(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111631493.5 (22)申请日 2021.12.28 (71)申请人 中国海洋大学 地址 266003 山东省青岛市 市南区鱼山路5 号 (72)发明人 毛相朝　高坤鹏　孙建安　闫娇　 余可欣　 (74)专利代理 机构 济南光启专利代理事务所 (普通合伙) 37292 代理人 张瑜 (51)Int.Cl. C07H 15/06(2006.01) C12P 19/26(2006.01) C12P 19/02(2006.01) C12N 9/24(2006.01)C12N 15/56(2006.01) A23L 33/12(2016.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 37/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 3/02(2006.01) (54)发明名称 N-乙酰氨基葡萄糖 基甘油酯及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了N ‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯， 其结构式如式 Ⅰ所示， 所述R1、 R2独立地为脂肪酸 形成的酰基； 所述脂肪酸选自短链脂肪酸、 中链 脂肪酸或长链脂肪酸。 制备时， 先利用N ‑乙酰氨 基葡萄糖苷酶的逆水解活性催化甘油和N ‑乙酰 氨基葡萄糖合成糖基甘油， 再利用脂肪酶催化糖 基甘油与不同的酰基供体酰化， 合成N ‑乙酰氨基 葡萄糖基甘油酯。 本发明还提供了N ‑乙酰氨基葡 萄糖基甘油， N ‑乙酰氨基葡萄糖苷酶SbNag2 550， 其氨基酸序列如SEQ  ID NO:1所示。 本发明首次 合成了N‑乙酰氨基葡萄糖基甘油及其糖基甘油 酯， 丰富了糖基甘油酯产品的种类， 该化合物有 望应用于医药、 食品等领域， 作为药物或膳食补 充剂。 权利要求书1页 说明书7页 序列表4页 附图5页 CN 114230621 A 2022.03.25 CN 114230621 A 1.N‑乙酰氨基葡萄糖 基甘油酯， 其结构式如式 Ⅰ所示： 其中， 所述R1、 R2独立地为脂肪酸形成的酰基； 所述脂肪酸选自短链脂肪酸、 中链脂肪酸 或长链脂肪酸。 2.根据权利要求1所述的N ‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯， 其特征在于： 所述脂肪酸选自己 酸、 月桂酸、 棕榈酸、 二十二 碳六烯酸乙酯。 3.权利要求1或2所述的N ‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯的制备方法， 其特征在于， 包括以 下步骤： (1)在N‑乙酰氨基葡萄糖苷 酶SbNag2550的作用下， 甘油与N ‑乙酰氨基葡萄糖逆水解合 成N‑乙酰氨基葡萄糖 基甘油； 所述N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶SbNa g2550， 其氨基酸序列如SEQ  ID NO:1所示； (2)在脂肪酶的作用下， 糖基甘油与脂肪酸进行酰化反应， 合成N ‑乙酰氨基葡萄糖基甘 油酯。 4.根据权利 要求3所述的制备方法， 其特征在于， 所述步骤(1)具体如 下： 将甘油和N ‑乙 酰氨基葡萄糖加入水中， 混匀， 加入N ‑乙酰氨基葡萄糖苷酶， 在40～60℃ 温度下， 反应12～ 36h； 其中， 甘油与N ‑乙酰氨基葡萄糖的质量比为2～12:1， 水与N ‑乙酰氨基葡萄糖的用量比 为4～10:1； 和/或： 所述 步骤(2)中， 所述脂肪酶选自固定化脂肪酶N ovozyme 435； 和/或： 所述 步骤(2)中， 所述脂肪酸选自己酸、 月桂酸、 棕榈酸、 二十二 碳六烯酸乙酯。 