(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111661505.9 (22)申请日 2021.12.3 0 (71)申请人 丽水市中心医院 地址 323000 浙江省丽水市莲都区括 苍路 289号 (72)发明人 纪建松　乔恩奇　陈敏江　赵中伟　 殳高峰　宋晶晶　丁佳怡　郭小菊　 杜永忠　 (74)专利代理 机构 北京远大卓悦知识产权代理 有限公司 1 1369 代理人 李淑亚 (51)Int.Cl. A61K 47/62(2017.01) A61K 47/69(2017.01) A61K 31/351(2006.01)A61K 31/4439(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) (54)发明名称 一种E-选择素修饰的脂质体靶向给药系统 及其制备方法与应用 (57)摘要 本发明公开了一种E ‑选择素修饰的脂质体 靶向给药系统及其制备方法与应用。 首先， 本发 明提供了一种E ‑选择素修饰的脂质体靶向给药 系统及其制备方法， 其包括S1、 DSPE ‑PEG‑NTA的 制备； S2、 DSPE ‑PEG‑NTA修饰脂质体； S3、 E ‑选择 素修饰DSPE ‑PEG‑NTA修饰的脂质体。 其次， 本发 明还提供了一种用于治疗原位肿瘤和/或转移瘤 的靶向药物， 其是由本发明提供的靶向给药系统 上负载抗肿瘤药物得到的。 E ‑选择素修饰的脂质 体纳米靶向给药系统， 能提高药物的靶向性， 不 仅能有效减小原位肿瘤的大小， 还能有效减少转 移灶的形成， 能大 大的提高患者的生存周期。 权利要求书2页 说明书8页 附图3页 CN 114344478 A 2022.04.15 CN 114344478 A 1.一种E‑选择素修饰的脂质体靶向给 药系统的制备 方法， 其包括： S1、 DSPE‑PEG‑NTA的制备： 将DSPE‑PEG‑NHS溶于第一溶剂中， 得到第一溶液； 将N,N ‑双(羧甲基) ‑L‑赖氨酸溶于第 二溶剂中， 得到第二溶液； 在搅拌条件下将第二溶液加入到第一溶液中， 加完继续反应2 ‑ 4h， 反应完成后将反应液置 于透析袋中进行透析， 得到D SPE‑PEG‑NTA； S2、 DSPE‑PEG‑NTA修饰脂质体： 采用薄膜 分散法将对脂质体进行DSPE ‑PEG‑NTA的修饰， 得到DSPE ‑PEG‑NTA修饰的脂质 体； S3、 E‑选择素修饰DSPE‑PEG‑NTA修饰的脂质体： 将镍盐溶解于去离子水中， 得到镍离子溶液； 在搅拌条件下将步骤S2中得到的DSPE ‑ PEG‑NTA修饰的脂质体加 入镍离子溶液中， 加完继续搅拌2 ‑4h， 然后用透析袋透析4 ‑6h， 后 加入E‑选择素， 在0‑8℃条件下孵 育12‑18h， 得到 E‑选择素修饰的脂质体靶向给 药系统。 2.根据权利要求1所述的制备方法， 其中， 步骤S1中所述的第一溶剂为混合有机溶剂； 优选为甲醇和乙醇的混合溶剂； 进一 步优选为甲醇和乙醇的体积比为2:1； 所述第二溶剂为混合溶剂， 优选为甲醇、 去离子水和三乙胺的混合溶剂； 进一步优选为 甲醇、 去离 子水和三乙胺的体积比为1:0.1:0.01。 3.根据权利要求1所述的制备方法， 其 中， 步骤S1中第一溶液中DSPE ‑PEG‑NHS的浓度为 10‑30mg/mL； 第二溶 液中N,N‑双(羧甲基) ‑L‑赖氨酸的浓度为5 ‑10mg/mL。 4.