ICS 71.100.40 Y 43 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB13/T 2590—2017 果蔬清洗剂中双酚 A、双酚 F 的测定 高效液相色谱法 Determination of bisphenol A and bisphenol F in fruit and vegetable detergents high performance liquid chromatography 2017 - 11 - 22 发布 2017 - 12 - 22 实施 河北省质量技术监督局 发 布 DB13/T 2590—2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由河北省质量技术监督局提出并归口。 本标准起草单位：河北省环保产品质量监督检验院。 本标准主要起草人：蔡立鹏、刘燕、韩贞年、李小英、刘肖肖、张珺橦、张学晶、赵晓甫。 I DB13/T 2590—2017 果蔬清洗剂中双酚 A、双酚 F 的测定 高效液相色谱法 1 范围 本标准规定了果蔬清洗剂中双酚A、双酚F高效液相色谱测定方法的试剂或材料、仪器与设备、样 品、试验步骤、试验数据处理以及精密度。 本标准适用于果蔬清洗剂中双酚A、双酚F含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 果蔬清洗剂中的双酚A、双酚F经乙醇振荡提取，旋转蒸发至干，甲醇溶解定容后，采用C18色谱柱 分离，以甲醇-水为流动相，荧光检测器检测，进行高效液相色谱分析，外标法定量。 4 试剂或材料 除非另有规定，仅使用分析纯试剂。 4.1 水，GB/T 6682，一级。 4.2 无水乙醇：色谱纯。 4.3 甲醇：色谱纯。 4.4 双酚 A（C15H16O2，CAS：08-50-7）：纯度大于 99.0%，0℃～4℃储藏。 4.5 双酚 F（C13H12O2，CAS：620-92-8）：纯度大于 99.0%，0℃～4℃储藏。 4.6 标准储备液（1g/L）：称取双酚 A（4.4）、双酚 F 标准品（4.5）各 50mg（精确至 0.1mg）于 50mL 容量瓶中，用甲醇（4.3）定容至刻度，摇匀，于 4℃冰箱中保存。 4.7 标准中间液（1mg/L）：准确吸取各标准储备液（4.6）0.1mL 分别于 100mL 容量瓶中，用甲醇（4.3） 定容至刻度，摇匀，于冰箱中 4℃保存。 4.8 混合标准使用液：分别准确吸取标准中间液 0.3mL、0.5mL 、1mL、2mL、4mL、8mL，于 6 个 10mL 容量瓶中，甲醇（4.3）定容，此标准系列的浓度为 0.03 mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.m4g/L、 0.8mg/L。 1 DB13/T 2590—2017 5 仪器与设备 5.1 高效液相色谱仪：配荧光检测器。 5.2 电子天平：感量 0.001g 和 0.0001g。 5.3 快速混匀器。 5.4 离心机。 5.5 旋转蒸发仪。 5.6 微孔滤膜：有机系，0.45μ m。 6 样品 6.1 提取 准确称取果蔬清洗剂样品1g（精确至1 mg）于50 mL圆底烧瓶中，加入10mL无水乙醇（4.2），用 快速混匀器（5.3）充分振荡溶解，于50℃旋转蒸发至干（如有残留水分，可加入5 mL无水乙醇（4.2） 进行溶剂替换，直至蒸干为止），蒸发残渣记为M。 6.2 定容 在残渣M中加入5 mL甲醇（4.3），充分振荡溶解并转移至50 mL离心管中，再用5 mL甲醇（4.3） 洗涤圆底烧瓶，合并洗涤液，于5000r/min离心3min，转移上清液至10 mL容量瓶，用甲醇定（4.3）容 至刻度，取1 mL过0.45μm滤膜，进行高效液相色谱分析。 7 试验步骤 7.1 色谱参考条件 a) b) c) d) e) f) 色谱柱：C18 色谱柱，柱长 250mm，柱内径 4.6mm，粒度 5μ m，或同等性能的色谱柱； 流动相：甲醇-水（70+30，体积比）； 流速：1.0mL/min； 柱温：30℃； 进样体积：10μ L； 荧光检测器：激发波长 227nm，发射波长 313nm。 7.2 定量分析 在7.1仪器条件下，对标准溶液和试样溶液进行检测，分别以标准样品中双酚A、双酚F的浓度为横 坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。以保留时间定性（双酚A、双酚F色谱分离图见附录A），外标 法定量。 8 试验数据处理 果蔬清洗剂中双酚A、双酚F含量X按式（1）计算： 2 DB13/T 2590—2017 …………………………………………(1) 式中： X——果蔬清洗剂中双酚A、双酚F的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）； c——从标准工作曲线查出的试样溶液中双酚A、双酚F的浓度，单位为毫克每升（mg/L）； V——试样最终定容体积，单位为毫升（mL）； m——试样质量，单位为克（g）。 计算结果保留至小数点后三位。 双酚A、双酚F的检出限为0.1mg/kg，定量限为0.3 mg/kg。 9 精密度 同一实验室，由同一操作者使用相同设备，按相同的测试方法，并在短时间内对同一被测对象相 互独立进行测试获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的10%，以大于 这两个测定值的算术平均值的10%的情况不超过5%为前提。 3 DB13/T 2590—2017 AA 附 录 A （资料性附录） 双酚 A、双酚 F 标准色谱分离图 浓度为0.1 mg/L双酚A、双酚F标准色谱见图A.1。 双酚F 3.60 双酚A EU 2.70 1.80 0.90 0.00 0.00 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 min 6.00 7.00 8.00 注：保留时间为双酚F为5.162min、双酚A为7.398min。 图A.1 浓度为0.1mg/L的双酚A、双酚F标准色谱图 _________________________________ 4 9.00 10.00