ICS 65.120 B 25 备案号：53568-2017 内 蒙 DB15 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 1171—2017 奶牛日粮样本营养品质和平衡度评定 Evaluation of Nutritional Quality and Balance in Dietary Samples for Dairy Cows 2017-02-25 发布 内蒙古自治区质量技术监督局 2017-05-25 实施 发 布 DB15/T 1171—2017 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语与定义 ........................................................................ 1 4 主要试剂与材料 .................................................................... 2 5 主要仪器设备 ...................................................................... 3 6 日粮样本营养品质评定方法 .......................................................... 3 7 奶牛日粮样本营养平衡度评定方法 .................................................... 6 I DB15/T 1171—2017 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。 本标准由内蒙古自治区农牧业厅归口。 本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、黑龙江赛诺绿能种羊科技有限公司、乌兰察布市农 牧业科学研究院、蒙羊牧业股份有限公司。 本标准主要起草人员：卢德勋、胡红莲、王丽芳、马燕芬、高民、姚飞、云伏雨、冀芳。 II DB15/T 1171—2017 奶牛日粮样本营养品质和平衡度评定 1 范围 本标准规定了奶牛日粮样本营养品质和平衡度的定义、评定方法及评定标准。 本标准适用于对奶牛日粮样本营养品质和平衡度的评定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6432 饲料中粗蛋白测定方法 GB/T 6433 饲料中粗脂肪的测定 GB/T 6435 饲料中总水分和其他挥发性物质含量的测定 GB/T 6436 饲料中钙的测定 GB/T 6437 饲料中总磷量的测定 分光光度法 GB/T 6438 饲料中粗灰分的测定 GB/T 14699.1 饲料采样 GB/T 20195 动物饲料试样的制备 GB/T 20806 饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定 NY/T 1459 饲料中酸性洗涤纤维的测定 3 术语与定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 日粮 diet 根据日粮配方中各种饲料原料的百分比配制并加工，提供给动物饲喂的饲料混合料。 3.2 代谢能 metabolizable energy (ME) 从日粮总能中减去粪能、尿能和甲烷能后的能值，单位为兆焦每千克（MJ/kg）。 3.3 净能 net energy （NE） 从动物食入饲料消化能中扣除尿能和被进食饲料在体内消化代谢过程中的体增热（HI）即为饲料净 能值，也是单位进食饲料能量在体内的沉积量。单位为兆焦每千克（MJ/kg）。 1 DB15/T 1171—2017 3.4 泌乳净能 net energy for lactation (NEL) 采食每千克日粮在乳中的沉积能量，单位为兆焦每千克（MJ/kg）。 3.5 产乳潜在效率指数 milking potential efficiency index （MPEI） 每千克日粮的产乳潜在能力，单位为千克每千克（kg/kg）。 3.6 日粮营养品质 diet nutritional quality 由日粮营养组成和营养特性以及日粮和动物相互作用而形成的日粮综合饲用价值。 3.7 日粮营养平衡指数 diet nutrient balance index (DNBI) 日粮内各种营养素相对比值的一个整体计算值，其对评定日粮营养品质具有重要的实用价值，是保 证动物获得较好的日粮利用效率和理想的生产性能的重要技术指标。 4 主要试剂与材料 如无特别说明，所有试剂均为分析纯。 K2HPO4 ； KH2PO4 ； (NH4)2SO4 ； NaCl ； MgSO4·7H2O ； Na2CO3 ； EDTA ； FeSO4·7H2O ； MnCl2·4H2O ； ZnSO4·7H2O ； H3BO3 ； COCl2·6H2O ； CuCl2·2H2O ； NiCl2·6H2O ； NaMoO4 ； Na2S·9H2O ； 1%刃天青 。 