根据权利要求1所述的制备 方法， 其中， 步骤S2中薄膜分散法的具体操作为： 将卵磷脂、 胆固醇、 DSPE ‑PEG‑NTA和DSPE ‑PEG溶于有机溶剂中， 然后去除所述有机溶剂 形成脂质薄膜， 加入PBS溶液使脂质薄膜水化， 冰浴探头超声2 ‑8min， 得到DSPE ‑PEG‑NTA修 饰的脂质体； 其中， 卵磷脂、 胆固醇、 D SPE‑PEG‑NTA和DSPE‑PEG的摩尔比为2： 1： 0.1 ‑0.5： 0‑0.12。 5.根据权利要求1所述的制备方法， 其中， 步骤S3中所述的镍盐包括六水合氯化镍、 无 水氯化镍、 醋酸镍、 硫酸镍、 溴化镍中的一种或多种。 6.根据权利要求1所述的制备方法， 所述镍盐的用量为DSPE ‑PEG‑NTA摩尔量的1 ‑1.2 倍； 所述E‑选择素的用量为以DSPE ‑PEG‑NTA修饰的脂质体计， 7mg修饰后的脂质体中添加 0.5‑1.5 μg E‑选择素。 7.一种E‑选择素修饰的脂质体靶向给药系统， 其是按照权利要求1 ‑7中任一项所述的 制备方法制备 得到的； 其粒径为80 ‑150nm， 表面电位 为‑7—‑11.26mv。 8.一种用于治疗原位肿瘤和/或转移瘤的靶向药物， 其是由权利要求8或9中所述的E ‑ 选择素修饰的脂质体靶向给 药系统上负载抗肿瘤药物制备而成。 9.根据权利要求8所述的靶向药物， 其中， 所述抗肿瘤药物包括盐霉素和/或SB ‑ 431542， 其中， 所述盐霉素的负载量 为3％‑3.5％； 所述SB‑431542的负载量 为1.5％‑2％。 10.权利要求9中所述的靶向药物的制备 方法， 其包括： S1、 DSPE‑PEG‑NTA的制备：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114344478 A 2将DSPE‑PEG‑NHS溶于第一溶剂中， 得到第一溶液； 将N,N ‑双(羧甲基) ‑L‑赖氨酸溶于第 二溶剂中， 得到第二溶液； 在搅拌条件下将第二溶液加入到第一溶液中， 加完继续反应2 ‑ 4h， 反应完成后将反应液置 于透析袋中进行透析， 得到D SPE‑PEG‑NTA； 其中， 第一溶剂为甲醇和乙醇的体积比为2:1的混合溶剂； 第二溶剂为甲醇、 去离子水 和三乙胺的体积比为1:0.1:0.01的混合溶剂； DSPE ‑PEG‑NHS的浓度为10 ‑30mg/mL； 第 二溶 液中N,N‑双(羧甲基) ‑L‑赖氨酸的浓度为5 ‑10mg/mL； S2、 DSPE‑PEG‑NTA修饰脂质体及抗肿瘤药物负载： 将摩尔比为2： 1： 0.1 ‑0.4： 0.01 ‑0.1： 0.4‑0.6： 0.5‑0.7的卵磷脂、 胆固醇、 DSPE ‑PEG‑ NHS、 DSPE ‑PEG、 Salinomycin、 SB ‑431542溶于有机溶剂中， 然后去除所述有机溶剂， 形成脂 质薄膜， 加入PBS溶液使其水化， 冰浴条件 下探头超声2min ‑8min， 然后将反应液置于离心管 中， 4000rmp‑6000rmp离心5mi n‑10min， 取上清， 去除未 载入药物； S3、 E‑选择素修饰DSPE‑PEG‑NTA修饰的负载 药物的脂质体： 将镍盐溶解于去离子水中， 得到镍离子溶液； 在搅拌条件下步骤S2中得到的产物加入 镍离子溶液中， 加完继续搅拌2 ‑4h， 然后用透析袋透析4 ‑6h， 后加入E ‑选择素， 在0 ‑8℃条件 下孵育12‑18h， 得到 E‑选择素修饰的脂质体靶向给 药系统； 其中， 所述镍盐的用量为DSPE ‑PEG‑NTA摩尔量的1 ‑1.2倍， E‑选择素的用量为以DSPE ‑ PEG‑NTA修饰的脂质体 计， 7mg修饰后的脂质体中添加0.5 ‑1.5 μg E‑选择素。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114344478 A 3