(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111640369.5 (22)申请日 2021.12.2 9 (71)申请人 中山大学南昌研究院 地址 330224 江西省南昌市高新 技术开发 区艾溪湖北路269号 (72)发明人 郭宇　 (74)专利代理 机构 广州致信 伟盛知识产权代理 有限公司 4 4253 代理人 彭玲 (51)Int.Cl. A61K 47/69(2017.01) A61K 41/00(2020.01) A61K 45/06(2006.01) A61K 47/64(2017.01) A61K 47/68(2017.01)A61K 31/715(2006.01) A61P 35/00(2006.01) B82Y 5/00(2011.01) (54)发明名称 一种MMP酶敏感胎盘微环 境和肿瘤微环 境靶 向载体及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明公开了一种MMP酶敏感胎盘微环 境和 肿瘤微环 境靶向载体及其制备方法和应用， 所述 靶向载体具有核 ‑壳双层结构， 以在接触胎盘组 织间液高表达的酶的作用下靶向崩解的酶底物 多肽‑PEG修饰的脂质双分子膜作为外壳， 以胎盘 滋养细胞表面特异性高表达标志物抗体修饰的 药物载体作为内核， 所述药物载体为聚乙二醇修 饰的聚阳离子载体与疏水性可 降解聚酯形成的 共聚物。 本发明的MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤 微环境靶向载体可有效避免母体胎盘外其他器 官和胎儿非特异性药物吸收， 进而实现对胎盘内 病变滋养细胞特异性药物的递送和功能调控。 权利要求书1页 说明书12页 附图1页 CN 114377150 A 2022.04.22 CN 114377150 A 1.一种MMP 酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体， 其特征在于， 所述靶向载体具有 核‑壳双层结构， 其中， 以在接触胎盘组织间液和肿瘤组织间液共同高表达的酶的作用下靶 向崩解的酶底物多肽 ‑PEG修饰的脂质双分子膜作为外壳， 以胎盘滋养细胞和肿瘤细胞表 面 共同特异性高表达的标志物抗体修饰的药物 载体作为内核， 药物载体中负载超顺磁性四氧 化三铁SPIO纳米粒子、 调控胎盘滋养细胞功能的小分子药物、 治疗基因或其组合； 所述胎盘组织间液和肿瘤组织间液共同高表达的酶为基质金属蛋白酶9、 溶菌酶、 激肽 酶、 组胺酶 或催产素酶中的一种或几种； 所述胎盘滋养细胞表面和肿瘤细胞表面共同特异性高表达的标志物抗体为 desmoplakin抗体的Fab段； 所述药物载体为聚乙二醇修饰的聚阳离 子载体与疏 水性可降解聚酯形成的共聚物。 2.根据权利要求1所述的MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体， 其特征在于， 所述胎盘组织间液和肿瘤组织间液共同高表达的酶为基质金属蛋白酶9。 3.根据权利要求1所述的MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体， 其特征在于， 所述共聚物为聚乙二醇 ‑聚乙烯亚胺 ‑聚己内酯PEG ‑PEI‑PCL、 聚乙二醇 ‑聚乙烯亚胺 ‑聚乳 酸PEG‑PEI‑PLA或聚乙二醇 ‑聚乙烯亚胺 ‑聚乳酸‑羟基乙酸PEG ‑PEI‑PLGA中的一种或几种， 优选聚乙二醇 ‑聚乙烯亚胺 ‑聚己内酯 PEG‑PEI‑PCL。 4.根据权利要求1所述的MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体， 其特征在于， 所述MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体的平均粒径为80nm ‑300nm， 优选为 100nm‑205nm。 5.根据权利要求1所述的MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体， 其特征在于， 所述小分子药物为Prodigi osin， 所述治疗基因为抑制ISL1基因表达的siRNA。 6.权利要求1 ‑5任一项所述的MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体的制备方 法， 其特征在于， 包括以下步骤： S1、 将超顺磁性四氧化三铁SPIO纳米粒子、 调控胎盘滋养细胞功能的小分子药物和/或 基因负载到共聚物， 得到复合纳米粒子； S2、 将胎盘滋养细胞表面和肿瘤细胞表面共同标志物抗体或抗体片段链接到复合纳米 粒子， 得到抗体复合纳米粒子； S3、 将胎盘组织间液和肿瘤组织间液共同高表达的酶底物多肽链接PEG， 得到多肽 ‑ PEG； S4、 将多肽 ‑PEG和脂质体混合形成多肽 ‑PEG修饰的脂质双分子膜； S5、 将多肽 ‑PEG修饰的脂质双分子膜与抗体复合纳米粒子组装成MMP酶敏感胎盘微环 境和肿瘤微环境靶向载体。 