(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111650731.7 (22)申请日 2021.12.3 0 (71)申请人 广东汉氏干细胞生物科技有限公司 地址 528200 广东省佛山市南海区桂城工 业园A3街区西约段1号楼自编105号 (住所申报) (72)发明人 熊学清　黄金花　熊子铭　 (74)专利代理 机构 深圳市广诺专利代理事务所 (普通合伙) 44611 代理人 宿晓燕 (51)Int.Cl. A61K 39/00(2006.01) A61K 38/20(2006.01) A61K 38/17(2006.01) A61K 48/00(2006.01)A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) C12N 5/0783(2010.01) (54)发明名称 一种NK免疫细胞药物组合及应用 (57)摘要 本发明公开了一种NK免疫细胞药物组合及 应用， 作为靶向剂用于肿瘤治疗的的mAb， 不同类 型抗体分子与酶、 化学药物、 放射性同位素及生 物毒素等结合， 借助抗体导向作用， 使细胞毒物 质局限于肿瘤， 可以增强特异性， 减少副作用； Kaminski等1人用鼠源性标记的B(抗CD20抗体) 治疗固性非何杰金氏潜巴瘤患者， 其中多于 75％ 的患者有疗效； Jurcic等用一种人源化的抗 CD33mAM195治疗急性细胞样白血病(AML)和急性 早幼粒细胞白血病取得了很好的疗效； 目前射标 记抗体如抗CD45抗体已成为A ML或急性单核细胞 增多型白血病的BMT治疗方案中的一个组成部 分； 另外， 放射性同位素或化学毒素标记的m在结 肠癌、 乳腺癌、 肝癌和肾癌等肿瘤治疗中的应用 也已取得了明显的疗效， 各成分之间协同作用， 能够激起更强的免疫应答， 诱导出更高比例的肿 瘤特异的CD4以及CD 8T细胞。 权利要求书1页 说明书5页 CN 114377118 A 2022.04.22 CN 114377118 A 1.一种NK免疫细胞药物组合及应用， 其特征在于， 用抗原提呈细胞(APC)提呈肿瘤抗 原， 激活的B细胞及树状细胞(DC)均为体内强有力的抗原提呈细胞， 目前用肿 瘤抗原肽、 肿 细胞裂解物、 肿瘤细胞RNA体外冲击APC或将肿瘤相关抗原(TAT)基因转导到APC内甚至将肿 瘤细胞与APC细胞融合。 2.根据权利要求1所述的一种NK免疫细胞药物组合及应用， 其特征在于， 步骤:把自身 树突状细胞暴于肿瘤细胞使之携带肿瘤抗原； 色素瘤疫苗应用四个来源于100和酸色素蛋 白的合成肽， 使之显露于树突状细胞表面； 应用重组前列腺特异 性膜抗研前列腺疫苗， 新 发 现的抗原提呈细胞纤维细胞替代树 突状细胞的可能性； 把 树突状细胞与全脚细胞融合。 3.根据权利要求1所述的一种NK免疫细胞药物组合及应用， 其特征在于， 包含下述(a) 至(d)成分： (a)白细胞介素 ‑15、 其突变体或其功能片段， 或者它 们的编码核酸； (b)白细胞介素 ‑15受体α 、 其 突变体或其功能片段， 或者它 们的编码核酸； (c)白细胞介素 ‑12、 其突变体或其功能片段， 或者它 们的编码核酸； (d)PD1‑CD80融合蛋白、 其 突变体或其功能片段， 或者 其编码核酸。 在某些具体实施方案中， 所述用于增 强T淋巴细胞免疫性组合物的成分(a)和 成分(b) 的摩尔比为(0.8 ‑1.2)； 在某些具体实施方案中， 所述用于增 强T淋巴细胞免疫性组合物的成分(a)和(b)分别 为单独的蛋白， 且成分(a)和(b)由同一核酸分子表达产生。 在某些具体实施方案中， 所述用于增强T淋巴细胞免疫性组合物的成分(a):(b):(c): (d)摩尔比为1:1:(0.8 ‑1.2):(0.8 ‑1.2)。 本发明的第二方面， 提供一种免疫细胞， 其包含第 一方面所述的组合物。 在某些具体实施方案中， 所述免疫细胞为 树突细胞。 在某些具体实施方案中， 所述免疫细胞进一 步包含抗原或其编码核酸。 