3 CN 114015776 A 3