7.权利要求6所述的MMP 酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体的制备方法， 其特征 在于， 步骤S1中， 共聚物和超顺磁性四氧化 三铁SPIO纳米粒子的质量比为5 ‑15:1。 8.权利要求1 ‑5任一项所述的MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环境靶向载体在制备调 控胎盘滋养细胞功能失调甚至导 致恶性疾病药物中的应用。 9.根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述调控胎盘滋养细胞功能失调甚至导致 恶性疾病为妊娠合并滋养细胞肿瘤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114377150 A 2一种MMP酶敏感胎盘 微环境和 肿瘤微环境靶向载体及其制备 方法和应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医学工程领域， 具体涉及一种MMP酶敏感胎盘微环境和肿瘤微环 境靶向载体及其制备 方法和应用。 背景技术 [0002]妊娠滋养细胞肿瘤(gestational  trophoblastic  neoplasms， GTN)包括侵蚀性葡 萄胎、 绒毛膜癌、 胎盘部位滋养细胞肿瘤和上皮样滋养细胞肿瘤等。 大部分妊娠后发病的 GTN对化疗反应较好， 化疗的有效率可达90％以上。 然而， GTN中， 处理最为困难的类型是发 病于妊娠期孕妇胎盘部位的妊娠合并滋养细胞肿瘤。 此类肿瘤在妊娠期发病， 与胎 儿和胎 盘共存， 主要的病理学特点为， 肿瘤发生于胎盘， 瘤体可局限于子宫， 也可突向宫腔呈息肉 状， 或侵入肌层甚至穿破浆膜， 形成转移 【中华妇产科杂志,2003(10):4 ‑5. 】 。 该类肿瘤存在 于胎盘中， 与胎盘组织密不可分， 无法采用手术手段进行处理。 如果采用GTN常用的化疗等 手段， 一定会伤及胎 儿， 导致流产。 此类病例临床上处理非常棘手， 往往需要终止妊娠后进 行多种手段的联合治疗。 所以， 如果能够开发在妊娠期向胎盘中良恶性滋养细胞递送药物 的手段， 进而实现对胎盘中滋养细胞来源肿瘤细胞 的特异性杀伤， 并且在杀伤过程中保证 对胎儿的较少药物分布和较低毒性， 将有效控制该类无有效治疗手段疾病的进 展。 [0003]wnt/β‑‑catenin通路的过度激活是导致滋养细胞肿瘤发生发展的重要原因 【Placenta.2009  Oct； 30(10):8 76‑83； Mediator s Inflamm.2020  Aug 12； 2020:9578701； Am J Physiol Cell Physiol.2020  Mar 1； 318(3):C664 ‑C674. 】 所以， 我们期望采用可以 确切抑制wnt通路的药物实现对胎盘中滋养细胞肿瘤的抑制。 Prodigiosin是Wnt/β ‑ catenin通路的有效抑制剂， 具有抗细菌， 抗真菌， 抗原生动物， 抗疟疾， 免疫抑制和抗癌特 性。 【Proc  Natl Acad Sci U S A.2016 Nov 15； 113(46):13150 ‑13155. 】 ， 并且它对于肿瘤 细胞耐药也有 一定的抑制作用 【Canc er Lett.202 0 Jul 1； 481:15 ‑23. 】 。 所以， 我们期望采 用Prodigiosin实现对胎盘中滋养细胞肿瘤的抑制。 ISL1(ISL  LIM Homeobox  1)是一种与 多种肿瘤增殖转移、 血管生成密切相关的癌基因 【Onco  Targets Ther.2018  Feb 14； 11: 781‑789. 】 ， 其促癌活性与AKT等通 路相关 【Int  J Mol Med.2018 Nov； 42(5):2343 ‑2352. 】 。 我们在前期预实验中证实， 对其进行抑制， 可以有效阻滞滋养细胞肿瘤的增殖转移。 在我们 的前期实验中已发现， 这两种药物联合治疗滋养细胞肿瘤可以获得较好的抑制效果。 所以， 如果能够将前述滋养细胞肿瘤抑制药物递送至胎盘中的病变细胞， 就可以预期实现较好的 协同治疗效果。 [0004]然而， 现有可能具有TB功能调控作用或滋养细胞肿瘤抑制效果的药物均不可避免 地在母体各器官分布， 并通过胎盘， 向胎儿分布。 这些药物在TB功能调控的同时， 会产生对 母体和胎 儿的毒性。 目前包括急救药品在内的孕妇用药均存在极多的禁忌， 孕妇的药物使 用和新药开发中首先面临的问题是， 需要考虑对药物在母体和胎 儿的分布和毒性问题。 绝 大多数的药物可以通过胎盘， 分布进入胎 儿侧， 影响胎儿发育。 因此， 目前在体外实验中实说　明　书 1/12 页 3 CN 114377150 A 3