5.根据权利要求4所述的制备方法， 其特征在于： 所述N ‑乙酰氨基葡萄糖苷酶的用量 为： 5～30U/g N‑乙酰氨基葡萄糖； 和/或： 反应时控制pH值在4.6～6.6； 和/或： 反应条件为： 在5 0℃下反应24h 。 6.权利要求1或2所述的N ‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯在作为/制备补充多不饱和脂肪酸 的膳食补充剂中的应用， 或在制备 药物中的应用。 7.N‑乙酰氨基葡萄糖 基甘油， 其结构式如式 Ⅰ所示， 其中， R1＝R2＝H。 8.一种N‑乙酰氨基葡萄糖苷酶SbNa g2550， 其氨基酸序列如SEQ  ID NO:1所示。 9.编码权利要求8所述的N ‑乙酰氨基葡萄糖苷酶SbNag2550的基因， 其核苷酸序列如 SEQ ID NO:2所示。 10.权利要求8所述的N ‑乙酰氨基葡萄糖苷酶SbNag2550在催化N ‑乙酰氨基葡萄糖与甘 油合成N‑乙酰氨基葡萄糖 基甘油中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114230621 A 2N‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯及其制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及N ‑乙酰氨基葡萄糖 基甘油酯， 及其制备 方法， 属于生物 催化技术领域。 背景技术 [0002]糖基甘油酯(glyceroglycolipid)是糖类以还原末端通过糖苷键连接在单酰基 或 者二酰基甘油上形成的一类化合物， 广泛存在于动物、 植物、 微生物中， 具有抗肿瘤、 抗氧 化、 抗病毒、 调节免疫等多种生理活性。 视糖基和脂肪酰基种类和数目的不同， 糖基甘油酯 的活性表现出较大 的差异性。 一般而言， 糖基数目较少、 酰基数目较多、 酰基不饱和度较高 的糖基甘油酯表现出 更好的生理 活性。 [0003]糖基甘油酯的来源包括天然来源和人工合成两种， 天然来源是从植物和藻类等生 物体内进 行分离提取， 由于其在生物体内含量较低， 往往需要消耗大量的植物和藻类资源。 另外， 糖基甘油酯的存在形式也较为复杂， 分离纯化困难， 需要在纯化精制上花费比较多的 成本和精力， 限制了其在精细化工、 保健药物方面的应用， 也不利于研究其构 ‑效关系。 近年 来， 许多研究者在人工合成糖基甘油酯方面取得了可喜的进展。 在众多 人工合成方法中， 酶 法由于其催化特异性高、 副反应少、 反应条件温和等优点， 受到越来越多的关注， 也为特定 类型糖基甘油酯的设计和合成提供了可能。 [0004]N‑乙酰氨基葡萄糖(N ‑acetyl‑glucosamine)是生物细胞内许多重要多糖的基本 组成单位， 在临床上也具有多种生理活性， 可用于增强人体免疫系统， 抑制癌细胞或纤维细 胞的过度生长， 对于各种炎症， 如骨关节炎及关节疼痛也有治疗作用。 因此， 利用酶法催化 合成N‑乙酰氨基葡萄糖 基甘油酯对于新型 药物的开发具有重要意 义。 发明内容 [0005]针对上述现有技术， 本发明提供了一种新的糖基甘油酯——N ‑乙酰氨基葡萄糖基 甘油酯， 本发明的还提供了其制备方法。 本发明先利用N ‑乙酰氨基葡萄糖苷酶的逆水解活 性催化甘油和N ‑乙酰氨基葡萄糖合成糖基甘油， 再利用脂肪酶催化糖基甘油与不同的酰基 供体酰化， 合 成N‑乙酰氨基葡萄糖基甘油酯 。 本发明还提供了N ‑乙酰氨基葡萄糖基甘油、 N ‑ 乙酰氨基葡萄糖苷酶。 [0006]本发明是通过以下技 术方案实现的： [0007]N‑乙酰氨基葡萄糖 基甘油酯， 其结构式如式 Ⅰ所示：说　明　书 1/7 页 3 CN 114230621 A 3