(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111669792.8 (22)申请日 2021.12.31 (71)申请人 北京大学 地址 100191 北京市海淀区学院路38号北 京大学医学部 申请人 哈药(北京)生物科技有限公司 (72)发明人 杨振军　潘宇飞　管静　朱月洁　 (74)专利代理 机构 北京科龙寰宇知识产权代理 有限责任公司 1 1139 代理人 马鑫 (51)Int.Cl. A61K 9/127(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61K 47/20(2006.01) A61K 47/22(2006.01)A61K 47/24(2006.01) A61P 1/16(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种反义核酸药物的包 载方法、 由该方法制 备得到的药物制剂及其在肝癌治 疗中的应用 (57)摘要 本发明公开了一种反义核酸药物的包载方 法、 由该方法制备得到的药物制剂及其在肝癌治 疗中的应用。 本发明首先提出了一种反义核酸药 物的包载方法， 然后将针对于治疗肝癌的反义核 酸CT102的包 载方法和化学修饰方法结合起来制 备得到了一种用于抗肝癌的药物制剂， 研究发 现， 经包载后的CT102比裸给药物显示出更高的 肝癌抑制活性及体内半衰期； 同时， 包载的CT102 在二分之一量情况下制剂， 仍显示出明显高于裸 给CT102的抗肝癌活性。 在此基础上， 经修饰后的 CT102MOE5比CT102显示出更 高的肝癌抑制活性及 体内半衰期。 本发明的提出为抗肝癌反义核酸药 物在临床的广泛应用奠定了基础， 同时在基因治 疗领域也将具有广泛的应用前 景。 权利要求书2页 说明书12页 附图8页 CN 114246829 A 2022.03.29 CN 114246829 A 1.一种反义核酸药物的包载方法， 其特征在于， 包括将所述的反义核酸药物采用一种 递送载体进行包载的步骤， 所述的递送载体包括中性碱基脂质体DNCA、 阳离子脂质体CLD及 辅助脂材D SPE‑PEG， 所述DNCA、 CLD、 D SPE‑PEG结构式如下 所示： 2.如权利要求1所述的包载方法， 其特征在于， 所述的DNCA、 CLD、 DSPE ‑PEG与反义核酸 物质的量之比为20 ‑40:5‑30:0.3‑0.6:1。 3.如权利要求2所述的包载方法， 其特征在于， 所述的DNCA、 CLD、 DSPE ‑PEG与反义核酸 物质的量之比为3 0:30:0.6:1、 3 0:15:0.45:1、 3 0:7.5:0.38 :1或20:20:0.4:1。 4.如权利要求1所述的包载方法， 其特征在于， 所述的反义核酸药物为抗肝癌反义核酸 CT102或其 化学修饰物。 5.如权利要求4所述的包载方法， 其特征在于， 经化学修饰后的抗肝癌反义核酸CT102 的序列选自以下序列中的任意 一种： CT102OMe3： UmesCmesCmesTsCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsTsUmesCmesAme； CT102OMe4： UmesCmesCmesUmesCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsUmesUmesCmesAme； CT102OMe5： UmesCmesCmesUmesCmesCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCmesUmesUmesCmesAme； CT102MOE3： UesmCesmCesUsCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsUsUesmCesAe； CT102MOE4： UesmCesmCesUesCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsUesUesmCesAe； CT102MOE5‑1： UesmCesmCesUesmCesCsGsGsAsGsCsCsAsGsAsmCesUesUesmCesAe； 或 CT102MOE5： TesmCesmCesTesmCesmCSGSGSASGSmCSmCSASGSASmCesTesTesmCesAe 其中： me表示2 ′ ‑O‑Me修饰；mC表示5‑甲基胞嘧啶修饰； e表示2 ′ ‑O‑MOE修饰； s表示磷硫 代修饰； 2 ′ ‑O‑Me或2′ ‑O‑MOE的结构如下 所示： 6.如权利要求5所述的包载方法， 其特征在于， 所述的经化学修饰后的抗肝癌反义核酸 CT102为CT102MOE5， CT102MOE5的序列为： TesmCesmCesTesmCesmCSGSGSASGSmCSmCSASGSASmCesTesT esmCesAe。 7.如权利要求1 ‑6任一项所述的包载方法， 其特征在于， 包括以下步骤： 将反义核酸药 物溶液加 入到无菌无酶的EP管中， 加入一部分Opti溶液稀释， 加 入DNCA溶液和CLD溶液， 涡 旋混匀， 再加入D SPE‑PEG溶液， 补足剩余Opti溶 液， 50℃超声20mi n即可使用。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114246829 A 28.按照权利要求1 ‑7任一项所述的包载方法制备得到的含有反义核酸药物的脂质复合 物。 9.一种用于抗肝癌的药物制剂， 其特征在于， 所述的药物制 剂中包括权利要求8所述的 含有反义核酸药物的脂质复合物， 其中所述的反义核酸药物为抗肝癌反义核酸CT102或其 化学修饰物， 经化学修饰后的抗 肝癌反义核酸CT102的序列选自以下序列中的任意 一种： CT102OMe3： UmesCmesCmesTsCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsTsUmesCmesAme； CT102OMe4： UmesCmesCmesUmesCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsUmesUmesCmesAme； CT102OMe5： UmesCmesCmesUmesCmesCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCmesUmesUmesCmesAme； CT102MOE3： UesmCesmCesUsCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsUsUesmCesAe； CT102MOE4： UesmCesmCesUesCsCs GsGsAsGsCsCsAsGsAsCsUesUesmCesAe； CT102MOE5‑1： UesmCesmCesUesmCesCsGsGsAsGsCsCsAsGsAsmCesUesUesmCesAe； 或 CT102MOE5： TesmCesmCesTesmCesmCSGSGSASGSmCSmCSASGSASmCesTesTesmCesAe 其中： me表示2 ′ ‑O‑Me修饰；mC表示5‑甲基胞嘧啶修饰； e表示2 ′ ‑O‑MOE修饰； s表示磷硫 代修饰。 10.权利要求9所述的药物制剂在制备治疗原发性 肝癌药物中的用途。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114246829 A 3