(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111632493.7 (22)申请日 2021.12.28 (71)申请人 江苏医药职业学院 地址 224008 江苏省盐城市解 放南路283号 (72)发明人 杜欣娜　周颖婷　李彤彤　胡明　 (74)专利代理 机构 北京思创大成知识产权代理 有限公司 1 1614 专利代理师 高爽 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/573(2006.01) C12N 15/11(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 45/00(2006.01) (54)发明名称 一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因MARCH F1检 测试剂盒及应用 (57)摘要 本发明属于生物 技术领域， 涉及一种乳 腺癌 辅助免疫治疗靶基因MARCHF1检测试剂盒及应 用。 本发明研究证实乳腺癌中MARCHF1表达显著 上升。 MARCHF1表达水平与免疫微环境指标 StromalSc ore， Immun eScore和ESTIMAT EScore均 呈正相关， 与多种免疫细胞浸润正相关， 且与免 疫检查点基因表达正相关， 并且设计了MARCHF1 检测试剂盒。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图3页 CN 114457155 A 2022.05.10 CN 114457155 A 1.检测MARCHF1表达水平的试剂在制备用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中 的应用。 2.根据权利要求1所述的应用， 其中， 所述检测MARCHF1表达水平包括检测MARCHF1的 mRNA表达水平和/或检测MARC HF1的蛋白表达水平。 3.根据权利要求1所述的应用， 其中， 所述检测MARCHF1表达水平的方法包括： 通过RT ‑ qPCR方法检测乳腺癌和癌旁组织中MARCHF1mRNA的表达量； 通过分子探针技术检测乳腺癌 和癌旁组织中MARCHF1mRNA表达量； 通过免疫组化或Western ‑Blot检测乳腺癌和癌 旁组织 中MARCHF1蛋白表达量。 4.根据权利要求1所述的应用， 其 中， 所述检测MARCHF1表达水平的试剂为靶向MARCHF1 基因DNA序列或mRNA序列的寡核酸探针、 PCR引物， 或者 为靶向MARC HF1的抗体。 5.根据权利要求4所述的应用， 其中， 所述检测MARCHF1表达水平的试剂为SEQ  ID NO： 1 和SEQ ID NO： 2所示核苷酸序列的实时荧 光定量PCR特异性引物。 6.一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因MARCHF1检测试剂盒， 该试剂盒包括： 检测MARCHF1 表达水平的试剂。 7.根据权利要求6所述的试剂盒， 其中， 所述检测MARCHF1表达水平的试剂为靶向 MARCHF1基因DNA序列或mRNA序列的寡核酸探针、 PCR引物， 或者 为靶向MARC HF1的抗体。 8.根据权利要求7所述的试剂盒， 其中， 所述检测MARCHF1表达水平的试剂为具有SEQ   ID NO： 1和SEQ  ID NO： 2所示核苷酸序列的实时荧 光定量PCR特异性引物。 9.根据权利要求6所述的试剂盒， 其中， 所述试剂盒还包括以下组分中的至少一种： Trizol、 异丙醇、 氯仿、 无水乙醇、 无RNA酶水、 随机引物、 5 ×M‑MLV缓冲液、 dNTPs、 RNA酶抑制 剂、 M‑MLV逆转录酶、 具有SEQ  ID NO： 3和SEQ  ID NO： 4所示核苷酸序列的A CTB实时荧光定量 PCR特异性引物。 10.权利要求6 ‑9中任意一项所述的试剂 盒在制备用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗 的制剂中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114457155 A 2一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基因MARCHF1检测试剂盒及应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 具体地， 涉及一种检测MARCHF1表达水平的试剂在制备 用于乳腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂 中的应用， 以及一种乳腺癌辅助免疫治疗靶基 因MARCHF1检测试剂盒及应用。 背景技术 [0002]乳腺癌(Breast  cancer， BRCA)是世界范围内女性常见的恶性肿瘤之一， 其新发率 和死亡率位居 各类癌症首位。 尽管我国乳腺癌发病率相对较低， 但人口基数大， 总体发病人 数多， 发病率有逐年上升的趋势， 且发病年龄呈年轻化趋势。 免疫治疗是一种具有 前景的乳 腺癌治疗新方式， 但存在 治疗响应率不高、 副作用等问题， 因此开 发新型辅助免疫治疗新靶 点对于临床肿瘤免疫 治疗具有重要意 义。 发明内容 [0003]本发明的目的是提供一种乳腺癌免疫治疗新靶点MARCHF1， 并由此提供一种检测 MARCHF1表达水平的试剂在制备用于乳 腺癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应用， 以及 一种乳腺癌辅助免疫 治疗靶基因MARC HF1检测试剂盒及应用。 [0004]本发明的第一方面提供一种检测MARCHF1表达水平的试剂在制备用于乳腺癌检测 和/或辅助免疫 治疗的制剂中的应用。 [0005]进一步地， 所述检测MARCHF1表达水平包括检测MARCHF1的mRNA表达水平和/或检 测MARCHF1的蛋白表达水平。 [0006]进一步地， 所述检测MARCHF1表达水平的方法包括： 通过RT ‑qPCR方法检测乳腺癌 和癌旁组织中MARCHF1  mRNA的表达量； 通过分子探针技术检测乳腺癌和癌旁组织中 MARCHF1 mRNA表达量； 通过免疫组化或Western ‑Blot检测乳腺癌和癌旁组织中MARCHF1蛋 白表达量。 [0007]更具体地， 所述检测MARCHF1表达水平的试剂为MARCHF1基因DNA序列 或mRNA序列 的寡核酸探针、 PCR引物， 或者 为靶向MARC HF1的抗体。 [0008]根据本发明， 优选地， 所述检测 MARCHF1表达水平的试剂为SEQ  ID NO： 1和SEQ  ID  NO： 2所示核苷酸序列的实时荧 光定量PCR特异性引物。 [0009]5’ ‑CTCAGGGGATTTGGCTGACG‑3’(SEQ ID NO： 1) [0010]5’ ‑GTTGTTGGGCTGCTTGCTTT‑3’(SEQ ID NO： 2) [0011]本发明的第二方面提供一种乳腺癌辅助 免疫治疗靶基因MARCHF1检测 试剂盒， 该 试剂盒包括： 检测MARC HF1表达水平的试剂。 [0012]进一步地， 所述检测MARCHF1表达水平的试剂为靶向MARCHF1基因DNA序列或mRNA 序列的寡核酸探针、 PCR引物， 或者 为靶向MARC HF1的抗体。 [0013]具体地， 所述检测MARCHF1表达水平的试剂为具有SEQ  ID NO： 1和SEQ  ID NO： 2所 示核苷酸序列的实时荧 光定量PCR特异性引物。说　明　书 1/5 页 3 CN 114457155 A 3