ICS 11.220 B 41 DB21 辽 宁 省 地 方 标 准 DB21/T 3095—2018 犬非结核细菌性肺炎诊断技术规范 The technical Specification for diagnostic bacterial of Non-tuberculosis mycobacteria pneumoniae for canine 2018 - 12 - 25 发布 辽宁省市场监督管理局 2019 - 01 - 25 实施 发 布 DB21/T 3095—2018 目 前 次 言 ............................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 3.1 3.2 3.3 3.4 肺炎 pneumonia ............................................................... 非结核细菌性肺炎 bacterial of Non-tuberculosis mycobacteria pneumoniae.... 感染 infection ............................................................... 16SrRNA ....................................................................... 1 1 1 1 4 诊断 .............................................................................. 1 4.1 流行病学特点 .................................................................. 4.2 临床症状诊断 .................................................................. 4.2.1 呼吸系统症状 .............................................................. 4.2.2 发热及相关症状 ............................................................ 4.2.3 其它方面症状 .............................................................. 4.3 影像学特征 .................................................................... 4.4 外周血检查特征 ................................................................ 4.5 病原学检测 .................................................................... 4.5.1 细菌分离培养和涂片镜检 .................................................... 4.5.2 生化试验 .................................................................. 4.5.3 致病性检验 ................................................................ 4.5.4 分子生物学鉴定 ............................................................ 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 5 诊断结果判定 ...................................................................... 3 5.1 初步诊断 ...................................................................... 4 5.2 确诊 .......................................................................... 4 6 鉴别诊断 .......................................................................... 4 附录 A（资料性附录） 细菌性肺炎主要致病菌分离鉴定具体方法和结果判定依据 .............. 5 附录 B（资料性附录） 犬细菌性肺炎的鉴别诊断 ......................................... 10 I DB21/T 3095—2018 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草 本标准由辽宁省畜牧兽医局提出并归口。 本标准起草单位：锦州医科大学、鞍山动物检疫站、本溪市动物疫病预防控制中心等单位。 本标准主要起草人：周铁忠、毕聪明、盛鹏飞、李春宵、陈勇、张建平、马强、赵岩、郭维军、杨 丽、赵刚、刘建华、朱绪银、高蕾、李德臣、金娜、高柏华、张娜、宋志永、宋宝强、高峰、孙传禄、 徐畅、何礼。 II DB21/T 3095—2018 犬非结核细菌性肺炎诊断技术规范 1 范围 本标准规定了犬非结核细菌性肺炎诊断的技术方法、诊断依据和鉴别诊断。 本标准适用于我省动物诊疗单位及兽医工作者对犬非结核细菌性肺炎的诊断。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的 修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用 于本标准。但是，鼓励根据本标准达成协议的各方研究使用这些文件的最新版本。 GB/T6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 肺炎 pneumonia 指终末气道、肺泡和肺间质的炎症，可由病原微生物、理化因素、免疫损伤、过敏及药物所致。按 病因可分为细菌性肺炎（肺炎链球菌、支气管败血波氏杆菌、金黄色葡萄球菌等），非典型病原体所致 肺炎（支原体、衣原体、军团菌），病毒性肺炎，肺真菌性肺炎，其他病原体所致肺炎（立克次氏体、 弓形体、肺寄生虫等），理化因素所致肺炎。 3.2 非结核细菌性肺炎 bacterial of Non-tuberculosis mycobacteria pneumoniae 细菌性肺炎指由肺炎链球菌、支气管败血波氏杆菌、金黄色葡萄球菌等主要病原菌引起的肺炎，不 包括结核分枝杆菌所致的肺结核。为了严格区分本标准将细菌性肺炎定义为“非结核细菌性肺炎”。 3.3 感染 infection 病原微生物侵入动物机体，并在一定部位定居，生长繁殖，从而引起机体一系列病理反应，这个过 程称为感染。 3.4 16SrRNA 16SrRNA基因是细菌上编码rRNA相对应的DNA序列，存在于所有细菌的基因组中；16SrRNA具有高度 的保守性和特异性以及该基因序列足够长（包含约50个功能域）等特征，所以，16SrRNA基因检测技术 可做为病原菌检测和鉴定的主要方法，应用该技术可以实现对病原菌进行快速、微量、准确简便地分类 鉴定和检测。 4 诊断 1 DB21/T 3095—2018 依据流行病学特点、临床症状及影像学特征等作出初步诊断，确诊需做病原学检测。 4.1 流行病学特点 在发病前有接触感染病原微生物的病犬或带菌犬，如引入新的病犬未隔离就混群，或居住或到过细 菌性肺炎流行的区域；发病率高，但致死率低，主要为4月龄以内的幼犬发病，成年犬少见发病；发病 前有春秋季节交替、环境温度突变、长途运输等应激因素，导致抵抗力下降，诱发条件性致病菌大量繁 殖而发病。 4.2 临床症状诊断 4.2.1 呼吸系统症状 表现为咳嗽，痰液脓汁样黄白色或铁锈样或带血，有时流鼻汁；呼吸急促，呼吸困难，如舌头青紫 及鼻翼扇动，重者呈点头状呼吸、呼气时间延长、出现胸壁吸气性凹陷或呻吟等；胸部听诊肺泡呼吸音 消失，支气管呼吸湿啰音，健康部位则肺泡音高朗，继发胸膜炎可听到胸膜摩擦音；胸部叩诊有局灶性 或大面积浊音区。 4.2.2 发热及相关症状 体温升高至 39.5 ℃ 以上，表现精神沉郁，食欲减退或废绝，结膜潮红或蓝紫。 4.2.3 其它方面症状 重症肺炎引发心力衰竭，出现心率加快，心率不齐，脉搏微弱，可视粘膜明显发绀，颜面眼睑或双 下肢水肿等症状。引发缺氧中毒性脑病时出现烦躁、眼球上窜、凝视，昏睡、昏迷、惊厥等症状，发生 缺氧中毒性肠麻痹时出现频繁呕吐、严重腹胀等症状。 4.3 影像学特征 胸部X线检查显示肺纹理增粗，片状、斑片状、大片状阴影和实变影，可伴有支气管充气征、液气 囊腔和肋膈角胸腔积液。 4.4 外周血检查特征 采集犬前肢头静脉（前臂头静脉）或后肢隐静脉或颈静脉血液样本1.0ml，采用血液分析仪或人工 计数方法进行外周血白细胞计数和分类计数。应用血细胞分析仪计数方法按其说明书处理血液样本，进 样检测，仪器自动分析、打印结果。人工计数方法取1滴外周血，滴于洁净无油脂的玻片制取血涂片， 应用瑞氏（Wright's）染色法和姬姆萨（Giemsa）染色法进行染色，通过显微镜观察染色血涂片，计算 血液中各类白细胞的数量和百分率。 细菌性肺炎白细胞计数明显升高，其中中性粒细胞比例显著升高，并有核左移现象。 4.5 病原学检测 4.5.1 细菌分离培养和涂片镜检 无菌操作采取气管吸取物、肺泡灌洗液、胸水、脓液和血液，于血液肉汤培养基中37℃增菌10h后 再划线接种于血液琼脂平板和胰蛋白胨大豆琼脂平板培养基，37℃培养18～24h后