提供一种药物组合物， 所述药物组合物包含根据上述的组合物或免疫细胞， 和可选的 药物学可接受载体。 提供一种改善T淋巴细胞的性质的方法， 包括使根据所述的组合物或所述的免疫细胞 与所述T淋巴细胞接触从而改善其 性质的步骤。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114377118 A 2一种NK免疫细胞药物组合及应用 技术领域 [0001]本发明涉及 细胞治疗技 术领域， 具体是一种NK免疫细胞 药物组合及应用。 背景技术 [0002]细胞工程是生物工程的一个重要组成部分， 已广泛应用于医药、 牧业和环境保护 等许多领， 取 得了较好的社会效益和经效。 [0003]作为一门应用科学和工程技术， 细胞工程形成的历史还很短， 因此定义还不十分 完善。 归納一些学者的意见， 可以总结为细胞工程是以细胞为单位， 事先按照人们的意志， 应用细胞生物学、 分子生物学等理论和技术， 有目的地进行设计， 操作， 使细胞的某些遗传 特性发生改变， 从而达到改良或生产新品种的目的， 以及使细胞增加或重新获得产生某种 特定产物的能力， 从而在离体条件下进 行大量培养、 增殖并提取出对 人类有用的产品。 它包 基因重组、 导入、 扩增和表达， 细胞融合， 细胞微注射生产转基因动物， 植物细胞胞器尤其是 细胞核的移植， 染色体改造， 体外受精， 胚胎移植， 细胞大量培养及将有关细胞产物提取化 所必须的物理和生物化学等理论和技 术。 [0004]研究发现， 肿瘤患者存在DC数量减少及功能缺陷的特点， 肿瘤组织及其周围浸润 DC 的数量、 功能与肿 瘤的发生、 发展、 转移、 预后有着密切的关系。 DC密集浸润的肿 瘤分化 程度高， 预后较好。 而D C轻度浸润的肿瘤常伴有分化程度低和恶性进展。 肿瘤细胞具有较高 水平的Fas(细胞表面的蛋白受体 分子)表达， 能诱导FasL(Fas天然配体)表达的淋巴细胞凋 亡， 并能分泌TGF ‑β、 IL‑10等免疫抑制性细胞因子， 导致抗原提呈能力下降， 从而逃避免疫 攻击。 [0005]近年来， 已经清楚了免疫系统确实识别肿瘤抗原， 但是尽管存在肿瘤抗原， T细胞 却保持静止状态。 基于此现象， 有这样的假说： 患者体内的抗原呈递细胞， 不能正确识别肿 瘤抗原， 将之呈递给T淋巴细胞， 引起肿瘤特异的免疫应答。 近年来， 如何增加抗原呈递细胞 的数量， 提高抗原呈递细胞， 特别是DC细胞摄取、 转运、 呈递抗原、 刺激T细胞的能力， 是目前 肿瘤免疫研究中的一个重点。 [0006]基于对免疫系统细胞的增殖、 分化和功能发现， 其受到一系列细胞因子的调节， 在 这一系列细胞因子中， 具有结构同源性的白细胞介素 ‑12(IL‑12)和白细胞介素 ‑15(IL‑15) 发挥着重要作用。 在临床前模 型中， IL‑15已被证明能增强CD8+T细胞的抗肿瘤免疫能力。 一 项一期临床试验， 评估了IL ‑15在转移 性黑色素瘤和肾细胞癌(肾癌)患者中的安全性、 剂量 和抗肿瘤疗效， 并已开始在NationalInstitutesofHealt h(NIH)登记患者。 目前有两种类型 的白介素 ‑15超级激动剂可用。 一种方法是将IL ‑15和IL‑15Rα‑Fc(R&DSystems)  结合在体 外产生复合物， 称为IL ‑15SA。 另一种叫做ALT ‑803的IL ‑15超激动剂复合物(由   altorbioscience提供)。 目前， 除了加强免疫治疗和疫苗接种外， IL ‑15SA还正在评估其抗 病毒和抗癌活性。 ALT ‑803是一种IL ‑15超激动剂复合物， 包括一个融合到IL ‑15受体α/ igg1fc融合蛋白的IL ‑15突变体(IL ‑15N72D)。 2 017年美国食品和药物管理局(FDA)对  ALT‑ 803进行了快速跟踪， 当时， 正在准备膀胱癌的第三阶段试验。 另外， 基于IL ‑12在抗肿 瘤免说　明　书 1/5 页 3 CN 114377118 A 3