ICS 65.020.30 B 43 DB13 河 北 省 地 方 标 准 DB13/T 2633—2017 猪冷冻精液 2017 - 11 - 22 发布 2017 - 12 - 22 实施 河北省质量技术监督局 发 布 DB13/T 2633—2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。 本标准由河北省农业厅提出。 本标准起草单位：三河市百洲科技有限公司。 本标准参与起草单位:河北省畜牧兽医局、廊坊市畜牧站。 本标准主要起草人：周学军 、周米、肖静、顾传学、张力圈、苗玉涛、王志刚、王泽奇、张守全。 I DB13/T 2633—2017 猪冷冻精液 1 范围 本标准规定了猪冷冻精液产品的要求，抽样，试验方法，判定规则、标志及包装、贮存和运输。 本标准适用于猪冷冻精液产品。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4143-2008 牛冷冻精液 GB/T 5458 液氮生物容器 GB 23238-2009 种猪常温精液 3 术语和定义 GB 23238-2009界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 精子活力 sperm motility 在36℃环境下直线前进运动精子占总精子数的百分率。 3.2 畸形精子 abnormal sperm 头、体、尾的形态变异的精子。头部畸形有巨大头、无定形、双头等；体部畸形有体部粗大、折 裂、不完整等；尾部畸形有卷尾、双尾、缺尾等。 3.3 冷冻精液 frozen semen 经特殊方法处理，经超低温冷冻后可在液氮中（-196℃）长期保存种猪精液。 3.4 精子密度 sperm Censity 每毫升精液的精子数。 4 要求 4.1 原精液要求 1 DB13/T 2633—2017 4.1.1 种猪 来源于具有种用价值，体型外貌和生产性能等符合种用要求，三代系谱资料齐全，体质健康，不 患有国家或农业部已发布的动物防疫法中所明确的二类疾病的种猪。 4.1.2 商品用或其他用种猪 应符合国家相关规定。 4.1.3 原精液 色泽为灰白色或乳白色，精子活力≥74 %，精子密度≥2亿个/mL，精子畸形率≤5 %。 4.2 猪冷冻精液要求 4.2.1 外观 细管无裂痕，两端封口严密。 4.2.2 剂型、剂量 0.5 ml细管和1 ml细管。 4.2.3 每剂量冻精解冻后要求 4.2.3.1 精子活力≥60 %。 4.2.3.2 直线前进运动精子数≥1.8 亿个。 4.2.3.3 精子畸形率≤20 %。 4.2.3.4 细菌数≤800 个。 5 抽样 按照GB 23238-2009中第5章进行。 6 试验方法 6.1 冷冻精液试样制备 6.1.1 样品贮存 存放冷冻精液的低温容器质量应符合GB/T 5458规定，使用前经过清洗后加入新鲜液氮，样品浸泡 在液氮中。取放样品时在空中暴露时间不得超过5s。由专人保管样品，样品不允许脱离液氮，抽样登 记单与样品随行。样品包装、标记应保持原样。 6.1.2 样品解冻检测 三支细管分别直接置于50 ℃恒温水浴中解冻16 s，解冻三支混合精液后，取精液约50 µL 置于载 玻片上加盖玻片，立即放在载物台上，温度保持37℃，用200 X～400 X显微镜观察活力，也可通过电视 2 DB13/T 2633—2017 显微装置在荧光屏上观察活力。每样片观察3个视野，并应观察不同液层内的精子运动状态，进行全面 评定。检验有效时限为解冻后5 min～60 min。 6.2 测定 6.2.1 外观测定 采用目测法进行。 6.2.2 剂量、精子活力、直线前进运动精子数、精子畸形率的测定 按GB 23238-2009附录A中规定的方法进行。 6.2.3 细菌数测定 按GB 4143-2008附录B中规定的方法进行。 7 检验规则 7.1 检验分类 按GB 23238-2009中6.2进行，其中：常规检验项目中为本标准4.2.1和4.2.2；型式检验项目中为 本标准4.2.1～4.2.3。 7.2 判定 按GB 23238-2009中第7章进行。 8 标志、包装 8.1 标志 8.1.1 品种 公猪的品种以代号表示,具体品种代号见附录A。 8.1.2 内容 细管冻精应在管壁（或包装袋）上印制以下内容，并且印制标识要清楚： a) 生产厂家； b) 公猪品种； c) 公猪号； d) 生产日期或批次； e) 质检员。 8.2 包装 采用塑料管或灭菌纱布袋包装，每一包装量不得超过100支。 9 贮存、运输 3 DB13/T 2633—2017 9.1 贮存 9.1.1 猪冷冻精液应存放在液氮生物容器中，液氮生物容器应在使用前后彻底检查和清洗。清理时， 先用中性洗涤剂刷洗，再用 40℃～45℃温水冲洗干净，在室温下放置 48 h 以上再充入液氮。 9.1.2 应经常检查液氮生物容器的状况，如发现液氮消耗显著增加或容器外挂霜等异常情况，应立即 更换。长期贮存冻精的容器，应定期清理和洗涮。 9.1.3 取放冷冻精液之后，应保证冻精置于液氮面以下，再盖好容器塞，防止液氮蒸发或异物浸入。 9.1.4 取放冻精过程中，只能将提放冻精的提桶或包装物提到容器颈的基部，不得提到颈口外，动作 要迅速；若离开液氮面 10 秒尚未取放完，应放回液氮中浸泡一下再继续取放。贮存的冻精需要向另一 个容器转移时，在容器外停留时间不得超过 5 秒。 9.1.5 大型液氮生物容器，应有冻精分类存放位置的详细图表，分别注册，登记清楚，防止不同品种 的冻精混淆。 9.2 运输 9.2.1 在移动液氮罐时应把握其手柄，轻拿轻放，防止碰撞倾斜，保护好真空抽气阀。 9.2.2 装车运输时，贮存冻精的生物容器不可横放、叠放或倒置，要铺垫厚软垫子，适当固定，并根 据运输条件用厚纸箱或木箱装好，牢固地系在车上，以免颠簸冲撞。 9.2.3 运输冻精时，应有专人负责，办好交接手续（应附带精液运输、交接卡片）。途中应及时检查 和添加液氮。 4 DB13/T 2633—2017 AA 附 录 A （规范性附录） 公猪的品种代号 A.1 公猪品种代号 公猪品种代号见表A.1。 表 A.1 公猪品种代号 公猪品种 品种代号 长白猪 LL 大约克夏猪 YY 杜洛克猪 DD 其他公猪 标明品种或杂交组合品种 _________________________________ 5