(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111617729.X (22)申请日 2021.12.27 (71)申请人 广州安捷生物医学技 术有限公司 地址 510700 广东省广州市黄埔区瑞发路1 号自编(1)栋二层20 3房 (72)发明人 周超　安鸿　周玲　杜永彪　 廖鹏云　王桃希　尹海滨　 (74)专利代理 机构 广州嘉权专利商标事务所有 限公司 4 4205 代理人 林德强 (51)Int.Cl. A61K 47/42(2017.01) A61K 45/00(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61P 35/02(2006.01) C12N 15/45(2006.01) C12N 15/861(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 7/01(2006.01) C12N 5/10(2006.01) (54)发明名称 一种利用 外源性抗原和治疗剂联合治疗肿 瘤的方法 (57)摘要 本发明属于基因治疗技术领域， 公开了一种 利用外源性抗原和治疗剂联合治疗肿瘤的方法。 并具体公开了一种组合物， 该 组合物包含外源性 抗原和治疗剂， 治疗剂以所述外源性抗原为靶 点， 对含外源性抗原的组织或细胞进行杀伤， 并 且不作用于不含外源性抗原的组织或细胞， 从而 特异性杀死组织或细胞， 可以有效的杀死肿瘤细 胞， 为肿瘤治疗提供了新思路， 另外外源性抗原 可在不同个体不同类型的肿瘤中表达， 因此是一 种“广谱”的抗肿瘤方法， 具有巨大的经济价值和 社会意义。 权利要求书2页 说明书12页 序列表8页 附图10页 CN 114344472 A 2022.04.15 CN 114344472 A 1.一种组合物， 包 含： 外源性 抗原和治疗剂； 所述外源性 抗原为(1)～(2)中任一种： (1)非人蛋白或多肽； (2)编码(1)中所述非人蛋白或多肽的核酸分子； 所述治疗剂以所述外源性 抗原为靶点， 作用于含所述外源性 抗原的组织或细胞。 2.根据权利要求1所述的组合物， 其特 征在于： 所述非人蛋白或多肽包括但不限于： 细菌、 酵母、 原生动物、 病毒以及人工合成的蛋白 或多肽； 优选地， 所述非人蛋白或多肽为呼吸道合胞病毒的F蛋白。 3.根据权利要求2所述的组合物， 其特 征在于： 所述外源性 抗原通过递送载体或电穿 孔转染到所述组织或细胞； 优选地， 所述外源性 抗原包封在递送载体内； 优选地， 所述 递送载体为肿瘤选择性 递送载体； 优选地， 所述肿瘤选择性递送载体为天然聚合物、 合成聚合物、 阳离子肽、 细胞穿透肽、 生物可降解的纳米颗粒、 脂质体、 脂质复合物、 聚合复合物、 胶束、 树枝状聚合物、 凝胶、 粘膜 粘着剂、 硅纳米 针、 纳米金颗粒、 外泌体、 病毒或假病毒。 4.根据权利要求3所述的组合物， 其特 征在于： 所述病毒为溶瘤病毒； 优选地， 所述溶瘤病毒为腺病毒、 痘苗病毒、 辛德毕斯病毒、 塞内加谷病毒、 柯萨奇病 毒、 麻疹病毒、 呼肠 孤病毒、 牛痘病毒、 新城疫病毒、 水疱性口炎病毒、 单纯疱疹病毒、 脊髓灰 质炎病毒、 流感病毒、 腮腺炎病毒和细小病毒中的至少一种， 进一 步为腺病毒。 5.根据权利要求1所述的组合物， 其特 征在于： 所述治疗剂包括CAR ‑T细胞、 TCR ‑T细胞、 CAR ‑NK细胞、 抗原特异性T细胞、 抗原特异性DC 细胞、 小分子靶向药和单 克隆抗体； 优选地， 所述治疗剂为CAR ‑T细胞和/或单 克隆抗体； 优选地， 所述治疗剂为CAR ‑T细胞。 6.根据权利要求5所述的组合物， 其特 征在于： 所述CAR‑T细胞的嵌合 抗原受体包 含靶向外源性 抗原的抗原结合结构域； 优选地， 所述嵌合抗原受体还包含跨膜结构域， 共刺激结构域和细胞内信号传导结构 域； 优选地， 所述嵌合 抗原受体的氨基酸序列如SEQ  ID NO： 4所示。 7.根据权利要求1～6任一项所述的组合物， 其特 征在于： 所述组合物包含表达呼吸道合胞病 毒的F蛋白的溶瘤腺病 毒和靶向呼吸道合胞病 毒的 F蛋白的CAR ‑T细胞。 8.根据权利要求7 所述的组合物， 其特 征在于： 所述溶瘤腺病毒的制备 方法， 包括如下步骤： S1： 将包含呼吸道合胞病毒F蛋白的目的基因插入载体中， 得到包含目的基因的载体， 单酶切所述包 含目的基因的载体， 得到线性 化的包含目的基因的载体； S2： 将线性化的包含目的基因的载体和含5型腺病毒骨架的pAdEasy ‑1质粒转化感受态权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114344472 A 2细胞， 得到 重组腺病毒载体， 单酶切所述重组腺病毒载体， 得到线性 化的重组腺病毒载体； S3： 将线性 化的重组腺病毒载体转染至细胞， 得到溶瘤腺病毒； 优选地， 所述靶向呼吸道合胞病毒F蛋白的CAR ‑T细胞的制备 方法， 包括如下步骤： S1： 将含有靶向呼吸道合胞病毒F蛋白的抗原结合结构域的嵌合抗原受体插入慢病毒 载体， 得到插入含有靶向呼吸道合胞病毒F蛋白的抗原结合结构域的嵌合抗原受体的慢病 毒载体； S2： 将S1得到的慢病毒载体与包装质粒混合， 得到包装系统； 将包装系统转染入 HEK293T细胞培 养， 得到慢病毒； S3： 将慢病毒感染T淋巴细胞， 得到靶向呼吸道合胞病毒F蛋白的CAR ‑T细胞。 9.权利要求1～8中任一项所述的组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特 征在于： 所述肿瘤包括肺癌、 黑色素瘤、 头颈部癌症、 肝癌、 脑癌、 结直肠癌、 膀胱癌、 乳腺癌、 卵 巢癌、 子宫癌、 宫颈癌、 淋巴癌、 胃癌、 食道癌、 肾癌、 前列腺癌、 胰腺癌和白血病。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114344472 A 3