2 DB15/T 1171—2017 5 主要仪器设备 实验室用样品粉碎机； 分析天平（感量0.0001）； 烘箱（室温至300 ℃）； 进口玻璃注射器：100 mL（最小分度1 mL）； 培养瓶（100 mL）； 电热恒温水浴培养箱（37 ℃～39 ℃）； 样品筛（孔径40目）； CO2气瓶。 6 日粮样本营养品质评定方法 6.1 采样 按照GB/T 14699.1 的规定执行，采样量为500 g/个样。 6.2 样品制备 日粮样品根据GB/T 20195 制备，置于烘箱内于65 ℃干燥至恒重，过40目筛。 6.3 检测方法 日粮中粗蛋白含量测定按照GB/T 6432 执行； 日粮中粗脂肪含量测定按照GB/T 6433 执行； 日粮中水分含量测定按照GB/T 6435 执行，再用100减去日粮中水分计算日粮干物质含量； 日粮中钙含量测定按照GB/T 6436 执行； 日粮中磷含量测定按照GB/T 6437 执行； 日粮中粗灰分含量测定按照GB/T 6438 执行； 日粮中中性洗涤纤维含量测定按照GB/T 20806 执行； 日粮中酸性洗涤纤维含量测定按照NY/T 1459 执行； 6.4 参数测定与计算方法 6.4.1 NEL 6.4.1.1 缓冲液制备 正式实验前一天，配制好缓冲液中的缓冲试剂和常量元素溶液（A液）、微量元素溶液（B液）、还 原剂溶液（C液）和1%刃天青溶液（D液）。 6.4.1.1.1 缓冲试剂和常量元素溶液（A 液） 称取K2HPO4 382.51 mg，KH2PO4 292 mg，(NH4)2SO4 480 mg，NaCl 200 mg，MgSO4·7H2O 100 mg和 Na2CO3 4000 mg。将上述试剂混合后加入蒸馏水定容至1000 mL。该溶液在使用前一天配制待用。 3 DB15/T 1171—2017 6.4.1.1.2 微量元素溶液（B 液） 称取EDTA 500 mg，FeSO4·7H2O 200 mg，MnCl2·4H2O 200 mg，ZnSO4·7H2O 10 mg，H3BO3 30 mg， CoCl2·6H2O 20 mg，CuCl2·2H2O 1 mg，NiCl2·6H2O 2 mg和NaMoO4 3 mg。将上述试剂混合后加蒸馏 水定容至1000 mL。持续通入CO2 18个小时后，盖严瓶口，置于冰箱备用。 6.4.1.1.3 还原剂溶液（C 液） 称取 25 g Na2S·9H2O 置于 100 mL 容量瓶中加 80 mL 蒸馏水溶解后定容至 100 mL，持续充入 CO2 20 分钟后，盖严瓶口，置于冰箱备用。还原剂溶液在每次试验前临时配置。 6.4.1.1.4 1%刃天青溶液（D 液） 称取 100 mg 刃天青置于 100 mL 容量瓶中加蒸馏水定容至 100mL，盖严瓶口，置于冰箱备用。 6.4.1.1.5 缓冲液配制 准确量取988 mL A液，10 mL B液，经充分混和后持续通入CO2 18小时，并于培养前1小时加入2 mL C液，数滴D液，充分混合均匀，置于39 ℃水浴中。 6.4.1.2 日粮样本称量和设置 准确称取2.0 g待测日粮样本，置于100 mL培养瓶底部，放入39 ℃恒温水浴培养箱中预热，每个样 本设3个平行样。同时每批样本设三个空白对照，即不加待测日粮，仅有瘤胃液和缓冲液，作为产气量 的校正。 6.4.1.3 瘤胃液收集及处理 晨饲前采集至少3头牛的瘤胃液，置于经预热达39 ℃并通有CO2的保温瓶中，盖严瓶口，迅速返回 实验室。用4层纱布过滤瘤胃液，合并滤液，在39 ℃恒温，混匀，迅速分装至上述已预热好并通有CO2 的培养瓶中（每个培养瓶加20 mL瘤胃液），置于39 ℃水浴中。 6.4.1.4 体外培养 向保存于39 ℃水浴中的100 mL培养瓶中加入40 mL缓冲液，混合均匀后，将培养瓶与进口注射器 连接，将注射器中的气体全部排出，密封，记录初始刻度后，置于39 ℃恒温水浴培养箱中培养，并在 开始培养后分别记录每个注射器中2 h、4 h、6 h、8 h、12 h、18 h、24 h的气体产生量。 4 DB15/T 1171—2017 6.4.1.5 NEL 计算 净产气量按⑴式计算，ME按⑵式计算，NEL按⑶式计算： 产气量（GP）计算公式： GPt = 2.0  Vt  V0  Vi  ………………………………………………………⑴ W 式中： GPt －—待测日粮在t时刻的净产气量，单位为 mL； Vt －—待测日粮发酵t小时后的产气量，单位为 mL； V0 －—待测日粮在培养开始时的产气量，单位为 mL； Vi －—空白样品发酵t小时后的产气量，单位为 mL； W －—样品干物质重，单位为 g。 ME计算公式： ME（MJ/kg DM）＝1.06+0.157GP+0.0084CP+0.0022 CF-0.0081Ash……………⑵ 式中： ME －—待测日粮代谢能值，单位为MJ/kg； GP －—待测日粮24 h净产气量，单位